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您的细胞养得好吗?怎样才能养好呢?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了。您的细胞养的好吗?您对细胞培养体系了解吗?培养基对细胞培养影响大吗?…… 细胞培养,蕴含着大学问。有时候细胞状态不好,转染 、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,让我们先从培养基和血清说起。 培养基 细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境,是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。培养液或培养基的含义几乎相同,英文都是medium。当它是粉剂时,倾向性地称为培养基,而将粉剂配成液体后,多称为培养液。培养液中常常补加血清、抗生素等成分。培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和无血清细胞培养基等。 经典的培养基有很多种,Invitrogen (GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma、Procell(普诺赛)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。 培养基种类及介绍(部分) MEM 是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度。 DMEM Dulbecco改良的BEM(DMEM )培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。 RPMI 1640 是专为淋巴细胞培养 而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。 MEMα 含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞。 Ham’s F12 是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM 等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的
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细胞培养问题集锦问与答(四)
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
细胞培养系列第四期,继续为大家分享细胞培养中遇到的问题集锦。 16、 问:买的无血清冻存液说明书上写的直接放入-80度 答:那是直接冻存的,大多数冻存液都是梯度冻存 17、 问:初学细胞培养,养的是hepG2,每次到3天的时候培养基就会发黄,镜下看到像是死细胞聚集成团的大片东西,请问这种情况是染菌了吗?请问如何处理?那种像死细胞聚集成团的感觉是绿色,请问这是染菌吗?(不是每次这样,之前都很好,现在三瓶里有一瓶出现这种情况) 答:绿色的感觉像真菌,也有可能是细胞密度高了,细胞代谢物多。 18、 问:有用清除剂处理过一礼拜,看着挺干净,但是一礼拜培养三代又出来了,这种是没清除干净还是,可能环境有污染重复的染到了? 答:这个污染比较顽固,至少要杀2周,甚至一个月 19、 问:真菌污染一般原因是什么啊 答:真菌里的根霉一般是环境 20、 问:贝克曼细胞计数仪中DT值是啥意思?转染后DT值会增加吗?为什么会增加呢? 答:是群体倍增时间,就是细胞数增长一倍需要的时间,一个常用的评价细胞生长的指标。我们接触的一般是增加的。大量表达外源蛋白,会占用细胞生长的资源,这个可能是主要因素。外源基因插入基因组可能也有影响。 以上就是本期的内容,更多资讯,欢迎点击安培生物关注更多技术交流。 安培生物科技有限公司介绍: 安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞**领域客户,提供独特细胞体内可代谢的核酸转染试剂;inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产,包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等,为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务;提供以植物生物为平台基因序列全人源化、独特的细胞培养可分解3D基质胶产品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务,努力发展为基因**
