HFF,人包皮成纤维细胞消化要有个度
【产品介绍】:
HFF,人包皮成纤维细胞消化要有个度 产品代号:HFF 中文名称:人包皮成纤维细胞 种属:人 是否鉴定:已鉴定 库存状态:现货 慧颖生物提供2000种类细胞株细胞系,400多株已鉴定细胞,涉及种属:人,大鼠,小鼠,兔子,鱼,牛,仓鼠等,我们提供好的产品,好的服务,好的技术,复苏周期短,价格优惠,细胞状态良好,饱满,有光泽,无支原体。 HFF,人包皮成纤维细胞消化要有个度 细胞培养,尤其是细胞系的培养,就细胞消化而言,多做、善于总结,就可以把细胞养的越来越好 绝大部分细胞消化只要用胰酶润洗一遍即可: 吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。 什么算是消化好了呢? 不需要把细胞全部消化成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了。 一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。 细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。 一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。 比较难消化的细胞: 润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm 培养皿,一次多加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,用胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。 常规的细胞实验,受消化影响不是很大: 如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响细胞外基质相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白。 EDTA的作用: 许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白,胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于整联蛋白的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法。 PBS洗涤: 消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为血清中含有抑制胰酶的蛋白。对于一些难消化细胞,可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制胰酶的活性。但对于绝大部分细胞用胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化,不需要配制不含Ca,Mg离子的溶液。 细胞代号 细胞名称 种属 鉴定结果 HFF,人包皮成纤维细胞消化要有个度 编号 中文名称 是否鉴定 5637 人膀胱癌细胞 人 √ 7703 人肝癌细胞 人 √ 143B 人骨肉瘤细胞 人 √ 22RV1 人前列腺癌细胞 人 √ 293FT 人胚肾细胞 人 √ 293T 人胚肾细胞 人 √ 435S 人乳腺癌细胞/人黑素瘤细胞 人 √ 453 人乳腺癌细胞 人 √ 6T-CEM 人T细胞白血病细胞 人 √ 769-P 人肾细胞腺癌细胞 人 √ 786-O 人肾透明细胞腺癌细胞 人 √ 95-D 人高转移肺癌细胞 人 √ 97H 人高转移性肝癌细胞 人 √ A172 人胶质母细胞瘤细胞 人 √ A2058 人黑色素瘤细胞 人 √ A2780 人卵巢癌细胞 人 √ A375 人黑色素瘤细胞株 人 √ A431 人表皮癌细胞 人 √ A498 人肾癌细胞 人 √ A549 人非小细胞肺癌细 人 √ A-673 人横纹肌肉瘤细胞 人 √ ACHN 人肾细胞腺癌细胞 人 √ AGS 人胃腺癌细胞 人 √ AN3CA 人子宫内膜腺癌(转移)细胞 人 √ ARH-77 人浆细胞白血病 人 √ ARO 没有,找不到信息 人 √ ARPE-19 人视网膜上皮细胞 人 √ B-CPAP 人甲状腺癌细胞 人 √ BEAS-2b 人正常肺上皮细胞 人 √ BEWO 人绒毛膜肿瘤细胞 人 √ BGC-823 人胃腺癌细胞(低分化) 人 √ BT-474 人乳腺导管癌细胞 人 √ BT-549 人乳腺管癌细胞 人 √ BXPC-3 人原位胰腺腺癌细胞 人 √ C-33 A 人子宫颈癌细胞 人 √ C643 人甲状腺癌细胞 人 √ C8166 人T淋巴细胞白血病细胞 人 √ Ca Ski 人宫颈癌肠转移细胞/人宫颈癌上皮细胞 人 √ Caco2 人结直肠腺癌细胞 人 √ CAKI-1 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞 人 √ cal-27 人舌鳞癌细胞 人 √ CALU-1 人肺癌细胞 人 √ CALU-3 人肺腺癌细胞(胸水) 人 √ CCD-1095SK 人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞 人 √ CCRF-CEM 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 人 √ CEM/C1 人急性淋巴细胞白血病细胞 人 √ CFPAC-1 人胰腺癌细胞 人 √ CNE1 人鼻咽癌细胞 人 √ CNE2 人鼻咽癌细胞 人 √ COLO 205 人结肠癌细胞 人 √ COLO 320DM 人结直肠腺癌细胞 人 √ CW-2 人结肠腺癌细胞 人 √ DAOY Daoy细胞,具体不清楚 人 √ DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤细胞 人 √ DETROIT 562 人咽头癌胸水转移细胞 人 √ DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞 人 √ DU 145 人前列腺癌细胞 人 √ EA.HY926 人脐静脉细胞融合细胞 人 √ ECV304 人脐静脉内皮细胞 人 √ ES-2 人卵巢透明细胞癌细胞 人 √ FADU 人咽鳞癌细胞 人 √ FTC-133 人滤泡性甲状腺癌细胞 人 √ GBC-SD 人胆囊癌细胞 人 √ GCIY 人 √ H1299 人非小细胞肺癌细胞 人 √ H1395 人肺腺癌细胞 人 √ H1650 人非小细胞肺癌细胞 人 √ H1703 人肺鳞癌细胞 人 √ H1755 人肺癌细胞 人 √ H1944 人非小细胞肺癌细胞 人 √ H1975 人肺腺癌细胞 人 √ H2170 人肺鳞癌细胞 人 √ H226 人肺鳞癌细胞 人 √ H292 人肺癌细胞(淋巴结转移) 人 √ H358 人非小细胞肺癌细胞 人 √ H460 人大细胞肺癌细胞 人 √ H520 人肺鳞癌细胞 人 √ H596 人肺腺鳞癌细胞 人 √ H661 人大细胞肺癌细胞 人 √ H716 人结直肠腺癌细胞 人 √ H838 人非小细胞肺癌细胞 人 √ Hacat 人永生化角质形成细胞 人 √ HBE 人支气管上皮样细胞 人 √ HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞 人 √ HCC1937 人乳腺癌细胞 人 √ HCC827 人非小细胞肺癌细胞 人 √ HCCC-9810 人胆管细胞型肝癌细胞 人 √ HCCLM3 人高转移肝癌细胞 人 √ HCT-116 人结肠癌细胞 人 √ HCT-8 人回盲肠癌细胞 人 √ HEC-1-A 人子宫内膜腺癌细胞 人 √ HEC-1-B 人子宫内膜腺癌细胞 人 √ HEK-293 人胚肾细胞 人 √ HEL 人红白细胞白血病细胞 人 √ HELA229 人宫颈癌复苏细胞 人 √ Hela-J 人 √ Hep G2 人肝癌细胞 人 √ HEP-2 人喉表皮样癌细胞 人 √ HEP3B 人肝癌细胞 人 √ HEY 人卵巢癌细胞 人 √ HFF 人包皮成纤维细胞 人 √ HFL1 人胚肺成纤维细胞 人 √ HFOB1.19 人SV40转染成骨细胞 人 √ HGC-27 人胃癌细胞(未分化) 人 √ HK-2 人肾皮质近曲小管上皮细胞 人 √ HL-60 人原髓细胞白血病细胞 人 √ HMEC-1 人微血管内皮细胞 人 √ HO-8910 人卵巢癌细胞 人 √ HPN1 人 √ HS683 细胞人脑视神经胶质瘤细胞 人 √ Hs888Lu 人肺成纤维细胞 人 √ HT-1080 人纤维肉瘤细胞 人 √ HT-29 人结肠癌细胞 人 √ HT-3 人 √ HTR8 人滋养细胞 人 √ HUCCT1 胆管上皮癌细胞 人 √ HuH-6 人肝母细胞瘤细胞 人 √ HUH-7 人肝癌细胞 人 √ HUT78 人T淋巴细胞白血病细胞 人 √ HUVEC-C 人脐静脉内皮细胞 人 √ ISK 人 √ JAR 人 √ JEG-3 人 √ JEKO-1 人 √ Jurkat,Clone E6-1 人 √ K-562 人 √ KATO III 人 √ KLE 人 √ KTC-1 人 √ KU812 人 √ KYSE-150 人 √ LI-7 人 √ LNcap clone FGC 人 √ L-O2 人 √ LOVO 人 √ LS 174T 人 √ MCF10A 人 √ MCF-7 人 √ MDA-MB-231 人 √ MDA-MB-231(DMEM) 人 √ MDA-MB-231(L-15) 人 √ MDA-MB-436 人 √ MDA-MB-468 人 √ MG-63 人 √ MGC-803 人 √ MIA PaCa-2 人 √ MM.1S 人 √ MNNG/HOS Cl #5 人 √ MRC-5 人 √ MV4-11 人 √ N87 人 √ NCI-H1299 人 √ NCI-H1563 人 √ NCI-H2452 人 √ NCI-H647 人 √ NK-92 人 √ NTHY-ORI-31 人 √ OCM1A 人 √ OS-RC-2 人 √ OVCAR-3 人 √ PANC-1 人 √ PC-3 人 √ PC-3M 人 √ PC-9 人 √ PLC/PRF/5 人 √ Raji 人 √ RBE 人 √ RD 人 √ RKO 人 √ RL95-2 人 √ RT4 人 √ RWPE-1 人 √ SAOS-2 人 √ SH-SY5Y 人 √ SiHa 人 √ SJCRH30 人 √ SK-BR-3 人 √ SK-HEP-1 人 √ SK-MES-1 人 √ SK-N-BE(2) 人 √ SK-NEP-1 人 √ SK-N-SH 人 √ SK-OV-3 人 √ SPC-A-1 人 √ SU-DHL-6 人 √ SV-HUC-1 人 √ SW 1990 人 √ SW1353 √ SW480 人 √ SW579 人 √ SW620 人 √ SW-620 人 √ SW839 人 √ SW982 人 √ T/G HA-VSMC 人 √ T-24 人 √ T47D 人 √ T82 人 √ T84 人 √ TCA-8113 人 √ TE 353.Sk 人 √ TE-1 人 √ THP-1 人 √ TMK1 人 √ TPC-1 人 √ TT 人 √ TTA1 人 √ U-118MG 人 √ U-2 OS 人 √ U251 人 √ U87 人 √ U-87MG 人 √ U-937 人 √ UM-UC-3 人 √ VCAP 人 √ WERI-RB-1 人 √ WI-38 人 √ WISH 人 √ WPMY-1 √ ZR-75-1 人 √ ZR-75-30 人 √