-
细胞培养的用途有哪些
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞，也可以是细胞群。 细胞培养目的与用途 一、药物研究与开发 （1） 新药筛选：如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。 （2） 疫苗研究与开发：如病毒性疫苗的研究与开发（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、肿瘤疫苗（多肽疫苗）等。 （3） 基因工程药物研究与开发：如干扰素研究与开发，细胞生长因子研究与开发等。 （4） 细胞工程药物研究与开发：生物活性多肽研究与开发，人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。 （5） 单克隆抗体制备：包括诊断用单克隆抗体，**用单克隆抗体。 二、基础研究 （1） 药物作用机理 （2） 基因功能 （3） 疾病发生机理 常见的几种细胞培养基有RPMI-1640，DMEM培养基，MEM培养基，MS培养基等。
-
elisa试剂盒白介素类表观遗传学关于DNA甲基化
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
elisa试剂盒白介素类表观遗传学是研究表观遗传变异的遗传学分支学科从目前的研究来看,X 染色体剂量补偿、DNA 甲基化、组蛋白密码、基因组印记、表观基因组学和人类表观基因组计划等问题都是表观遗传学研究的内容。其中甲基化是基因组DNA 的一种主要表观遗传修饰形式,是调节基因组功能的重要手段。在脊椎动物中,CpG二核苷酸 是DNA 甲基化发生的主要位点。CpG常成簇存在,人们将基因组中富含CpG的一段DNA 称为CpG岛（CpGisland） ,通常长度在1kb～2kb 左右。CpG岛常位于转录调控区附近,DNA 甲基化的研究与CpG岛的研究密不可分。在DNA 甲基化过程中,胞嘧啶突出于DNA 双螺旋并进入与胞嘧啶甲基转移酶 结合部位的裂隙中,该酶将S - 腺苷甲硫氨酸（SAM） 的甲基转移到胞嘧啶的5′位,形成5 - 甲基胞嘧啶（5 - methylcytosine ,5MC） 。体内甲基化状态有三种:持续的低甲基化状态,如持家基因;诱导的去甲基化状态,如发育阶段中的一些基因;高度甲基化状态,如女性的一条缢缩的X 染色体。DNA 甲基化主要是通过DNA 甲基转移酶 家族（DNAmethyltransferase ,Dnmt ） 来催化。DNA 甲基转移酶分两种:一种是维持甲基化酶,Dnmtl ;另一种是重新甲基化酶如Dnmt3a 和Dnmt3b ,它们使去甲基化的CpG位点重新甲基化。在细胞分化的过程中,基因的甲基化状态将遗传给后代细胞。但在哺乳动物的生殖细胞发育时期和植入前胚胎期,其基因组范围内的甲基化模式通过大规模的去甲基化和接下来的再甲基化过程发生重编程,从而产生具有发育潜能的细胞。DNA 甲基化影响到基因的表达,与肿瘤的发生密切相关。甲基化状态的改变是致癌作用的一个关键因素,它包括基因组整体甲基化水平降低和CpG岛局部甲基化程度的异常升高,这将导致基因组的不稳定（如染色体的不稳定、可移动遗传因子的激活、原癌基因的表达） 。把癌基因组学与表观遗传学的研究结合起来,是癌症研究的发展趋势。人类的一些癌症常出现整个基因组DNA 的低甲基化,但人们并不清楚这种表观遗传变化是肿瘤产
-
人ELISA试剂盒实验酶标仪环境的重要性
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
科研者的耐心、学习，还有人ELISA试剂盒及仪器的使用效果。酶标仪作为人ELISA试剂盒实验的仪器之一，对工作环境有着一定的重要性和注意事项。 重要性： 1. 为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。 2. 操作环境温度应在15℃至40℃之间，环境湿度在15%~85%之间。 3. 仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。 4. 操作时电压应保持稳定。 5. 操作环境空气清洁，避免水汽、烟尘。 6. 保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。 7. 仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。 使用注意： 1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性. 2.若不同批号人ELISA试剂盒的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。 3.反应时间的误差，做大量标本时，*孔和zui后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。 4.临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。 5.加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。 我公司长期为科研机构提供人ELISA试剂盒，并取得不错的成绩，产品合格率在99%以上。本公司坚持以质量求生存，以信誉求发展。
