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支原体检测试剂盒操作步骤介绍

发布时间:2022-02-18     作者:德尔塔   分享到:

【产品介绍】:

贴壁细胞: 1、被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中,接种密度为1-2×104。接种正常无支原体感染的同种细胞,作为阴性对照。 2、5天后,先吸去培养液,再加入1ml的固定液,静置20min, 3、吸去固定液,晾干。 4、于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15-20min或室温静置20~30min。 5、吸去Hoechst 33258工作液,加入2ml灭菌超纯水洗涤三次,直接风干。风干后加入一滴封片液,并以盖玻片覆盖。 6、荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。 悬浮细胞: 1、收集需检测的细胞,1500rpm,5min。 2、将收集的细胞涂片于载玻片上,再加1ml的固定液,静置20min。 3、吸去固定液,晾干。 4、于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞),37℃避光放置15~20min或室温静置20~30min。 5、吸去Hoechst 33258工作液,用无菌水洗涤玻片3次,直接风干。风干后加入一滴封固液,并以盖玻片覆盖。 6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。