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细胞常见问题解答
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
1.原代细胞与细胞系有什么区别？ 细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。 细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。 需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。 2.倍增和代数有什么区别？ 倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。 3.接收到的冻存细胞该如何处理？ 收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。 4.有多少经验才能开始正常人类细胞培养？ 推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家。 5.冻存的细胞该如何开始培养？ ⑴将一管细胞从液氮罐中取出，注意保护手和眼睛。 ⑵用10秒钟时间将小管的盖子拧松1/4以去除残留在螺纹处的液氮，然后将盖子盖紧。 ⑶将小管放入37℃水浴中，轻轻握住并旋转，直到管内物体完全融化。 ⑷将小管立即从水浴中拿出，擦干，转入无菌环境。 ⑸用
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Western Blot的原理和所用试剂汇总
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 原理 与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。 分类 western显影的方法主要有以下几种： 1.放射自显影 2.底物化学发光ECL 3.底物荧光ECF 4.底物DAB显色 现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反应底物为过氧化物+鲁米诺，如遇到HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。 主要试剂 1、 丙烯酰胺和N，N’-亚甲双丙烯酰胺，应以温热(以利于溶解双丙稀酰胺)的去离子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N，N’-亚甲双丙烯酰胺储存液丙稀酰胺29g，N，N-亚甲叉双丙稀酰胺1g，加H2O至100ml。)储于棕色瓶，4℃避光保存。严格核实PH不得超过7.0，因可以发生脱氨基反应是光催化或碱催化的。使用期不得超过两个月，隔几个月须重新配制。如有沉淀，可以过滤。 2、 十二烷基硫酸钠SDS溶液:10%(w/v)0.1gSDS，1mlH2O去离子水配制，室温保存。 3、 分离胶缓冲液:1.5mmol/LTris-HCL(pH8.8):18.15gTris和48ml1mol/LHCL混合，加水稀释到100ml终体积。过滤后40C保存。 4、 浓缩胶缓冲液:0.5mmol/LTris-HCL(pH6.8):6.05gTris溶于
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离心机技术进展
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
离心机是通过高速旋转产生的离心力场对不同沉淀系数物质进行分离、浓缩和提纯的医学仪器，广泛应用于生化分析实验室、血站(库)、生化制药厂等。离心机按转速分为低速、高速、超速三种，型式有台式和立式两种。低速离心机的最高转速一般不超过6000转／分，主要用于血液或细胞制备、蛋白质和酶沉 淀物的分离，由于不能产生足够大的离心力场，低速离心机不能分离超小粒子(如病毒，DNA分子)和大分子，或进行密度梯度离心；高速离心机的转速为1 2000-28000转／分，能分离病毒、细菌、细胞核、细胞膜、线粒体等，以及DNA 制备{超速离心机的转速在50000转／分以上，配合光学仪器，可作分子量测定、蛋白质结构及其聚集状态分析、化合物纯度检定等。 近年来，随着微电子技术和机械工业的迅速发展，离心机在性能、可靠性等方面有了很大的提高，本文介绍其中的一些近期进展。 1 微机控制和计算系统，操作极为方便 控制和计算普遍采用微机进行，用户视需要方便地选择操作参数，一般有九种以上的加速度曲线供选择。可储存s2种或更多的应用离心程序。CTR或LED显示器将速度、加速度、离心力值、转子参数、离心室温度等数据的预选值和实际状况一目了然地显示出来，所有操作参数具有可重复性。一些离心机有RS232标准接口供外接计算机，用以从外接计算机上记录、设置或修改操作参数。某些离心机能在转子运行中进行有关的计算和换算，如自动计算相关离心力场(RCF)和防止氯化铯(CsCI)沉淀的降速计算，自动优选及模拟最佳运转条件。美国BECKMAN公司oPtima系列分析超速离心机配备了光学检测系统，在样品分离时扫描样品的光密度，特别适用于：受体／自身受体研究、测定分子量、计算沉淀系数、生物制品质控 2 先近的传动技术减少噪音和振动 离心机过去通常靠t)C电机驱动，也有的以高压气流为动力。由于IX：电机的碳刷和换向器是产生火花干扰、噪声和影响电机寿命的重要因素，因此近年来越来越多地离心机采用变频电机或无刷DC电机。变频电机
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怎样正确进行ELISA操作
