化学发光试剂的原理及其分类
【产品介绍】:
化学发光 (ChemiLuminescence ,简称为 CL)法是分子发光光谱分析法中的一类,它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光法在痕量金属离子、各类无机化合物、有机化合物分析及生物领域都有广泛的应用。
基本原理
化学发光(ChemiLuminescence ,简称为CL)法是分子发光光谱分析法中的一类,它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光 (光辐射) 所吸收的能量来源不同。体系产生化学发光,必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。
以下是常见的发光剂及其原理介绍:
1.鲁米诺及其衍生物
鲁米诺的衍生物主要有异鲁米诺、4— 氨基已基—N —乙基异鲁诺及 AHEI 和 ABEI 等。鲁米诺在碱性条件下可被一些氧化剂氧化,发生化学发光反应,辐射出发射波长为425nm的化学发光。
在通常情况下鲁米诺与过氧化氢的化学发光反应相当缓慢,但当有某些催化剂存在时反应非常迅速。常用催化剂是金属离子,在很大浓度范围内,金属离子浓度与发光强度成正比,从而可进行某些金属离子的化学发光分析,利用这一反应可以分析那些含有金属离子的有机化合物,达到很高的灵敏度。其次是利用有机化合物对鲁米诺化学发光反应的抑制作用,测定对化学发光反应具有猝灭作用的有机化合物。其三是通过偶合反应间接测定无机或有机化合物。其四是将鲁米诺的衍生物如异鲁米诺 (ABEI)标记到羧酸和氨类化合物上,经过高效液相色谱 或液相色谱 分离后,再在碱性条件下与过氧化氢-铁氰化钾反应进行化学发光检测。也可以采用其它分离方法,如将新合成的化学发光试剂异硫氰酸异鲁米诺标记到酵母 RNA 后,通过离心和透析分离,然后进行化学发光检测。此外应用的还有 N2(B2 羧基丙酰基) 异鲁米诺,并对其性能进行了研究。
2.光泽精
光泽精以硝酸盐的形式存在,在碱性介质中,过氧化氢将其氧化成四元环过氧化物中间体,而后裂解生成激发态的吡啶酮而发光。利用光泽精与还原剂作用,可用于测定临床医学上一些重要的还原性物质,如抗坏血酸、肌酸酐、谷胱甘肽、葡萄糖醛酸、乳糖、葡萄糖。
3.洛粉碱
洛粉被用于多种元素的分析测定。
4.过氧化草酸酯类
草酸盐类化学发光反应大都生成过氧草酰中间体,因此这类反应亦称过氧草酰类化学发光反应。过氧草酸盐类化学发光分析应用的推广还有赖于新的荧光衍生试剂的开发。
5.吖啶酯类
吖啶酯类化合物是一类很有前途的非放射性核酸探针标记物,用作 DNA 的发光探针,发光量子产率高,稳定性好,标记物对杂交反应的动力学和杂交体的稳定性无影响,可以直接在碱性介质中进行化学发光反应。
以上五种化学发光剂化学发光量子产率高,水溶液稳定,能被多种氧化剂直接氧化而发光,也可被众多的金属高于催化发光反应而发光,许多无机、有机和生化组分也能增强或抑制其发光,因此应用十分广泛。报道的有邻菲咯啉,碱基水杨酸、罗明丹—B、没食子酸、香豆素、皮素,茜素紫、苏木色精,培花青,三苯甲烷类染料,丙酮、乙醇、羟胺等。这些试剂商品化程度高,价廉,使用方便,但化学发光量子产率较低,因此,研究增敏试剂来提高它们的化学发光量子产率是非常关键的。
化学发光在生物领域的应用
1.血浆和血清的化学发光
2.尿液的化学发光
3.物质抗氧化活性的测定
我们提供的化学发光试剂有:
鲁米诺/3-氨基苯二甲酰肼/发光氨
异鲁米诺/4-氨基邻苯二甲酰肼
吖啶酯DMAE-NHS
吖啶酯NSP-DMAE-NHS
吖啶盐NSP-SA
吖啶盐NSP-SA-NHS
吖啶酰肼NSP-SA-ADH
吖啶酯ME-DMAE-NHS
N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐TOOS
N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐TOPS
N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基l)-3-甲氧基苯胺钠盐ADOS
N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐ADPS
N-乙基-N-(3-磺丙基)苯胺钠盐ALPS
N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐DAOS
N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐HDAOS
N,N-二(4-磺丁基)-3,5-二甲基苯胺钠盐MADB
N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐MAOS
DA-67
TOOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐
MAOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐
ADOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基l)-3-甲氧基苯胺钠盐
TOPS /N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐
ADPS/N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐
ALPS/N-乙基-N-(3-磺丙基)苯胺钠盐
DAOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐
HDAOS/N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐
MADB/N,N-二(4-磺丁基)-3,5-二甲基苯胺钠盐
三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐Tris-HCL
三(羟甲基)氨基甲烷Tris
N,N-二羟乙基甘氨酸BICINE
3-(环己胺)-1-丙磺酸CAPS
3-吗啉丙磺酸MOPS
N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸TAPS
N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-3-丙磺酸 EPPS
3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸MOPSO
4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES
哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES
磷酸烯醇丙酮酸三(环已胺)盐PEP
以上内容来自齐岳小编zzj 2021.1.25