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RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂的制备步骤
发布时间:2021-04-02     作者:wyf   分享到:

RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂的制备步骤

纳米乳作为一种新型的纳米材料,具有良好的生物相容性、细胞跨膜运输能力,可应用于肿瘤的诊断以及作为药物载体。全氟化碳(PFCs)纳米乳作为19F MRI示踪剂已经被广泛应用。全氟溴辛烷(PFOB)是一种无毒性的PFCs,可提供较强的F信号,更是被广泛应用于检测肿瘤细胞、组织以及对活体肿瘤的19F MRI成像。另外,PFOBXe具有较好的溶解性,氙气是一种理想的介质,因为它是一种惰性,无毒的气体,在人体内没有背景信号。129Xe的天然丰度为26.4%,可通过自制的极化装置产生超极化129Xe气体。将超极化的129XeCEST技术相结合可达到超高的灵敏度,低可在皮摩尔浓度下检测到129Xe造影剂。使用全氟溴辛烷(PFOB)作为129Xe的载体,它具有生物相容性好、无毒、体内代谢快等优点,PFOB纳米乳作为129Xe/19F双通道多功能显影剂,具有超高的灵敏度用于129Xe MRI以及19F MRI成像。制备方法简单、材料易得有较好的生物相容性,可以应用于生物体内的核磁共振成像。

本文在于克服现有技术的不足,目的是在于提供一种RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂及其制备方法和应用;本文提供的PFOB纳米乳结合了129Xe MRI19F MRI两种磁共振成像方法,并且引用RGD配体与癌细胞上的受体特异性结合的靶向诊断的策略,使纳米乳选择性的识别肿瘤细胞。通过129Xe MRI19F MRI技术实现对肺癌肿瘤的靶向诊断。该显影剂有超高灵敏度以及较好的生物相容性。该纳米乳制备方法简单,原料便宜易得,适合用于体内磁共振成像。

包括如下步骤:

(1)纳米乳的制备:先将占磷酸盐缓冲液4wt%的磷脂和占磷酸盐缓冲液0.5wt%的普朗尼克F-68溶解在1ml磷酸盐缓冲液(PBS)中,然后将占磷酸盐缓冲液10wt-20wt%的全氟溴辛烷(PFOB)加入到上述缓冲液中,并在超声仪中处理5-10分钟,再用试管振荡器振荡10-15分钟,得粗乳液;之后将制备的粗乳液用去离子水稀释20倍,再通过微孔滤膜挤制2次,得到纳米乳记为NPs

(2)RGD-纳米乳的制备:将胆固醇-PEG2000-RGD加入到步骤(1)制备的纳米乳液中,然后置于摇床上以300rpm的速度振荡1小时得到靶向纳米乳NPs-RGD

(3)荧光标记的RGD纳米乳的制备:向步骤(2)制备的靶向纳米乳中加入浓度为5mg/mL的荧光染料DiI,然后置于摇床上以300rpm的速度振荡1小时,得到DiI标记的RGD-纳米乳。

优选的,所述胆固醇-PEG2000-RGD的制备方法为:将胆固醇-PEG2000-MalRGDyc按摩尔比10:1-1:1加入1ml PBS中,室温下置于摇床上以300rpm的速度振荡20-24小时,然后用透析袋在超纯水中透析去除未反应的RGDyc分子,经冷冻干燥机冻干得到靶向分子胆固醇-PEG2000-RGD

优选的,所述磷脂为大豆卵磷脂(Lipoid S75)

优选的,所述磷酸盐缓冲液的浓度为5mMpH7.4

优选的,所述微孔滤膜的孔径为0.22μm

优选的,所述胆固醇-PEG2000-RGD的加入量与磷脂的摩尔比为120

优选的,步骤(1)中磷脂与F-68的质量比为81

优选的,所述磷脂与全氟溴辛烷(PFOB)的质量比为1:2.5-1:5

另外,本文还要求保护由所述方法制备得到的RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂以及该显影剂应用于肺癌肿瘤的早期MRI诊断。

与现有技术相比,本文具有以下的明显有益效果:

(1)本文使用S75磷脂做膜材料,用胆固醇-PEG2000-RGD分子进行修饰,采用超声和振荡的方法制备纳米乳,其中F-68的添加可以使微乳结构更加稳定,材料便宜易得,制备方法简单并具有良好的生物相容性;

(2)本文制备的纳米乳同时作为129Xe MRI19F MRI显影剂以及光学成像显影剂,是一种129Xe/19F双通道、双模态MRI显影剂;

(3)作为129Xe Hyper CEST显影剂,本文纳米乳具有超高的灵敏度高,可在皮摩尔浓度下对肺癌细胞进行MRI成像。通过129Xe MRI19F MRI以及光学成像证明了该纳米乳对肺癌肿瘤具有较好的靶向性,该显影剂可以应用于肺癌肿瘤的早期MRI诊断。