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细胞培养出现小黑点是什么原因 如何解决?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
在细胞培养中常可见到细胞及培养液中有一些大小不等、形态不同的黑色未知颗粒,去网上查询得到的答案也多种多样。 那么这些小黑点究竟是什么?我们又该怎么去应对这种情况? 非生物类 细胞碎片类 在细胞培养的时候, 由于细胞代谢、物质交换、周边环境变化,尤其是在从37度培养箱中拿出来观察的过程中,由于液体培养基的比热较大,液内温度高于外界温度,造成冷热交换、小范围内形成液体流动加剧,当然这些小碎末就会被搅动起来形成似乎“游动”的感觉;随着细胞培养的继续,部分细胞开始衰亡,细胞膜结构破裂,破裂之后的细胞内容物泄露到培养液中。尤其是溶酶体的破坏,连续性地造成其他细胞和细胞器的损伤,如果换液不很勤,又会出现进一步破坏和残渣的出现; 再者,“小黑点”问题是很多细胞培养者已经发现的问题,但到目前为止尚未找到其监测和排除的试剂和手段,这首先是由于所谓“小黑点”病原体根本难以收集和捕捉, 这也从另一个侧面证明了“小黑点”问题的难以确定性;再说任何一种外来的微生物在培养基中都会有生命活动的反应和表现,而不是简单地运动那样的外观性表现。 举一个例子:如果“小黑点”的运动状况已经到了用显微镜已经可以观察出的程度,其营养代谢和能量需求也就可想而知。这样,培养液中的影响消耗、酸碱含量程度等都要发生明显变化。 比如说:迅速的、大含量的沉淀, pH值的迅速下降,细胞大量破碎死亡、引发其它类型微生物侵染等等。而这些状况,在所谓的“小黑点”感染中,是很难观察到的。同时“小黑点”的出现而影响细胞状态似乎得不到有力的证据。倒是细胞状态下降的时候,“小黑点”明显增多了。很有可能是细胞状态下降时,细胞衰亡产生的细胞碎片。所以小黑点属于细胞碎片是比较可能和合理的。 玻璃培养瓶中的类似氧化硅的东西 网上有一篇文章说,小黑点其实不是一种生物,是无机物,其本质是玻璃培养瓶里的硅颗粒。可影响细胞生长,细胞状态好时,不明显。细胞状态较差,数量少时才容易看到
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细胞培养常遇问题集锦(六)
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
26、 ▲问:有时候细胞和细胞之间就会出现这种小黑点,高倍镜下看少数在原地打转,但是培养液不浑浊。那其中不会动的是细菌吗? 答:原地打转的可能为黑胶虫,会动的是细菌,细菌有鞭毛。黑胶虫是一种现象,身份可能是细菌,有鞭毛会游动。 27、 问:想问一下,已经使用三抗以及抗支原体的药物培养细胞一周,但还是有少量黑胶虫,但细胞生长状态还好,这样的话接下来还需要处理嘛?好像有一种有少量黑胶虫但不影响细胞状态可以不做处理的说法? 答:一周,黑胶虫数量减少,已经见效了,但还是要继续处理,因为黑胶虫和细胞有此消彼长的特点,细胞复苏或刚传代时,因为此时细胞状态差,所以特别容易爆发黑胶虫,黑胶虫数量增多,当细胞复苏率增强时,黑胶虫数量会减少。 28、 问:话说养细胞的时候,一直加双抗,会对哪些实验有影响呢?之前听说做干扰的时候,要撤双抗。 答:一般做功能学实验,药理学,毒理学,信号通路都要撤掉双抗。 29、 问:Cho传代接种密度0.4 e5,4天才长到11e5,是怎么回事?DT从16.5变成20了。一直都用的一样的培养基,是不是冻溶会影响?是cho细胞,摇瓶培养。 答:检查一下营养体系是不是不适合,如不是,那就考虑是胰酶消化这一步是不是有问题。你这边是把cho贴壁驯化成悬浮了。 30、 问:请问怎么培养破骨细胞?怎么提取到培养的protocol?遇到一个情况,怎么消化也消化不下来,想从源头找一找,是什么原因? 答:破骨细胞的培养方法主要有:骨髓机械分离法,骨髓细胞诱导法,脾干细胞诱导法,血液单核细胞诱导法,小鼠RAW264.7细胞系诱导法及骨巨细胞瘤分离法。 以上就是本期的内容,更多资讯,欢迎点击安培生物网站链接了解更多技术与产品资讯。 安培生物科技有限公司介绍: 安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞**领域客户,提供独特细胞体内可代谢的核酸转染试剂;inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨
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流式细胞术中如何辨别死细胞?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
流式样品中不可能完全去除死细胞,而在流式分析时又不希望有死细胞的干扰,所以如何在流式分析和流式分选时明确分辨死细胞就成为流式细胞术的一个重要研究内容。目前,有四种方法供流式分析者区分死细胞和活细胞。 (1)对角线死细胞 活细胞能产生非特异性荧光,只是非特异性荧光信号相对于荧光素发射的荧光信号较弱。死细胞也可以产生非特异性荧光,而且死细胞产生的非特异性荧光要明显强于活细胞,有的甚至强于荧光素产生的荧光信号。非特异性荧光产生的荧光波长没有选择性,并不是局限于某一荧光波长范围,而是处于连续的波长范围,所以一般所有的荧光通道都能够接收到死细胞产生的非特异性荧光信号,而且其在所有波长范围的荧光强度相差不多,各个荧光通道接收到的死细胞的荧光强度都是处于同一个等级的。在散点图上死细胞是位于对角线上的,而且不同的死细胞,其非特异性荧光的强度不同,且差异可能很大,强度大的可能是强度小的几十倍,甚至几百倍。所以从整体来看,死细胞的非特异性荧光强度呈现出从低到高的连续性分布,表现在散点图上死细胞刚好处于对角线上,如图A所示呈线型,与活细胞群体的圆形分布有明显区别。流式分析者可以根据死细胞的这一特点区分活细胞和死细胞。 死细胞位于散点图的对角线上,但是对角线上的细胞却并不一定都是死细胞,因为双阳性细胞如果在x轴和y轴的荧光信号相似时,也可以位于对角线上。所以,散点图对角线上的细胞可能是死细胞,也可能是双阳性细胞,但是这两种细胞的形状是不一样的,死细胞呈现连续的线型分布,而双阳性细胞群呈现圆形的群体分布,可以从对角线上的细胞群体的形状大致判断细胞的性质。圆形的双阳性细胞群和线型的死细胞群有时相互重合在一起,这时依靠散点图无怯区分双阳性细胞和死细胞。如图B所示,样品细胞为正常小鼠脾脏细胞,标记FITC抗CD3抗体和PE抗CD4抗体,FITC和PE双阳性的CD4+T细胞与死细胞也在一起,无法区分。 如上所述,死细胞的非特异性荧光
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如何选择流式细胞术常用的荧光素?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
流式细胞仪测定常用的荧光染料有很多种,我们如何来选择流式细胞仪测定的常用荧光染料呢?以下简单介绍了荧光素选择的几个原则。 1. 抗原的密度 ① 高表达的抗原可选择几乎所有的荧光素; ② 低密度表达的抗原需要可提供较高S/N比值的荧光素如PE/APC。 2. 自发荧光 ① 每种细胞群都有不同水平的自发荧光; ② 所有的荧光通道均可观察到自发荧光,但自发荧光强度在波长较长时迅速降低; ③ 对自发荧光较强的细胞,选择发射波长较长的荧光素(如APC)可得到较好的S/N比值; ④ 对自发荧光比较弱的细胞,发射波长较长的荧光素对S/N提高没有明显的改善。可选用FITC。 3. 非特异结合 ① 许多荧光抗体可产生低水平的非特异结合,使阴性细胞群的荧光超出自发荧光; ② 非特异结合由下列因素引起: 单克隆抗体的同型抗体:一些IgG同型抗体可能与一些细胞上的Fc受体结合; 所用的荧光素:羰花青染料(如CY3、CY5、CY5.5、CY7)和Tex-Red直标的抗体及一些复合染料标记的抗体在标记某些亚群的细胞时有时会提高结合率;对CY5来说,是因为该染料与低亲和力Fc受体的极低亲和力相互作用。这也是复合染料PE-CY5的特性。 4. 复合染料:小心信号衰退 ① 复合染料因为光、固定剂或温度升高会致信号衰退,是复合染料在上一级染料处发光。该种现象从一小部分亚群开始,导致APC或PE染色细胞群假阳性; ② 减少样本暴露于光、高温或固定剂,可很大程度上避免这一问题; ③ 选择染料时需要考虑:复合染料的信号衰退会不会降低APC或PE的灵敏度。如果是,就要选择另外的试剂搭配; ④ 如果样本需要固定,要选择稳定的固定剂,可有效阻止复合染料的信号衰退。 5. 荧光信号之间的干扰,会增加信号检测背景 ① 荧光信号强细胞群体的SD比荧光信号弱的细胞群体大; ② 多色分析时,一种荧光素(如FITC)的光会漏入相邻的荧光素(如PE)的检测器。漏入的光越多,需要补偿的越多,对分辨率的影响就越大。尤其