-
ELISA试剂盒实验之后的废液处理
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
如今，雾霾的天气越来越普遍的出现，形成雾霾的主要原因是环境受到了严重的污染。然而，ELISA试剂盒实验之后的废液如果不正确处理的话，就会对环境造成危害。为达到对环境的维护，ELISA试剂盒实验之后的废液要进行正确的处理，处理方法有：1、存放废液的桶必须远离电源、气源、火源，采取严格的安全措施。2、必须倒入的收集桶内，严禁倒入下水道。3、凡存放废液的桶上必须用标签纸标明所存废液的主要成分名称。4、严禁将化学试剂瓶（包括空瓶或装有废液的瓶）扔进桶内（包括空桶或已装有废液的桶），以免给后续的收集处理造成困难和麻烦。5、桶内废液存放至五分之四时，请置换新桶。6、桶内倒入废液后必须将桶盖盖紧，以防挥发、溢出等引发安全隐患。废液收集的基本原则：有机废液和无机废液分开收集，无机酸类与碱类分开收集，各试剂之前避免发生反应。
-
劲马ELISA试剂盒实验操作成功的条件保证
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
从保存到使用，每一步都可能是影响ELISA结果的原因，所以我们在购会试剂盒后一定要严格按照要求使用，您有不清楚的地方也可以我司业务员，我们会安排技术人员为您解答问题，提供技术指导。作为我公司的主打产品，劲马ELISA试剂盒实验的成功条件有哪些？ 一、您还在问“该选什么试剂盒”？ 我们就拿以TNF-a来说吧，Meso Scale Discovery Vplex电化学发光试剂盒以0.04pg/mL的灵敏度是普通ELISA的100多倍。如果实验样本中的TNF-a低于7pg/mL，这就意味着实验数据会无法检测，实验没有定量结论。 二、可以检测什么样本？试验周期多长？ 如需要检测的是尿液，柠檬酸盐血浆样本，需在订购前仔细查看试剂盒说明书中的验证样本。简单的说，如果试剂盒是没有用过检测尿样，柠檬酸盐血浆，使用该试剂盒检测尿样会存在极大的风险；而且很多试剂盒中还会特别说明“不能检测柠檬酸盐血浆”。Vplex试剂盒验证过的样本有血清，EDTA血浆，肝素血浆，柠檬酸盐血浆，尿液，细胞上清液，欢迎您上海劲马业务员索取ELISA试剂盒说明书，有中、英两种语言为您提供。 如自己采购抗体，开发ELISA方法学，遇到抗体亲和力低，由于ELISA的两次洗脱将可能将抗体洗掉，大大影响实验结果。可以不用洗，2.5小时完成实验的一步法。 出现实验研究周期较长情况，ELISA试剂盒尽量选择一个批次的，以防止不同批次间的差异。然而由于普通ELISA有效期在3-12个月，而实验周期往往在1-2年以上，一些长期临床实验项目甚至在5-10年，因而经常面临不同批次的挑战 ·酶标孔中需要加二抗吗？ 劲马解说：不需要。二抗也已经被冻干在酶标孔中。 ·样本检测之前，需要稀释吗？ 劲马解说：一般情况下，使用Instant ELISA检测，样本不需要稀释。但是具体请您参考随货说明书。 上海劲马公司代理高质量劲马ELISA试剂盒，8折优惠！检测费用全免！ 凡购买本司目录任何一种检测试剂盒，您只需将需要检测的动物种类和检测
-
ELISA试剂盒复孔检测时该如何稀释！
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
设计ELISA复孔检查时，是对同一个样品作两次稀释，再分别加到板上的两个孔，还是只稀释一次，然后吸取两次分别加到两个孔？前者似乎把稀释时的误差也考虑到了，但做出来的结果两个孔相差挺大的。而较常使用的是哪种稀释方法？ 为了减小ELISA试剂盒误差，是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问，上海沪鼎技术人员是这样解说的： 1. 前者测的是稀释和移液的误差，后者只有移液误差。 2. 一般都是稀释一次，分两孔吧。同浓度的分复孔。 3. 由于是从同一原液稀释，一般不考虑稀释误差(稀释误差是存在的)，都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是一一稀释，这样可以使稀释误差减小)。 4. 复孔是为了排除移液体积，板的影响，以及其他系统误差的，要求复孔的浓度是一致的。稀释后分孔能满足此要求，一一稀释不能。 沪鼎小提示：在ELISA实验中设复孔，目的是为了减少本次实验的系统误差对实验数据带来的影响，有条件的话复孔的数量可以增加，系统误差更小。
-
Ausbian进口特级胎牛血清为何能经得住各种难养的细胞考验
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
初次接触细胞培养时经常会疑惑这种细胞用什么品牌好呢?其实这个问题的答案可以很简单，也可以很复杂。本文威正翔禹|缔一生物为您分析Ausbian进口特级胎牛血清为何能经得住各种难养的细胞考验。 优势： 内毒素含量极低
-
血清的质量如何鉴定
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