产品供应:

右旋糖酐-二乙烯三胺五乙酸-钆离子螯合物

Dextran-DTPA-Gd显影剂

Gd-EOB-DTPA显影剂

氧化铁微颗粒(MPIOs)MRI显影剂

活化Pb/a配体MRI显影剂

肝素标记超顺磁氧化铁粒子(HepSPIO)

葡聚糖包裹的超顺磁性Fe3O4纳米颗

稀土化合物核磁共振成像(MRI)

树状大分子CT/MRI双模态成像造影剂

锰螯合物磁共振成像(MRI)

两亲性肿瘤靶向性MRI造影剂中间体

Mn3O4/mSiO2纳米粒子MRI造影剂

含有邻二酚羟基的类EDTA配体和非钆磁共振造影剂

非钆顺磁性金属配合物磁共振造影剂

非钆金属簇集体磁共振造影剂

Gd()Mn()配合物磁共振成像造影剂

MRI顺磁性造影剂Gd-DTPA

含硝基咪唑基的水溶性磁共振成像造影剂

含金属两亲配合物的顺磁性固体脂质纳米颗粒(pSLN)

D-半乳糖基的顺磁性金属配合物磁共振成像造影剂

肝靶向性磁共振成像造影剂

高分子/磁性纳米颗粒复合微囊—声/磁双重显影剂

(SPIO)超顺磁性氧化铁显影剂

T1显影剂钆螯合物GD-DTPA

Hab18-SPIO磁共振造影剂

靶向人肝细胞肝癌表面抗原Hab18g

T2核磁共振影像MRI

含有超顺磁性氧化铁奈米粒子rABL

荧光金纳米簇磁共振和荧光成像造影剂

标记乳糖基白蛋白SPIO磁共振肝细胞受体显影剂

标记乳糖基白蛋白的超顺磁性氧化铁粒子(LAC-HSA-SPIO)

氧化铁基顺磁性/伪顺磁性纳米颗粒MRI T1显影剂

含磺胺基的顺磁性金属配合物磁共振成象造影剂

6-(1,3-二氧代异吲哚啉)己酸磁性纳米粒子核磁共振成像

含硝基咪唑的Gd()/99mTc()配合物造影剂

含天门冬氨酸-葡聚糖的顺磁性金属配合物磁共振成像造影剂

包含CEST活性的顺磁性配合物MRI造影剂

顺磁性聚膦腈纳米管磁共振造影剂

顺磁性聚膦腈纳米管Gd-PZSNTMRI造影剂

顺磁性磁共振造影剂礼-二乙烯二胺五乙酸(Gd-DTPA

超顺磁性氧化铁/Gd-DTPA

含钆(Gadolinium)显影剂

顺磁性金属配合物磁共振成像造影剂

新型靶向液态氟碳纳米乳超声造影剂

眼底荧光血管造影

载吲哚菁绿超声微泡造影剂/ICG-PLGA

钆的螯合物磁共振造影

钆双胺磁共振造影

欧乃影磁共振造影

钆塞酸二钠磁共振造影

普美显磁共振造影

钆贝葡胺磁共振造影

莫迪司磁共振造影

线性造影剂

大环类造影剂

离子型造影剂

非离子型造影剂

 

PEG-PAMAMs修饰谷氨酸缀合的Fe3O4纳米颗粒

β-环糊精/聚氨酯复合材料

FR-HCPT-PNPCA喜树碱前药

半乳糖多聚赖氨酸(Gal-PLL)

USPIOswithFunctionalizedSurfaces造影剂

T1/T2造影剂脂质体定制服务

Gd磁共振钆T1造影剂脂质体

14:0PE-DTPA(Gd),磷脂偶联钆

DSPE-DTPA-Gd-DSPE造影剂

DPPE-DTPA-Gd-DPPE造影剂

DMPE-DTPA-Gd-DMPE造影剂

Silica-coatedGd(DOTA),钆修饰二氧化硅

HA-DOTA-Gd,透明质酸修饰钆造影剂

Biotin-Gd-DOTA,生物素修饰的钆

DOTA-Gd-peptide,钆修饰多肽

pDHPMA-Cy5.5-DOTA-Gd

PAMAM-PEG-DOTA-Gd;树枝状钆化合物

DMPE-DTPA-Gd

Gd-DOTA-PLGA造影剂

Gd-p-SCN-Bn-DOTA,钆-大环配体

Gd-BSA-FITC,钆-牛血清白蛋白-绿色荧光素

Gd-BSA,钆-牛血清白蛋白

Gd-DTPA/Gado-DTPA造影剂

FA-PEG-PAMAM-Cur叶酸接枝姜黄素PAMAM树枝状大分子

靶向大分子造影剂(FA-PEG-PAMAM-Gds)

