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扫描电镜透射电镜样本制备步骤
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
透射电镜制备注意事项(细胞)1、细胞数量: > 1*10的6次方;2、消化细胞时要注意不要过度，及时用含血清的培养液终止消化;3、终止消化后，预冷的PBS (pH 7.4 )洗细胞1-2次离心(1500rpm, 5min)弃上清(细胞收集在1.5ml的EP管中) ;4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制该溶液)，可用吸管轻轻吹散细胞，使细胞悬浮于固定液中; 5、4度固定过夜后寄出 (寄送时加冰袋，并用2.5%戊二醛溶液将EP管中剩余空间充满)。 肾脏组织样本制备步骤：1、迅速取材；2、PBS漂洗2次，切成小块（米粒大小）；3、快速放入2.5%戊二醛固定液中，4度固定过夜；4、固定液将整个容器里面的空间都充满，封口膜封口；5、多加冰袋运输。
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扫描电镜分析实验
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
一 、实验目的 1.了解扫描电子显微镜的原理、结构; 2.运用扫描电子显微镜进行样品微观形貌观察。 二、实验原理 扫描电镜(SEM)是用聚焦电子束在试样表面逐点扫描成像。试样为块状或粉末颗粒，成像信号可以是二次电子、背散射电子或吸收电子。其中二次电子是主要的成像信号。由电子枪发射的电子，以其交叉斑作为电子源，经二级聚光镜及物镜的缩小形成具有一定能量、一定束流强度和束斑直径的微细电子束，在扫描线圈驱动下，于试样表面按一定时间、空间顺序作栅网式扫描。聚焦电子束与试样相互作用，产生二次电子发射以及背散射电子等物理信号，二次电子发射量随试样表面形貌而变化。二次电子信号被探测器收集转换成电讯号，经视频放大后输入到显像管栅极，调制与入射电子束同步扫描的显像管亮度，得到反映试样表面形貌的二次电子像。 三、实验仪器 日立S3400扫描电子显微镜(日本电子株式会社) 四、实验步骤. 1.样品的制备 2.仪器的基本操作 1)开启稳压器及水循环系统; 2)开启扫描电镜及能谱仪控制系统; 3)样品室放气，将已处理好的待测样品放入样品支架上; 4)当真空度达到要求后，在一定的加速电压下进行微观形貌的观察。 五、观察结果
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透射电镜的基本结构和原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
一、 实验目的 1、了解透射电子显微镜的结构和工作原理。 2、了解透射电子显微镜样品制备的方法。 二、实验原理. 透射电子显微镜是以波长极短的电子束作为照明源，用电磁透镜聚焦成像的一种高分辨 本领、高放大倍数的电子光学显微镜。透射电镜的总体工作原理是:由电子枪发射出来的电 子束，在真空通道中沿着镜体光轴穿越聚光镜，通过聚光镜将之会聚成一束尖细、明亮而又 均匀的光斑，照射在样品室内的样品上;透过样品后的电子束携带有样品内部的结构信息， 样品内致密处透过的电子量少,稀疏处透过的电子量多;经过物镜的会聚调焦和初级放大后， 电子束进入下级的中间透镜和第1、第2投影镜进行综合放大成像，被放大了的电子影 像投射在观察室内的荧光屏板上;荧光屏将电子影像转化为可见光影像以供使用者观察。 三、透射电镜的结构 透射电子显微镜由三大部分组成: 1、电子光学系统(镜体):照明源(电子枪聚光镜)、 成像系统(样品镜、物镜、中间镜、投影镜)、观察记录系统。2、真空系统。3、电源与控 制系统 四、超薄切片制备技术步骤 透射电镜的成像是由一定强度的电子束透过标本而成像。由于电子射线的穿透能力比较低，电镜又具有很高的分辨率和放大率，因此, 电镜标本需要厚度在0.03～0.05μm的超薄切片，以获得高分辨的超微结构图像。 超薄切片制作过程包括取材、固定、脱水、渗透、包埋、聚合、切片和染色等几个环节。 （一）取材 取材是超薄切片技术的关键环节。由于生物组织离体后，细胞将会立即释放出各种水解酶引起细胞自溶，使细饱内部微细结构发生变化。因此，为尽可能避免产生人工假像，取材时有以下要求： 1． 取材要快，一般要求在1min内把组织块浸入固定液。 2． 组织块要小，一般切成0.5～1.0mm。 3． 所用固定液及容器须预冷，以降低离体细胞内水解酶的活性，尽可能减少细胞自溶。 4． 由于电镜观察视野小，具有很大的局限性，所以，选择部位要准确可靠。 5． 切割组织的刀、剪必须锋