血清是我公司主营产品之一，质量保证，价格优惠。血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。 1、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损? 将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。 长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此，推荐在-20℃以下储存血清，并避免反复冻融。 我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时，请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。 2、血清中包含絮状沉淀，它们是什么，怎么处理? 沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性，不会影响产品性质。要除去沉淀，离心血清（400g，1-2分钟）或者简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶里（一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤）。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以，使用产品时要摇动并加热血清至37℃，沉淀会自然消失。 3、 如何避免血清中产生沉淀? 按如下操作可避免沉淀的产生： （1）解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。 （2） 血清分装冻存时，须规则摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一。 （3） 勿直接由-20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。 （4） 勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏，从而影响血清的品质。 （5） 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。 （6） 若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过
-
ELISA的基本原理是什么,您还不知道吗?
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
ELISA即酶联免疫吸附试验，是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年zui先应用该法进行了IgG定量测定，并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是：1.使抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；2.使抗原（或抗体）与某种酶联结成酶标抗原（或抗体），而且此酶标抗原（或抗体）既保留其免疫活性，又保留其酶活性；3.测定时将受检标本（抗体或抗原）和酶标抗原（或抗体）按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应，再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开，zui后结合在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例；再加入酶反应底物后，底物被酶催化后变为有色产物，根据其颜色反应的深浅进行定性或定量分析，以了解被测标本中抗体或抗原含量。
-
恒远告诉您:细菌转化的操作步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细菌转化 操作步骤 （1）事先将恒温水浴的温度调到42℃。 （2）从-70℃ 超低温冰柜中取出一管（100μl）感受态菌，立即用手指加温融化后插入冰上，冰浴5~10min。 （3） 加入5μl连接好的质粒混合液（DNA含量不超过100ng），轻轻震荡后放置冰上20min。 （4） 轻轻摇匀后插入42℃水浴中1~2min进行热休克，然后迅速放回冰中，静置3~5min。 （5） 在超净工作台中向上述各管中分别加入500μl LB培养基（不含抗菌素）轻轻混匀，然后固定到摇床的弹簧架上37℃震荡1h. （6） 在超净工作台中取上述转化混合液100~300μl，分别滴到含合适抗菌素的固体LB平板培养皿中，用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀（注意：玻璃涂布棒上的酒精熄灭后稍等片刻，待其冷却后再涂）。 （7） 如果载体和宿主菌适合蓝白斑筛选的话，滴完菌液后再在平板上滴加40μl 2% X-gal，8μl 20% IPTG，用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀。 （8） 在涂好的培养皿上做上标记，先放置在37℃恒温培养箱中30-60min直到表面的液体都渗透到培养基里后，再倒置过来放入37℃恒温培养箱过夜。 （9） 在被细菌污染的桌面上喷洒70%乙醇，擦干桌面，写实验报告。 （10）观察平板上长出的菌落克隆，以菌落之间能互相分开为好。注意白色菌斑。 上海德尔塔生物有限公司是一家全国性专业经销生化试剂，分子生物学试剂，免疫试剂，本公司经营品种多，质量好，价格合理，订货快速，交货及时，如需要订购我司ELISA检测试剂盒,ELISA检测试剂盒价格,进口ELISA检测试剂盒,培养基,培养基价格,进口培养基,elisa试剂盒,elisa试剂盒价格请电来咨询。