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细胞冻存与复苏的正确操作方法
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
细胞冻存与复苏,是细胞培养过程中的常见工作。 细胞冻存,是指将细胞贮存在超低温环境中,使细胞暂时“冬眠”的技术,在需要的时候再进行复苏。 细胞复苏,是把冻存在-80℃冰箱或液氮中的细胞快速解冻,并使细胞重新恢复生长的技术。 本文将为大家介绍细胞冻存与复苏的技术要点和操作步骤。 细胞冻存篇 冻存原则 冻存原则为“慢冻”,即让细胞在缓慢降温的条件下逐渐冷冻。 如果直接将细胞悬液放在超低温下快速冷冻,细胞会受到冷冻损伤而死亡。在冻存液中添加的保护剂(如DMSO、甘油)和在冻存盒中添加的异丙醇,都起到程序性降温的作用。 DMSO使用注意事项 DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中,延缓温度下降速度,减少细胞内冰晶的形成,从而起到保护细胞的作用。 需注意的是,DMSO溶于培养基时,将释放大量热量,所以冻存液需提前配制,不能直接将DMSO加入含有细胞的培养基中,避免烫伤细胞。 另外,DMSO属于致癌物质,使用时应戴好手套,规范操作。 程序冻存液配方 程序冻存液成分一般由基础培养基、胎牛血清、DMSO组成。血清比例为10%~90%,DMSO比例为5%~10%。根据普诺赛实验室经验,推荐冻存液配比:55%基础培养基+40%胎牛血清+5%DMSO,难养细胞可用90%胎牛血清+10%DMSO冻存。 细胞冻存密度 细胞冻存和复苏过程中,不可避免会损失部分细胞,所以冻存的密度不能太低。提高冻存密度有助于提升复苏存活率,推荐密度为100~300万细胞/mL。 冻存操作方法 方法一:使用程序冻存盒 使用程序降温盒是较为常用的冻存方法。市面上的降温盒有些需要添加异丙醇,有些则不需要。 降温盒须恢复室温后再使用。 根据普诺赛实验室经验,使用程序冻存盒冻存效果良好,没有冻存盒的同学可以参照下文方法二和方法三。 操作步骤 步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷 步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,
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细胞坏死和细胞凋亡的区别在哪里?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
细胞程序死亡概念: 细胞程序死亡(programmed cell death,PCD)也常常被称为细胞凋亡,是生物体发育过程中普遍存在的,是个由基因决定的细胞主主动的有序的死亡方式。具体指细胞遇到内、外环境因子刺激时,受基因调控启动的自-杀保护措施,包括些分子机制的诱导激活和基因编程,通过这种方式去除体内非必需细胞或即将发生特化的细胞。 而细胞发生程序性死亡时,就像树叶或花的自然凋落样,凋亡的细胞散在于正常组织细胞中,无炎症反应,不遗留瘢痕。死亡的细胞碎片很快被巨噬细胞或邻近细胞清除,不影响其他细胞的正常功能。 细胞凋亡的主要特征: ①染色质聚集、分块、位于核膜上,胞质凝缩,后核断裂,细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体; ②凋亡小体内有结构完整的细胞器,还有凝缩的染色体,可被邻近细胞吞噬消化,因始终有膜封闭,没有内溶物释放,故不会引起炎症; ③凋亡细胞中仍需要合成些蛋白质,但是在坏死细胞中ATP和蛋白质合成受阻或终止; ④核酸内切酶活化,导致染色质DNA在核小体连接部位断裂,形成约200bp整数倍的核酸片段,凝胶电泳图谱呈梯状; ⑤凋亡通常是生理性变化,而细胞坏死是病理性变化。 理论意义: 程序性细胞死亡在生物发育和维持正常生理活动过程中非常重要.在发育过程中,细胞不但要恰当地诞生,而且也要恰当地死亡。 例如,人在胚胎阶段是有尾巴的,正因为组成尾巴的细胞恰当地死亡,才使我们在出生后没有尾巴.如果这些细胞没有恰当地死亡,就会出现长尾巴的新生儿.从胚胎、新生儿、婴儿、儿童到青少年,在这系列人体发育成熟之的阶段,总体来说细胞诞生得多,死亡得少,所以身体才能发育.发育成熟后,人体内细胞的诞生和死亡处于个动态平衡阶段,个成年人体内每天都有上万亿细胞诞生,同时又有上万亿细胞“程序性死亡”.两者处于种动态平衡中,使人体器官维持合适的细胞数量得以正常运作的,正是“程序性细胞死亡”机制。 实践意义: 如果调节细胞“自-杀”的基因出了问题,该死亡的