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揭示微丝细胞骨架在植物重力感知、信号传递中的功能
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
揭示微丝细胞骨架在植物重力感知、信号传递中的功能已有较多的研究结果表明，微丝细胞骨架在植物响应重力变化中起到重要作用；但是由于以往研究中所用的微丝抑制剂、研究材料、植物器官的不同，至今仍没有明确的有关微丝细胞骨架如何参与植物重力响应的精细机制。根据“淀粉体-平衡石”假说，植物感重细胞（如根尖小柱细胞和茎内皮层细胞）内的淀粉体在感知重力变化后发生沉降，可迅速将物理信号转化为生物化学信号。由于感重细胞内存在着复杂的亚细胞结构（如细胞骨架和内膜系统等），造成了淀粉体运动复杂的力学特性。中国科学院植物研究所乐捷研究组应用流体力学微流变方法分析了拟南芥根尖感重细胞内淀粉体的运动特性，用此方法对植物根的重力研究之前未见报道。研究人员发现，在重力刺激（旋转90度）下野生型感重细胞内的淀粉体运动具有明显的“牢笼-逃逸（cage-escape）”和协同运动的力学效应。在ARP2/3微丝相关蛋白复合体突变体（dis1-1, dis2-1）的根尖感重细胞中，由于淀粉体被异常形成的粗微丝束所束缚和分离，缺少明显的淀粉体“牢笼-逃逸”和协同运动；而微丝解聚剂（Latrunculin B）预处理可以显著地打破微丝突变体中存在的淀粉体运动的“牢笼”效应。进一步的研究结果表明，ARP3/DIS1亚基不仅参与感重细胞内的重力感知，还参与了重要的重力信号——生长素的胞间传递。在dis1-1突变体中，多个生长素运输载体PIN家族蛋白（PIN2、PIN3、PIN7）在胞内的运转发生异常，影响了生长素在根上、下两侧细胞内不对称分布的迅速建立，造成根的向地弯曲生长延迟。该研究揭示了微丝细胞骨架在植物重力感知、信号传递中的功能，对于进一步揭示植物发育和形态建成的调控机制，以及改良作物株型、抗倒伏等农艺性状提供了新的研究方法和理论依据。该研究发表在《实验植物学杂志》（Journal of Experimental Botany）上，相关研究结果于2015年发表在《分子植物》（Molecular Plant）上。乐捷研究组助理研究员邹俊杰为2篇论文的一合作作
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化学工业废水处理方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
化学工业废水主要来自石油化学工业、煤炭化学工业、酸碱工业、化肥工业、塑料工业、制药工业、染料工业、橡胶工业等排出的生产废水。 化工废水污染防治的主要措施是：首先应改革生产工艺和设备，减少污染物，防止废水外排，进行综合利用和回收；必须外排的废水，其处理程度应根据水质和要求选择。 一级处理主要分离水中的悬浮固体物、胶体物、浮油或重油等。可采用水质水量调节、自然沉淀、上浮和隔油等方法。 二级处理主要是去除可用生物降解的有机溶解物和部分胶体物，减少废水中的生化需氧量和部分化学需氧量，通常采用生物法处理。经生物处理后的废水中，还残存相当数量的COD，有时有较高的色、嗅、味，或因环境卫生标准要求高，则需采用三级处理方法进一步净化。 三级处理主要是去除废水中难以生物降解的有机污染物和溶解性无机污染物。常用的方法有活性炭吸附法和臭氧氧化法，也可采用离子交换和膜分离技术等。各种化学工业废水可根据不同的水质、水量和处理后外排水质的要求，选用不同的处理方法。
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如何正确检测无菌室洁净度
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
如何正确检测无菌室洁净度 怎么判断无菌室是否达到规定的洁净度，通常无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数，常有沉降菌和浮游菌测定方法。 （1）沉降菌检测方法及标准： 以无菌方式将3个营养琼脂平板带入无菌操作室，在操作区台面左、中、右各放1个；打开平板盖，在空气中暴露30min后将平板盖好，置36℃士1℃培养48h，取出检查，3个平板上生长的菌落数平均小于1个。 （2）浮游菌检测方法及标准： 用专门的采样器，宜采用撞击法机制的采样器，一般采用狭缝式或离心式采样器，并配有流量计和定时器，严格按仪器说明书的要求操作并定时校检，采样器和培养皿进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，使用的培养基为营养琼脂培养基或药典认可的其他培养基。使用时，先开动真空泵抽气，时间不少于5min，调节流量、转盘、转速。