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
一、临床标本的收集和保存 用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清（浆），有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和**药物等。对用于激素和**药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以阵发性方式释放，因此，在测定此类激素时，有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显增高。再如**药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响，只是在处理和保存方面要考虑以下几个方面： （1）要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。 （2）样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。 （3）血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。 （4）冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。 （5）标本在保存
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早期胚胎发育中的单胚胎细胞基因表达
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
Single-embryo Gene Expression for Early Embryo Development Mylene Yao, M.D. Assistant Professor Dept. of Obstetrics and Gynecology Stanford University Mylene Yao, M.D., and fellow Stanford University researchers found that Oct4, the master regulator of embryonic stem cell pluripotency, also has critical functions during reprogramming of the early mammalian embryo. This research may ultimately lead to improvements in human in vitro fertilization methods and is relevant to stem cell and cancer research. They recently published their findings in a research paper entitled, A Novel and Critical Role for Oct4 as a Regulator of the Maternal-Embryonic Transition, available at http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19129941. “Scientists from around the world are looking at how to reprogram a highly differentiated somatic cell into a pluripotent embryonic stem cell-like cell,” Dr. Yao said. “There are many different approaches with up and down sides to each; such as, how do you do this without causing side effects like cancer and how can you apply it to therapeutics? The question we ask is very different. We think the mouse, or human embryo, is a good model to study reprogramming because this is the only situation in nature where you have highly specialized cell types—the egg and sperm—that fuse together to undergo reprogramming to produce a pluripotent cell, that is capable of differentiating into many cell types.” The Stanford scientists focused their efforts on the reprogramming mechanisms used by the embryo that direct how pluripotency or totipotency is established. They picked
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离心机的结构及转头的使用与维护