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动物实验操作-动物给药
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
动物实验操作-动物给药 动物给药项目介绍 灌胃法:此法给药剂量准确,是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常用给药方法 口服给药:是把药物混入饲料或溶于饮水中让动物自由摄取。此法优点是简单方便,缺点是剂量不能保证准确,且动物个体间服药量差异较大。 注射给药法:注射给药剂量准确、作用快,是动物实验中常用的给药方法,给药时应注意针头的选择,通常包含以下几种方法: 1. 皮下注射法 2. 皮内注射法 其他给药法:除上述较常用的给药途径外,还有其他一些给药方法,如呼吸道给药、皮肤给药、脑内给药、直肠内给药、关节腔内给药等等 案例展示
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如何培养冻存的原代细胞?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等。 Ⅰ、冻存原代细胞的培养 1.将管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。 2.将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体完全融化。 3.将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。 4.用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。 5.打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现象)。 6.用多聚赖氨酸包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。 7.盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。 8.将培养瓶放入培养箱中。 9.放入培养箱后第6-16小时更换次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。 Ⅱ、原代细胞的组织块培养法: 1.组织块接种后的3天,在观察和移动的过程中,注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动,否则组织块不易附着于瓶壁上或附着后也会脱落飘起。 2.加入的培养液不宜过多,避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱落下来。 3.当细胞向外迁徙出来后要注意记录并去除漂浮的组织块和残留的细胞,它们产生的有毒物质会影响原代细胞的生长。 4.为促进组织块尽快粘贴在培养瓶皿上,可以在种植先将胶原薄层涂在培养瓶底壁上。
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影响细胞株生长的因素有哪些?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
细胞株在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境.外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长. 一、温度: 一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃.温度过高或过低都会影响到细胞的生长.细胞耐受低温的能力比抗热的能力强,在低温下,细胞的代谢活力及核分裂降低.温度低于0℃时,虽影响细胞代谢,但并无伤害作用.把细胞置于23~25℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减缓,不过,鱼类细胞的适宜培养温度为23~25℃.