关闭真空泵，放入培养皿，盖上采样器盖子后调节缝隙高度。置采样口采样点后，依次开启采样器、真空泵，转动定时器，根据采样量设定采样时间。 全部采样结束后，将培养皿置36℃士1℃培养48h，取出检查，浮游菌落数平均不得超过5个/m3。 每批培养基应选定3只培养皿做对照培养。 无菌操作台面或超净工作台还应定期检测其悬浮粒子，应达到100级（一般用尘埃粒子计数仪）检测，并根据无菌状况必要时置换过滤器。 定期更换新的紫外灯管、更换净化系统的初效、中效、高效头： 定期（至少每年1次）更换新的紫外灯管，以确保紫外灯管灭菌持续有效。并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。至少2年1次，或按无菌室验证实际情况，定期更换初效、中效、高效头。以确保净化系统的功能持续有效，并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。 定期进行洁净度再验证： 定期（每季度、半年、1年）或当无菌室设施发生重大改变时，要按国家标准GB/T16292-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》进行洁净度再验证，以确保洁净度符合规定，保存验证原始记录
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EDTA操作说明书
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
产品简介： EDTA 是一种相对较好的螯合脱钙剂，对组织结构影响小，可以较好的保存组织的某 些酶类，经 EDTA 脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢， 一般脱需要数周至数月保存条件： 2～8°C 保存。 操作流程： 1、骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约 5mm；2、组织固定后，用 PBS 清洗 3 次，每次 20min；3、组织用蒸馏水洗清洗 3 次，每次 20min； 4、组织转移至 20~30 倍体积的 EDTA 脱钙液中，脱钙 10～30 天或更长时间。如果想加快 脱钙速度，可以置于 37°C 进行脱钙。如果必要，更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙，多数组 织脱钙 2 周～3 个月即可，每周更换一次，直至终点； 5、用蒸馏水冲洗数次； 6、常规脱水、包埋。注意事项： 1、 厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可。 2、 适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过 37～40°C，温度过高容易使骨组织造成松 散解体，尤其不可大于 60°C。 3、脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短 脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。 4、 脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。5、 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的 损伤程度。 6、 每隔一段时间检测一次脱钙程度，避免脱钙过度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影 响染色结果。
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大孔吸附树脂的原理
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
大孔吸附树脂是一种不溶于酸、碱及各种有机溶剂的有机高分子聚合物,应用大孔树脂进行分离的技术是20世纪60年代末发展起来的继离子交换树脂后的分离新技术之一。大孔树脂的孔径与比表面积都比较大,在树脂内部具有三维空间立体孔结构,由于具有物理化学稳定性高、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点。大孔吸附树脂主要以苯乙烯、а-甲基苯乙烯、甲基丙烯酸甲酯等为原料加入一定量致孔剂二乙烯苯聚合而成,多为球状颗粒,直径一般在0.3～1.25ｍｍ之间,通常分为非极性、弱极性和中极性,在溶剂中可溶胀,室温下对稀酸、稀碱稳定。从显微结构上看,大孔吸附树脂包含有许多具有微观小球的网状孔穴结构,颗粒的总表面积很大,具有一定的极性基团,使大孔树脂具有较大的吸附能力;另一方面,这些网状孔穴的孔径有一定的范围,使得它们对通过孔径的化合物根据其分子量的不同而具有一定的选择性。通过吸附性和分子筛原理,有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小,在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而达到分离的目的。
