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做转染试验时小编就抱着一个信仰，就是要给细胞点“色彩”看（荧光），但你知道吗？就这个简单的试验进程，小小的细胞却有着大大的能量，试验进程中带阳离子的脂质体充当着“搬运工”的角色将质粒从胞外“抓”到胞内，而细胞为质粒的仿制、转录、翻译提供“场所和原材料”，自己也跟着“增光填色”,但“上色”进程中会遇到一些问题，总结下来主要有以下二个方面： 细胞状况差 转染功率低 1：转染后细胞状况较差 A：剖析：主要是铺板和反响液配制的原因 细胞状况是整个试验的要害，假如细胞状况欠好，则转染后细胞状况当然就好不了 铺板：过多或不均匀，细胞长的太满就会状况较差 脂质体本身有毒性，假如脂质体加入量太多，会导致细胞状况较差，或者细胞死亡，主张在做正式试验前，先做一下预试验，探索一下质粒和脂质体的配比。 2：转染后荧光功率低 A：剖析：主要是细胞原因和“搬运”进程中的问题 1、细胞状况仍然是重中之重，假如有一段时间转染效果很不理想，必需求换一批次细胞； 2、加入意图质粒后悄悄混匀，太用力会损坏混合液的结构， 3、质粒与转染试剂的比值： 过高一部分质粒不能进入细胞，过低“搬运工”太多，有毒性且浪费； 4、吸、打液体时注意枪头内液面高度，是否彻底打出； 5、反响液配好后等待20min，质粒才会被彻底包裹；  6、反响液滴加加入细胞，使“脂质体+质粒”均匀分布； 7、质粒重复冻融影响浓度，尽量削减冻融次数；脂质体 -20℃保存，用完应立刻放回； 8、必要时需求检测一下质粒的浓度是否精确；