-
怎样正确的复苏细胞
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢?没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?不罗嗦了，请看下文： 活力检查 – 千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃! 形态检查 – 检查细胞的固有形态和生长行为。 好了，开始切入正题 冻存细胞： 补充新的培养液 – 在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。 在细胞长至70%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度 ~5 x106 cells/ml (根据不同的细胞类型调整) 冻存液 – 用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有): – 5-10% DMSO – 注意确保DMSO不含有其他的毒性物质。 – 5-15% 甘油 – 如果细胞在无血清培养基内生长，应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。 在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过1.5ml. 程序降温是保证冻存细胞活性的关键，使用 Mr. Frosty(找生物注一种装置)保证降温速度为1°-3°C，置于-80°C冰箱内过夜，如果没有Mr. Frosty装置，可以使用实验室常见的泡沫盒、棉花等(原文是实验室尿布，呵呵，不知道是什么鸟)。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以zui快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！ 还有一个zui重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题! 细胞复苏-正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点： 当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要(找生物注国内这个方面做得非常
-
组织培养用水的配制及保存的注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
组织培养用水的配制及保存溶液应注意以下事项： 1、配制溶液之原材料药品等都必须经过试用。药品一般采用化学纯的，标签要清楚以防混淆。 2、配制溶液时所用器具，如烧杯、容量瓶、量筒、漏斗等都应洗涮干净，zui后用蒸馏水或去离子水涮净、烤干备用。 3、称量药品力求：其误差应在0.1%之下，称量过程防止混淆。 4、配制平衡盐溶液的过程要严格按照配制方法顺序配制，主要是防止磷酸钙和碳酸钙的沉淀，当时就应处理完毕，如发生疑问的则不要使用，重新进行配制。 5、配制溶液用的水使用新鲜的制备时间长的水多会有变化，不宜使用。 6、配制溶液的过程，尤其是大量配制的溶液应做好记录，如批次、材料、份量、消毒、保存、使用情况、配制人等。 7、必须注意配制溶液的药品标签所注明的含结晶水的数量是否与配方相同，如不同则应经过计算，得到应加入的量。 8、每批溶液配成后均需经过试用方可大量使用。 9、配好的溶液应立即除菌处理，如高压灭菌、过滤或加抑菌物质，以防杂菌生长。 10、溶液保存过程预防杂菌和溶液变质失去效用，故一般保存在较低的温度中，如4℃冰箱（及低温冰箱），瓶栓应紧闭。 11、保存其间的溶液如发现细菌污染，或有问题时，则不应使用。
-
ELISA试剂盒显色和比色分析
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
在ELISA试剂盒试验中各种酶标仪功能都会有所不同，所以在运用中应具体阅读说明书，再进行下一步操作。自从20世纪60-70年代面世以来，Elisa法得到*科研工作者的认可及推重，在欧美及我国取得很大的推行，尤其是国内生化范畴的长足发展。ELISA试剂盒有着准确性高、灵敏度高、特异性强等许多的长处，它在检测抗体、抗原等方面有很好的运用，深受广阔用户朋友的喜爱。但是，在试验过程中，也需求留意许多问题，特别是显色、比色问题。显色 ELISA试剂盒显色是ELISA中的终究一步温育反响，此刻酶催化无色的底物生成有色的产品。反响的温度和时刻仍是影响显色的要素。在一定时刻内，阴性孔可坚持无色，而阳性孔则随时刻的延伸而呈色加强。恰当提高温度有助于加快显色进行。在定量测定中，参加底物后的反响温度和时刻应按规则力求准确。定性测定的显色可在室温进行，时刻一般不需求严格控制，有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色恰当缩短或延伸反响时刻，及时判别。