RGD多肽修饰二氧化硅纳米粒

-DOTA探针分子DOTA-EM7

PEG修饰重组腺病毒PLGA超声造影剂

荧光标记介孔二氧化硅磁颗粒(FITC-SiO2@Fe3O4mesoporoussilica/Fe3O4Magneticnanoparticles,FITCfunction

CarboxylicFunctionalMesoporousSio2microspheres50nm)羧基化介孔二氧化硅微球

大孔径介孔二氧化硅纳米粒子Mesoporoussilicamicrosphereswithlargeporesize

包裹四氧化三铁T2造影剂脂质体定制

磁共振钆T1造影型脂质体定制

超小氧化钆点缀的介孔二氧化硅

四苯基乙烯-2(TPE-2Gd)

上述产品齐岳生物均可供应,仅用于科研,不可用于人体实验!

wyf 04.02




【公司简介】:

德尔塔(Delta) 是西安齐岳生物科技有限公司旗下品牌,德尔塔(Delta) 目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等,这些产品在国内给数百家高校实验室和数十家中科研研究所及药厂长期供应,德尔塔(Delta) 成立之初以代理国外进口品牌的为主,产品主要涉及磷脂、PEG衍生物等产品,随着公司的发展和扩大,公司更注重自主品牌的建立和高附加值的高端产品研发并且注册了自己品牌商标,在未来3-5年公司预计将建立一个综合型的大型实验室,该实验室不仅提供全方面的纳米靶向药物科研产品及定制外包服务,还将承接其他研究领域的科研产品和定制外包服务,预计该实验室还将与国内数十家大型药厂进行前期药物研发的科研合作,为药厂提供科研产品及技术服务,在研发阶段协助药厂开发抗肿瘤新药,一旦新药开发成功,在研发阶段积累的高端辅料产品和研发经验将支持我们建立一条药用辅料生产线给该肿瘤新药长期提供高端药用辅料。在高校和研究所科研领域上面公司不但要抢占国内市场还要开拓国际市场,国际业务以在2018年初开始启动,部分产品已远销欧美大陆,计划在未来3年-5年公司的拳头产品要抢占大量的国际市场,使得德尔塔(Delta) 品牌发展成一个国际品牌。

 

【经营种类】:

德尔塔(Delta) 经营的产品种类包括有:合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点计化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、热门肿瘤原料药、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二氧化硅,聚合物微球,近红外荧光染料,聚苯乙烯微球,上转换纳米发光颗粒,MRI核磁造影产品,荧光蛋白及荧光探针等等。


【温馨提示】:

德尔塔(Delta)供应的产品仅用于科研,不能用于人体治疗、药物开发、和其他商业用途,如有购买方或第三方采购我公司的产品用于治疗、药物开发或商业用途,购买方或第三方将承担所有法律责任,我公司也将追究其法律责任。以上产品均可定购。


【运输说明】:


极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。

低温产品:低温产品运输过程中加装冰袋运输。

常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。


【目前合作的部分科研单位】:

重庆医科大学,西南大学,第三军医大学,西南交通大学,重庆大坪医院,四川大学,华西医院,电子科技大学,哈尔滨工业大学,吉林大学,长春应化所,沈阳药科大学,中国海洋大学,北京大学,清华大学,北京理工大学,北京师范大学,北京中医药大学,中国农业大学,北京市肿瘤防治研究所,北京军事医学科学院,中国科学院动物研究所,中国科学院化学研究所,第四军医大学,西安交通大学,湖南大学,中南大学,武汉大学,武汉协和医院,华中科技大学,中山大学,广东药科大学,深圳大学,华南理工大学,中国科研学院先进技术研究院,厦门大学,福州大学,浙江大学,南京大学,南京医科大学,东南大学,中国药科大学,苏州大学,山东大学,山东师范大学,上海交通大学,华东理工大学,复旦大学,郑州大学,河南烟草局,宁夏医科大学,新疆大学,中国人民大学,中国科学院苏州纳米研究所,国家纳米科学中心,武汉病毒研究所,中国科学院过程工程研究所,江苏省原子医学研究所,中国科学院宁波材料技术与工程研究所,中国科学院上海硅酸盐研究所,中国医学科学院生物医学工程研究所等等

 

【目前合作过的药厂】:

石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司,西安力邦制药有限公司,上海药明康德新药开发有限公司,安徽省国平药业有限公司,苏州亚盛药业有限公司,兆科药业(合肥)有限公司,南京绿叶制药有限公司,山东绿叶制药有限公司,大冢(上海)药物研究开发有限公司,国药集团化学试剂有限公司,长春金赛药业有限责任公司,成都苑东药业有限公司,浙江海正药业等。


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