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液氮罐中的细胞被支原体污染，处理对策
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
如果冻存的细胞受到支原体污染，感觉整个液氮罐又受到污染了，是否有针对液氮罐的处理方法，可有良策？ 图：冻存细胞常用液氮罐。 以前有人遇到过如上的问题。 我们提供的有效方案是： 将液氮罐儿内的液氮全部倒掉，用德国Minerva Biolabs的MycoplasmaTM支原体喷雾剂或MycoplasmaTM支原体祛除湿巾处理液氮罐内部，即可。反应几分钟后，重新可以使用。 传统方法，可以用甲醛熏蒸，亦可解决。 据报道，液氮罐用过一段时间后，不仅会有支原体污染，也会有细菌和真菌污染（检测方法是用拭子涂抹取样培养鉴定）。 液氮罐常规保养，也是多一年就要消毒、清洗一次。因液氮用久了，杂质较多，液氮挥发后，有些会依附在内胆上，使内胆受到污染，以致腐蚀。 因此，常规清洗消毒是必要的。有介绍先用中性洗涤剂清洗刷净，再用30度清水冲洗。充分干燥内胆后再可充装氮液，当然，也建议后用MB的mycoplasma offTM支原体祛除剂再清洗一下。 另外要注意：要将冻存细胞放在液氮罐的气相，而非液相，这样有助于减少交叉污染。因为如果在液相，如果存在微生物污染，它可能随液氮流入冻存管内。 感谢缔一生物提供相关内容
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分析新型显微镜及它的功能
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
分析新型显微镜及它的功能 近，由韩国首尔基础科学研究所(IBS)分子光谱与动力学中心的Choi Wonshik教授领导的研究团队在深组织光学成像领域取得了重大突破。他们开发了一种新型光学显微镜，可以通过完整的小鼠头骨成像，并在不损失空间分辨率的情况下获取脑组织中神经网络的显微图。 这种新型显微镜被称为“反射矩阵显微镜”，它结合了硬件和计算自适应光学(AO)的功能，该技术初是为地面天文学开发的，用于校正光学像差。传统的共聚焦显微镜仅在照明的焦点处测量反射信号并丢弃所有聚焦光，而反射矩阵显微镜则在焦点以外的位置记录所有散射的光子。然后，该团队于2017年开发了一种新的AO算法，称为单散射闭环累积(CLASS)，对散射光子进行了计算校正。该算法利用所有散射光有选择地提取弹道光并纠正严重的光学像差。与大多数传统的AO显微镜系统相比，天文学类似在天文学中使用AO那样，需要像亮点一样的反射镜或荧光物体作为引导星，反射矩阵显微镜的工作原理是不带有任何荧光标记，并且不依赖于目标的结构。此外，可以校正的像差模式数量是传统AO系统的10倍以上。 诸如光学相干显微镜和双光子显微镜的非侵入性显微镜技术通常用于活体组织的体内成像。当光穿过诸如生物组织之类的混浊物质时，会产生两种类型的光：弹道光子和倍增散射光子。弹道光子直接穿过物体而不会发生任何偏转，因此被用于重建物体图像。另一方面，当光穿过材料时，通过随机偏转产生多重散射光子，并在重建图像中显示为斑点噪声。随着光传播通过越来越远的距离，多重散射光子和弹道光子之间的比率急剧增加，从而模糊了图像信息。 骨组织尤其具有许多复杂的内部结构，这会导致严重的多重光散射和复杂的光学像差。当通过完整的头骨对小鼠大脑进行光学成像时，由于强烈的斑点噪声和图像失真，很难看到神经系统的精细结构。这在神经科学研究中是有问题的，其中鼠标被广泛用作模型生物。由于当前使用的成像技术的局限性，必须将颅骨切除或变薄以显微镜
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工业检支原体和科研检支原体有什么不同，你需要知道
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