OPD（邻苯二胺）底物显色一般在室外温或37℃反响20-30分钟后即不再加深，再延伸反响时刻，可使本底值增高。OPD底物液受光照会自行变色，显色反响应避光进行，显色反响结束时参加停止液停止反响。OPD产品用硫酸停止后，显色由橙黄色转向棕黄色。TMB（四甲基联苯胺）受光照的影响不大，可在室温中置于操作台上，边反响观察成果。但为确保试验成果的安稳性，宜在规则的恰当时刻阅读成果。TMB经HRP作用后，约40分钟显色达高峰，随即逐渐削弱，至2小时后即可彻底消退至无色。TMB的停止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠（SDS）等酶抑制剂均可使反响停止。这类停止剂尚能使蓝色维持较长时刻（12-24小时）不褪，是目视判别的杰出停止剂。此外，进口elisa试剂盒各类酸性停止液则会使蓝色转变成黄色，此刻可用特定的波长（450nm）测读吸光值。比色 比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验，需先将板置于
-
elisa试剂盒温育时间温度注意事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
elisa试剂盒温育时间温度注意事项在ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育(incubation)。elisa试剂盒温育时间温度注意事项温育时间：elisa实验属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。温育温度：温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达。为加速反应，可提高反应的温度，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜，以形成zui多的沉淀。但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用。温育保温：保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴，可将ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度迅速平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱，ELISA板应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，zui后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度，特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应，操作时的室温应严格限制在规定的范围内，标准室温温度是指20-25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时，ELISA板只要平置于操作台上即
-
常见细胞培养问题解答
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1. 如果收到一管冻存的细胞，能直接把它放到液氮中保存吗？ 在很多情况下，干冰（-80°C）运输的细胞可以放回液氮，之后再进行快速解冻。然而，这样处理后可能降低细胞活力。对于一些敏感的细胞系，这可能使细胞复苏更加困难。这种现象被认为是由于温度变化导致的细胞内冰晶结构的改变。因此，建议细胞在收到后应尽快解冻和培养。减少在-80°C的储存时间，这种温度只用于运输。 2. 从液氮中取出细胞复苏时，应采取哪些安全措施？ 在液氮中的细胞冻存管如果没有完全密封，有液氮漏入，解冻时冻存管的气温急剧上升，可能会导致爆炸。因此，当从液氮中取出细胞时，建议佩戴护目镜和防护手套。复苏时，应将冻存管在37°C水浴中不断摇动，在1-2分钟内使冻存液完全融化。之后用酒精棉球擦拭冻存管外壁，再拿入超净台内，将细胞转移到已加入10ml培养液的离心管内，1000 rpm下离心5～10分钟，弃去上清液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置 5% CO2孵箱静置培养。 3、为什么应将细胞储存在液氮罐中的气相而非液相？ 细胞储存在液氮气相中更容易复苏。而在液氮的液相中，如果冻存管没有正确密封或有泄漏，细胞与液氮直接接触，会使细胞解冻后活力受到影响。 4、对于悬浮细胞，如何更换培养基？ 培养悬浮细胞可以只是简单地添加新鲜培养基（如果空间允许）或者通过离心（100×g 5分钟）从旧培养基中分离细胞，随后将沉淀的细胞再悬浮于新鲜培养基中。然而，对于大多数悬浮细胞系，简单添加培养基是更好的方法。无论哪种方法，都需要细胞达到其zui大饱和密度之前更新培养基。细胞的饱和密度在3×10 5至2×10 6之间，具体依赖于细胞系和培养条件（静置或搅动、氧合水平等）。细胞必须稀释至较低的细胞浓度以允许足够的营养物质恢复，使细胞保持对数生长。假如只是简单地更换培养基而不降低细胞密度，细胞就会迅速耗竭培养基并死亡。如果细胞被稀释到其zui小密度之下，则会进入滞后期，生长非常缓慢，
咨询热线
18133906270
德尔塔官方微信