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小鼠体内光学成像的原理和实验步骤-齐岳生物
发布时间:2020-07-08     作者:zhn   分享到:

小鼠体内光学成像的原理和实验步骤-齐岳生物


西安齐岳生物科技有限公司整体动物实验服务,动物造模实验,动物体内光学成像,实验动物饲养及造模服务、细胞周期测试、细胞凋亡测试、药动学实验外包方面有丰富的经验。提供多种小鼠,大鼠,兔子等动物的活体成像,为您定制专业的实验方案。


活体动物体内光学成像主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶基因(Luciferase)标记细胞或DNA,而荧光技术则采用绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等荧光报告基因和FITCCy5Cy7等荧光素及量子点(quantumdotQD)进行标记。


一、活体动物体内光学成像技术主要有种标记方法

生物发光

1.荧光素酶基因标记

荧光素酶基因(Luciferase)标记细胞或DNA

 

荧光发光

1.荧光蛋白标记

荧光蛋白适用于标记细胞、病毒、基因等,通常使用的是GFPEGFPRFPDsRed

2.荧光染料标记

荧光染料标记和体外标记方法相同,常用的有Cy3Cy5Cy5.5Cy7,可以标记抗体、多肽、小分子药物等

3.量子点标记

量子点作为一类新型的荧光标记材料,其在长时间生命活动监测及活体示踪方面具有独特的应用优势。


二、
小鼠体内光学成像的原理:

小动物活体成像技术是采用高灵敏度制冷CCD配合特制的成像暗箱和图像处理软件,使得可以直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。通过对同一组实验对象在不同时间点进行记录,跟踪统一观察目标(标记细胞及基因)的移动及变化。操作简单、所得结果直观、灵敏度高,已广泛应用于生命科学、医学研究及药物开发等发面。肿瘤学领域:建立肿瘤模型,通过活体成像技术可以测量肿瘤的生长、转移以及对药物的反应,使肿瘤学更接近临床的发病的微观环境。相比传统方法,不仅灵敏度提高(检测到微小肿瘤病灶),而且适合于肿瘤体内生长的定量分析,避免由于宰杀老鼠而造成的组间差异。药物研究:通过活体成像技术可研究与药物代谢有关的基因,药物作用通路以及药物的靶向脏器和体内分布规律。

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三、服务流程
1、制作动物模型
2、细胞标记或动物标记
3、活体成像
4、数据处理


四、提供一种小鼠活体成像实验步骤:
1).SPFBALB/C裸鼠,68 周龄,1820克,实验前24 h 自由进食、饮水。
2)
.于实验裸鼠腹腔内注射2%戊巴比妥钠300μL(215 mg/ kg)麻醉动物。将裸鼠俯卧位平放于小动物多光谱活体成像系统的记录暗箱中。实验时将Cy7Cy7标记的生物分子或药物溶于水(或甲醇/乙醇/乙二醇,有时DMSO 200uL能把小鼠杀死)稀释后,于裸鼠尾静脉注射200μL(浓度0.5 mg/mL)[用量和时间需要客户根据自己的仪器和药物试剂等条件优化]。每5min 记录1 张动物在体内发射荧光的成像图片,分析荧光药物的分布情况。对照鼠不注射药物,进行同时记录。记录结束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、肾等脏器,进行成像。
3)
.Cy7 检测时激发波长700770 nm带通,发射波长790 nm长通。液晶可调谐滤光片扫描范围 780950 nm,扫描步进10 nm。曝光时间为500 ms

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结果说明:不同的药物代谢时间不一样,注射入裸鼠体内,荧光立即分布全身,然后逐步向膀胱聚集,呈现显著的肾排泄的特点一般46小时,快的只有30分钟;如果是骨骼和鼻腔等部位靶点的Cy7标记药物,有客户反映一周后活体成像系统仍能检测到荧光成像。器官切片观察:将解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4小时以上,0%20%30%PBS蔗糖依次沉底,20μm切片,多聚赖氨酸洗过的载玻片贴片,晾干,DAPI染色。共聚焦显微镜观察,激光器为氦氖 633 nm


西安齐岳生物提供以下定制服务项目列表:

药物代谢动学参数分析

大小鼠高脂血症模型造模

大小鼠I型糖尿病模型造模

大鼠脊髓损伤模型造模

肝细胞代谢稳定性试验

基因芯片分析

药代体外的吸收、分布、代谢和排泄研究

药动代谢物鉴别/分析

细胞诱导/分化实验外包

血浆动力学检测

组织分布研究

细胞毒性实验

细胞增殖与活性实验

创伤性关节软骨损伤修复动物模型基因敲除技术

药代动力学体外安全性评价

血浆蛋白结合率测定

血浆稳定性试验

肝微粒体代谢试验

●CYP450抑制试验

●CYP450诱导试验

代谢产物推测

代谢产物确证

代谢途径的推测

代谢途径的确证

跨膜转运试验

药物-药物相互作用

代谢表型研究

环孢素mPEG-PLGA嵌段共聚物胶束在大鼠体内的药代实验外包

对乙酰氨基酚在大鼠体内药物代谢动力学实验外包

丹酚酸B单体在正常大鼠和高脂血症大鼠体内的药代外包

热毒宁注射液在大鼠体内的药代动力学外包

栀子苷单体在大鼠体内的药代动力学外包

水飞蓟宾口服亚微乳剂在大鼠体内的药动外包

●18α-甘草酸二铵对格列本脲在实验性糖尿病大鼠体内药代实验

奈韦拉平纳米混悬液在小鼠体内的药代实验外包

氟比洛芬微乳在大鼠体内的药物代谢动力学实验外包

半乳糖神经酰胺脂质体包封的齐多夫啶(azidothymidine,AZT)在小鼠体内的药代外包

克拉霉素对替硝唑在大鼠体内的药代动力学外包

奥沙利铂聚乙二醇修饰脂质体在大鼠体内的药代实验

京尼平苷酸(GPA)在胆汁淤积型大鼠体内的药代外包

小檗碱(BBR)在大鼠血浆内的药代动力学实验外包

●8-十六烷基小檗碱(8-BBR-C16)在大鼠血浆内的药动外包

奥硝唑(ONZ)在重症急性胰腺炎(SAP)小鼠体内的实验外包

奥硝唑(ONZ))小鼠体内的药动实验外包

●(modafinil,MOD)在小鼠体内的药动参数检测

葛根芩连汤中小檗碱在糖尿病模型大鼠体内的药代参数检测

酮洛芬(KPF)脂质体凝胶在大鼠体内的药代外包

金森脑泰注射液(CBN)中葛根素在正常大鼠体内的药动外包

金森脑泰注射液(CBN)中人参皂苷 Rg1在正常大鼠体内的药动参数检测

川芎嗪醇质体贴片在大鼠体内的药代动力学实验外包

●(modafinil,MOD)在小鼠体内的药动参数检测

氨溴索对多索茶碱(DP)在大鼠体内的药代参数检测

齐墩果酸纳米脂质体在大鼠体内的药代实验外包

口服丁香酚在大鼠体内的药代动力学实验外包

四神丸水煎液中补骨脂素和异补骨脂素在大鼠体内的药动实验外包

乳糖化-去甲斑蝥素纳米粒在大鼠体内的药代参数检测

磷酸咯萘啶在小鼠体内的药物代谢动力学实验参数检测

盐酸奥昔布宁凝胶剂与片剂在大鼠体内的药代外包

五柴颗粒中五味子在小鼠体内的药动外包

黄连-吴茱萸配伍中盐酸小檗碱在大鼠体内的药代参数检测

塞来昔布纳米混悬剂(CXB-NSs)在大鼠体内的药动外包

原儿茶酸在大鼠体内的药物代谢动力学外包

康艾注射液和苦参素注射液在大鼠体内药动学外包

马兜铃酸在大鼠体内药代学外包

内脂质体干扰素在小鼠体内药代动力学外包

盐酸戊乙奎醚在小鼠体内药物代谢动力学外包

天麻素在大鼠体内药动学研究外包

绿原酸在大鼠体内的药代学实验外包

黄芩苷在大鼠体内的药动学研究外包

●(ephedrine,E)在小鼠体内药代动力学研究外包

银杏叶提取物含药血清在大鼠体内药动外包

脾虚症大鼠甘草甜素的药动外包

芒果苷自微乳给药系统在大鼠体内的药代实验

替莫唑胺固体脂质纳米粒在小鼠体内药动实验

甲氨蝶呤红细胞载体在大鼠体内药代实验

环孢素固体分散体在大鼠体内药动实验外包

●3-O-芸香糖苷在大鼠体内药代动力学参数检测

白芍总苷在免疫性肝损伤小鼠体内的药代实验

大川芎方多元释药系统在小鼠体内的药动参数检测

壳聚糖包覆左旋多巴脂质体冻干制剂在大鼠体内的药动实验外包

西咪替丁对大鼠体内的药代动力学参数检测

低氧与常氧状态下罗红霉素在大鼠体内的药代外包

盐酸阿霉素壳聚糖纳米粒在大鼠脑内药代动力学外包

低分子量肝素凝胶对瘙痒模型小鼠的药代参数检测

芹菜素囊泡在小鼠体内的药代动力学实验外包

重组水蛭素在大鼠体内药物代谢动力学外包

盐酸川芎嗪(TMP)经大鼠鼻腔给药后的脑内药动实验

知母皂苷B-IISD大鼠体内的药代实验参数检测

吴茱萸碱脂质体在大鼠体内的药代

冬凌草甲素在小鼠体内的药动

大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒在小鼠体内的药动外包

胆固醇-半乳糖配体介导的多烯紫杉醇脂质体大鼠体内药代外包

紫杉醇纳米混悬剂在大鼠体内的药动实验外包

淡豆豉中异黄酮成分在大鼠体内的药代参数检测

黄芩素在大鼠体内的药代动力学实验外包

苦参碱在大鼠体内的药物代谢动力学外包

尼莫地平前体脂质体在小鼠体内的药代参数检测

盐酸伊立替康纳米粒(irinotecan hydrochloride nanoparticles,CPT-11NPs)在大鼠体内的药代参数检测

温馨提示:西安齐岳生物供应的化学试剂、纳米材料、药动学外包产品仅用于科研,不能用于人体


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