工业包括生物药生产、CAR-T、干细胞**、疫苗生产等，需要对主细胞库、病毒收获液、体外扩增的细胞等进行支原体检查。该检查的方法依据中国药典。 科研检支原体则需要保证细胞中没有支原体污染，没有详细的方法规定。 那么，工业和科研检支原体还有哪些区别呢？ 1. 方法上： 工业可使用培养法、指示细胞培养法和NAT法（核酸扩增技术）。NAT法常见的就是PCR和荧光定量PCR。只限定了这三种。NAT在方法验证后，可以替代前面两种方法。它尤其适合CAR-T等的放行检测。 科研则可采用各种方法，但一般不采用培养法，因为太慢。科研检支原体常见方法有PCR法、qPCR法、酶荧光法、恒温扩增法、DNA染色法、细胞感应法等。 2. 用途上： 工业检支原体用于过程控制、放行检测。生产前和生产后的成品都需要检。 科研检支原体是避免支原体污染细胞，干扰实验，一般是一周就要监测一次。 3. 支原体污染程度： 工业上支原体污染风险主要是存在于细胞和成品中。但环境也需注意，需要定期清洁。 科研上支原体污染风险主要是存在于细胞中，但环境也需注意，需要定期清洁。 工业上，支原体在细胞和成品中如果发生污染，也是含量较低，因而需要方法的灵敏度高，通常要求检测限达到10CFU/ml。 科研上，支原体如果污染细胞上清，则因为培养液中含有血清，因而繁殖较快，支原体的污染程度较高，通常每ml能达到10的3次方。因而对方法的灵敏度要求不高，而更看重方便。 目前，市面上大量存在各种品牌的支原体检测产品，以NAT（PCR或qPCR）方法而论，科研和工业领域可考虑德国Minerva Biolabs产品，因其产品大多为冻干粉型，稳定性好，4度即可保存。而且操作较为方便，例如对于科研来说，PCR有预分装型，不用自己再分液，扩增后直接上胶。更重要的是试剂盒灵敏度高，覆盖支原体物种广（100多种）。对于工业来说，qEP和Classic试剂盒还经过全面的方法验证，适合放行检测。 希望以上信息对你有帮助。感谢缔一生物提供相关内容。
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日本嗅觉测定用基准臭液套装使用方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
日本嗅觉测定用基准臭液套装使用方法： 1、准备阶段。 1确认操作者（气味测试员），试料采取者的嗅力为正常。 2测试之前，确认操作人员与受试者的手上是否有异味，如果有需要清洗干净。 2.使用方法。 选定的标准浓度，5种标准气味和低浓度均通过“ 5-2方法”进行测试。 操作员把1-5的数字记录在气味纸上。然后把其中两张的前端（大概1cm处）浸入到一种基准气味液体里。另外三张用同样的方式浸入到对照液中接着拿出。 受试者凑近分别闻这五张气味纸（鼻尖凑近，不要接触），然后指出有气味的两张气味纸。 后测其他气味时，重复做同样的操作，让受试者鉴别出气味纸带有气味的种类，这样测试就合格了。 3、使用上的注意事项。 1闻气味的方法。 集中精力，短时间闻下气味，如果无法快速分辨其中是哪种气味，可以再次短时间去闻。 2气味纸的使用和处理方法。 气味纸贴着基准臭瓶口润浸，防止液体滴落。 气味纸是一次性的，请勿反复使用。用过一次的气味纸要丢入塑料袋中，然后用橡皮筋扎紧投入到带盖的垃圾桶中，这是为了防止空气中留下之前测试的气味，导致测试过程中受到干扰。 4、其他 1基准臭的效期为2年，开封后有效期缩短至1年。 2基准臭储存地为阴暗场所，请勿阳光直晒。
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伴有肺癌的副肿瘤性小脑变性患者中P/Q型钙离子通道抗体
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
P/Q type calcium-channel antibodies in paraneoplastic cerebellar degeneration with lung cancer 伴有肺癌的副肿瘤性小脑变性患者中P/Q型钙离子通道抗体 期刊：NEUROLOGY （IF: 8.77）2002 摘要： 39例副肿瘤小脑变性(PCD)患者中有16例(41%)P/Q型电压门控钙通道(VGCC)抗体水平升高，9例(23%)Hu抗体水平升高。16例VGCC抗体阳性患者中7例为Lambert Eaton肌无力综合征(LEMS)。15份脑脊液样本中有7份有VGCC抗体，其中4份有鞘内合成的证据。应在PCD患者中寻找VGCC抗体，即使没有LEMS的症状，也可能与小脑功能障碍有关。 前言： 副肿瘤性小脑变性(PCD)的病理特征是小脑氏细胞的亚急性丧失1。在这种和其他副肿瘤的情况下，经常有针对肿瘤和神经系统表达抗原的血清和脑脊液抗体1。PCD和小细胞肺癌(SCLC)患者的血清和脑脊液中可能存在Hu抗体，特别是当临床证据表明有小脑以外的神经系统症状时。然而，在相当数量的PCD和SCLC患者中，未检测到Hu或其他抗神经细胞抗体，但在一些病例中有P/Q型电压门控钙通道(VGCC)抗体的报道2,3 。VGCC抗体通常与Lambert Eaton肌无力综合征(LEMS)相关，但并非所有PCD和VGCC抗体的患者都有LEMS的临床证据。