若温度过低,在降到冰点以下时,细胞因胞外水和胞质结冰而受损死亡,但若向培养基中加入甘油或二甲基亚砜(DMSO)等保护剂,封入安瓿中后,置于液氮或低温冰箱(-70℃)中,可起保护作用,此时细胞可而耐受-70℃以下温度,能长期储存,解冻后细胞复苏,仍能继续生长增殖,细胞物性状不受任何影响.此为保存细胞的主要手段. 高温对细胞培养不利.细胞在39~40℃培养1h,会受到一定损伤,但仍有可能恢复,但不能忍受温度再升高2℃,持续数小时,即在41~42℃培养1h,细胞操作严重,温度到43℃以上时细胞多数被杀死.高温主要引起酶的灭活、类脂质破坏、核分裂的破坏,产生凝固酶使细胞发生凝固,另外使蛋白质变性.因此,体外培养细胞时一定要避免高温. 二、渗透压: 细胞在高渗透溶液中低渗溶液中,可以立即发生皱缩或肿胀、破裂.所以,渗透压是体外细胞培养的重要条件.哺乳动物和其他动物组织细胞体外孙女培养的渗透压的维持主要与NaCl有关,但不能忽视其他电解质与渗透压的关系,渗透压与单位体积溶剂内溶质的分子数和离子娄成正比.为此,按一定比例控制培养基中离子平衡,维持正常渗透压是很重要的.这不仅是为了维持细胞张力,而且是为了调节细胞的代谢.因为细胞外离子输送和离子浓度改变着其他营养物质的输送(如氨基酸、糖等),直接影响细胞基本合成系统.理想的渗透压因细胞的类型及种族而异,人血浆渗透压为290mmol/L,被视为是体外培养人类细胞的理想
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肿瘤标志物有哪些特点?又有什么作用呢?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
肿瘤标志物又称肿瘤标记物,是指特征性存在于恶性肿瘤细胞,或由恶性肿瘤细胞异常产生的物质,或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质,并能反映肿瘤发生、发展,监测肿瘤对**反应的一类物质。肿瘤标志物存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中,能够用免疫学、生物学及化学的方法检测到。 特点有: ①肿瘤标志物非常之多,单个标记物的敏感性或特异性往往偏低,不能满足临床要求,理论上和实践上都提倡一次同时测定多种标志物,以提高敏感性和特异性。 ②肿瘤标志物不是肿瘤诊断的惟一依据,临床上需结合临床症状、影像学检查等其他手段综合考虑。肿瘤确诊一定要有组织或细胞病理学的诊断依据。 ③因患者个体差异、患者具体临床情况等因素,肿瘤标志物的分析要结合临床情况,从多个角度比较,才能得出客观真实的结论。 ④某些肿瘤标志物在某些生理情况下或某些良性疾病也可以异常升高,需注意鉴别。 那么肿瘤标志物到底有什么作用呢? 1、辅助判断 通过肿瘤标志物可以辅助检查肿瘤,而且对于一些特别的癌症参考价值比较高,如果肿瘤标志物出现问题,接下来还需要通过活检来进一步确定。 2、制定**方案 癌症患者在制定制作方案之前,往往需要进行肿瘤标志物检查,通过这种检查可以反应疾病的症状可以帮助医生制定**方案。 3、监测**效果 通过肿瘤标志物可以判断**期间的症状,通过肿瘤标志物可以判断一段时间内的**效果,如果肿瘤标志物没有发生一点变化,那么多数情况下也代表着**效果不明显。 4、检查复发情况 通过肿瘤标志物还可以检查肿瘤的复发情况,可以以此作为肿瘤是否复发的基础检测。
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AnaeroPack日本三菱厌氧产气袋2.5L产品特点
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
国内货号:C-1 包装规格:10只/包 产品用途:配合密封罐使用,用于厌氧微生物的培养。本品可吸收容器中的全部O2,同时产生约21%的CO2。 每一个铝塑包装中含有一片纸袋(厌氧产气袋)。 产品特点: 操作简便——不用加水、不用催化剂,只需把药剂(产气袋)外袋剪开放入容器内,密封后即可形成适宜的厌氧、微需氧、二氧化碳培养环境。 适用广泛——培养容器内不会产生压差,不会产生高温。同型号的培养容器可通用,废弃物处理方便,不污染环境。 高效经济——无须使用昂贵且占空间的大型设备,无须使用危险气体,性能价格比更经济实惠。 针对性强——厌氧、微需氧、二氧化碳系列产品,根据培养量选择适合的容器,产气量稳定准确有保障。 