VGCC抗体与Hu抗体不同，它结合细胞外决定因子并改变VGCC的表达，如果它们能够进入中枢神经系统，理论上可能直接导致PCD的小脑功能障碍4。 为了阐明P/Q型VGCC抗体的临床和病理相关性，我们回顾了39例伴肺癌的PCD患者，以及寻找LEMS的临床和电生理证据。我们比较了VGCC抗体阳性和阴性病例的预后，并评估了鞘内VGCC抗体的合成。 患者和方法： 从我们的数据库中，选择了终诊断为伴有肺癌的PCD患者。这些患者表现为孤立的或明显突出的原因不明的小脑综合征，或有Hu抗体或发展成肺癌。与以前的工作不同2，我们特别排除了表现为共济失调，但很快出现小脑以外的症状的Hu阳性患者；目的是排除这些与PCD不同但总是含有Hu抗体的副肿瘤性脑脊髓炎病例的1。回顾性检测所有患者VGCC抗
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培养原代细胞的现实价值是什么
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
生物制药行业的发展以及现代疾病的攻克都是科学家们在无数次实验与试错中得来的成果。而这种yao物实验的操作维度已经精que到了细胞等级，其中就包括原代细胞。从哺乳动物的机体中提取出的原代细胞是生物医药研制工作不可或缺的助手。下面就仔细介绍专业原代细胞公司的细胞的现实价值： 一、用作医疗行业基础研究 当一种yao物被研发出之后yao物的yao效检测以及yao物作用机理研究是不可避免的环节。预先使用原代细胞群做有关的yao物检测能够提高yao物的安全与稳定性。同时原代细胞还可以作为某些疾病机理研究的实验对象。当然在基因功能的探秘方面原代细胞亦功不可没。 二、用作制药行业yao物开发 除了检验yao物开发的前期以及中期工作都离不开原代细胞。造福人类以及改善疾病发生概率的许多疫苗的诞生的功臣之一就是原代细胞。一批又一批的原代细胞作为试验者在生物科学家们手中经过了千百次的锤炼促就了一大批造福于世的药物的诞生，比如说基因功臣yao物等。 三、用作的单克隆抗体制备 单克隆抗体可以用作于各类病原微生物以及肿瘤细胞的抗体和抗原检测，在生物医疗行业具有较大的应用价值。而单克隆抗体的制作原料就包括原代细胞。小鼠身上的B细胞作为原代细胞被提取出来后经过一系列其他操作就可以完成单克隆抗体的制备工作。 原代细胞的提取与培养技术对现代生物医学具有非同小可的意义。那么原代细胞可以培养几代？按照目前的官fang定义十代以内的细胞群都可以称为原代细胞。相信在将来各种技术以及猜想的出现会为原代细胞的价值实现提供更大的舞台与空间。
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植物组织中自由水与束缚水含量的测定
作者：德尔塔 日期：2022-04-01
自由水和束缚水含量常与植物生长与抗性有密切关系。自由水与束缚水比值较高的植物组织或器官，代谢活动较旺盛，生长也较快；反之则生长较缓慢，但抗性较强。因此，自由水和束缚水的相对含量可以作为代谢活动及抗逆性强弱的重要生理指标。 一、 原理 束缚水被细胞胶体颗粒所吸附，水势较低，故不易移动、蒸发和结冰，不能作为溶剂 ，也不易被夺取。可根据这些特点测定束缚水含量。将植物组织浸入浓糖液中脱水， 经过一定的时间后易移动的自由水可全部进入糖液中，组织中剩余的水分可看作束缚 水。根据糖液浓度变化可测得自由水量。由植物组织的总含水量减去自由水量，即可 求出束缚水量。 二、 仪器与用具 阿贝折射仪；电子顶载天平（感量0.1mg）；烘箱；称量瓶若干；打孔器（面积0.5cm 2 左右）；烧杯；瓷盘；量筒。 三、 试剂 60%-65%蔗糖溶液（重量百分浓度）：称取蔗糖60-65g，置烧杯中加蒸馏水40-35g，使 总重量为100g，溶解后备用。 四、 方法 1. 取称量瓶6个，编号（设三次重复），分别称准重量。 2. 在田间选取生长一致的待测植物数株，选各部位、长势、叶龄等一致的有代表性的 叶子数片。 3. 用0.5cm 2 左右的打孔器在叶子两测（避开主脉）对称地打取小圆片共300片， 分别随机地放入已编号地6个称量瓶中（各50片），盖紧，以免水分散失。 4. 准确称取各瓶重量，求出各瓶样品鲜重。然后将其中3瓶置烘箱中于105℃下10min 杀死组织，再于80℃下烘至恒重，求出组织含水量（%）。 将另外三个称量瓶中各加入60%-65%（重量百分浓度）蔗糖溶液5ml，再准确称量，算 出各瓶糖液重量。于暗处放置4-6h，其间不时轻轻摇动。 5. 到预定时间后，充分摇动溶液，用折射仪分别测定各瓶糖液浓度，同时测定原来的 糖液浓度（折射仪用法见实验3），按下式求组织中自水和束缚水含量（%）。
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