使用方法: 1、将铝塑包装上侧剪开,取出纸袋,纸袋不需要打开。 2、立即将纸袋放入密封罐中,将密封罐盖上。接触空气后将即刻吸收O2,产生CO2。不需要加水或使用催化剂。 3、每袋AnaeroPackTM-Anaero 用于2.5 升培养罐,对于大于2.5 升的培养罐,根据培养罐的体积用2~3 包,当使用多袋AnaeroPackTM- Anaero 时,不要叠放在一起。 4、用完的厌氧产气袋可能会因为剩余反应而产生热量,请等它们变冷以后再丢弃。且不要跟易燃物丢在一起。 5、AnaeroPackTM- Anaero 用于45℃以下培养使用。 储藏方法: 密封,置阴凉干燥处保存。 保存期: 在铝塑袋的右下角印有批号及失效期,请在失效期之前使用。
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针对这三大类型的抗体保存需区分对待
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
针对这三大类型的抗体保存需区分对待,对于您想了解的抗体信息,通蔚生物业务员会将产品说明书通过邮寄给您,让您一目了然,不再有选购的烦恼,欢迎广大老师们前来选购。 昨日刚过“大雪",一年度的一个节气。虽然近期各地温度有所降低,但对于抗体的保存不能够因此忽略。在今天的内容中,主要涉及到单克隆抗体、多单克隆抗体、带标记的抗体,针对这三大类型的抗体保存需区分对待。 一、单克隆抗体 可以保存在50%的丙三醇存放于-20℃。也可以将其保存在饱和硫酸铵于4℃或-20℃保存。提供了一种替代的保存方法。在大多数情况下,虽然冷冻干燥有许多优点,它需要昂贵的设备和劳动力。 二、多克隆抗体 在血清中于即使没有冻融,其活性的损失也可以观察到,尽管其进程仍然非常缓慢。即使没有丙三醇,只要你*冻融,抗体也可以存储在-20℃几年甚至几十年。抗体另一个重要的事情是,因为稀的抗体容易失去活性而且容易造成物理吸附导致的损失。 三、带标记的抗体 一般储存在黑色容器中或者用锡箔纸盖住。 1.酶标记抗体 碱性磷酸酶和其他酶结合物对于冷冻特别敏感,一般应在4℃短期存储。 标记抗体长期保存是在终浓度为50%的丙三醇或乙二醇中于-20℃保存。虽然某些酶结合物 可在无保护剂的情况下于-20℃储存,但必须分装,以防止反复冻融。 2.荧光标记抗体荧光遇必须避光保存,其应该存放在4℃、避免让其凝固。 四、抗体浓度 抗体浓度过低(
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细胞的相关知识点 你都知道吗?
作者:德尔塔 日期:2022-03-31
细胞 (英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。 一般来说,细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成,即单细胞生物,高等植物与高等动物则是多细胞生物。细胞可分为原核细胞、真核细胞两类,但也有人提出应分为三类,即把原属于原核细胞的古核细胞独立出来作为与之并列的一类。研究细胞的学科称为细胞生物学。 细胞体形微,在显微镜下始能窥见,形状多种多样。主要由细胞核与细胞质构成,表面有细胞膜。高等植物细胞膜外有细胞壁,细胞质中常有质体,体内有叶绿体和液泡,还有线粒体。动物细胞无细胞壁,细胞质中常有中心体,而高等植物细胞中则无。细胞有运动、营养和繁殖等机能。 01 细胞是一个生命体 细胞是构成生物体的基本单位,同时也是维持生命现象的小技能单位。只要条件完备,便能持续发挥细胞的功能,以及进行增殖,但若是再细分成更小的单位,便会失去生命。 02细胞与组织的关系 人类的身体约有200~300种不同的细胞。这些形形色色的细胞,并非是乱无章法地存在着,而是由具有相同功能的细胞聚在一起,构成组织。组织是由细胞和细胞间质所构成,可分成上皮组织、支持组织、肌肉组织、以及神经组织这四种。 尽管是相同的组织,但随着存在的位置及环境的不同(例如支持组织的骨骼组织和血液),有时看起来就像是不同的组织一般。 (▲细胞间质:填补细胞和细胞间空隙的物质,有胶原纤维、弹性纤维、网状纤维等纤维、以及填补中间空隙的不定形基质所构成。) 03 细胞的构造 细胞是由名为原形质的胶质状物体所组成,以细胞膜包覆,里头有细胞核,细胞核和细胞膜中间有细胞质,还有几个细胞小器官。 细胞膜将细胞与外界区隔,扮演着保有其内部恒定性的角色。细胞核是掌管细胞遗传情报的传达,以及蛋白质合成等代谢活动的司令部。细胞小器官负责细胞的生命活动所需