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
一、离心机的结构及分类： 离心机一般分为小型离心机、微量高速离心机、小型高速离心机、大容量冷却离心机、真空高速冷却离心机、高速冷却离心机、制备用超速机、生产用超速机、分析用超速机共计九大类，由于高速离心机使用面很广泛，结构组成具有代表性，本文侧重高速离心机进行讨论 一般高速离心机主要由转头、转头室、驱动系统、控制系统、冷冻系统、真空系统及操作部分组成下面就以上各部分分别进行论述 二、离心机转头部分的正确使用和维护 1．转头和试管的正确使用 就高速机转头而言分为角度、垂直、区带、连续、水平转头几类。转头材料分为铝质、钛合金、碳素纤维三种 转头和试管使用不当可能导致转头事故。造成离心机的报废。 转头在运转期间会产生变形，经过长时间的使用会引起材料疲劳，在使用离心机后应作好记录。在超过厂家规定的使用寿命时应停止使用该转头 另一个值得注意的是防止转头的腐蚀 转头毁坏多半是由于转头腐蚀引起的 铝合金转头虽然表面进行了阳极氧化处理，但仍可被强酸、强碱、氯、铅、铜、汞等盐溶液腐蚀，碱性去污剂也易腐蚀铝转头 钛转头除浓盐酸、浓硫酸、氢氟酸及干燥氯气外几乎不被腐蚀。然而无论何种转头，当转头试管孔底部有小凹痕、表面变色、裂纹，则应停止使用了，使用过的转头注意保养，即清洗、干燥、涂油 转头在使用后均应用40 C一50℃温水清洗，然后用软布擦净。在转头表面及试管孔内薄薄涂一层保护油脂，在干燥情况下保存。当使用腐蚀性液体后，应立即用中性洗涤剂(不含氯)洗涤，再用蒸馏水洗净后进行干燥，通常转头每使用100小时就要进行腐蚀检查，以防严重腐蚀后造成转头事故。 转头下的超遣检滟『环，应保证其表面清洁无破损，以防其失效在离心机中使用的试管容积、形状、材质有多种形式，应根据离心目的进行选择 就材质而言分为聚乙烯PE、聚丙烯PP、聚丙聚乙PA、聚碳酸酯Pc、硝基纤维索CN、玻璃、不锈钢SS等几类 2．转头速度的设定 在设定转速时使应设定的转速不
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离心机发展概述
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
离心机又称沉淀器，类型有用来将液体中的悬浮物质很快分离出来的分离型离心机，有用浓缩和提纯微粒的制备式大型离心机，还有实验分析用的低速分析用离心机，尽管离心机的类型不同，但功能可视为分离、浓缩、提纯和分析几类。 离心机的发展表现在构造的不断改进和离心方法的改进。构造的改进首先体现在转速的提高，由最初仅有几十转发展到今天有几十万转的超高速离心机经历了六代，驱动系统的寿命从1O亿转提高到200亿转；工作时间由几小时发展到数十小时或数天；离心转子(转头)的种类不断改进和增加；控制的自动化程度不断提高；机体外型朝着美观、实用、小型化的方向发展；最大的进步是离心方法的不断丰富和发展；使离心机的应用范围不断的扩大。 离心机的传动方式经历了手摇式到电动式、机械变速、油压气压为动力的机械变速直至当今的变频电机变速的过程。十九世纪末和二十世纪初离心机停留在低速电动的状态上，到20年代则出现了超高速离心机，美国杜邦公司生产了油透平式离心机．1933年又推出了空气透平式离心机，以压缩空气推动蜗轮，再带动离心机旋转；1955年美国贝克曼公司推出了可达l00000rpm的风动离心机，70年代以后，出现了高速电机即变频电机的应用，在80年代又将变频电机和微型计算机相结合，使离心机转速和性能都有了较大的提高，进人如年代以后，离心机技术已臻成熟，较好地满足了科研生产和医学上的需要。 二、应用与展望 1．离心机的应用 离心机的应用范围非常广阔，不同转速的离心机应用范围不同。 2．离心机的展望 离心机在构造和离心方法上都比较完善，但就对离心技术的要求，仍有许多工作要做。 1)进一步提高离心机转速，做为研究人体科学的基本实验，技术需要有超高转速的新型离心机问世，目前我国只生产6万转/分以下的离心机，发达国家的超高速离心机的转速最高为120000转/分。 ‘ 2)改进速度控制的方法，部分厂商已将变频电机和微型计算机控制引人了离心机的制造中，使转速和温度及真空度
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电子天平计量检定如何才准确
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
利用电磁力平衡重力原理制成的天平称之为电子天平。随着实验室应用的越来越普遍，其测量的准确性、可靠性也就愈为重要。早在１９９１年国家颁布实施的《ＪＪＧ９８－９０非自动天平计量检定规程》（试行）中，对电子天平计量检定的描述比较笼统，可操作性欠佳，这样使得从事电子天平计量检定工作的人员，在对规程的理解上并不十分透彻。尤其在评判一个电子天平的“合格与否”所掌握的尺度上不尽相同，使得仪器测量的准确性、参数的可靠性不能得到保证。为使电子天平在实际应用中的质量得到有效控制，本文就电子天平的计量检定以及应注意的问题与大家共同探讨。 １ 如何对电子天平进行分级和判定其各项允差 目前生产电子天平的厂家比较多，有个别厂家在产品说明中未能详细的标识其性能指标，或者是标识不规范、不统一，有的给出级别，有的不给出级别。比如有的电子天平明确了实际标尺分度值ｄ，而未标明它的检定分度值ｅ，这对于使用者来说会误以为ｄ＝ｅ，认为电子天平能分辨出最小的值就是它本身能够称量的准确数值。 而对于计量检定人员来讲，确定电子天平的检定标尺分度值ｅ非常关键，因为ｅ是用来评定其准确度级别以及最大允许误差的依据：在计量检定中若各项参数指标的最大示值误差均不大于1ｄ，我们确定ｅ＝ｄ；如果各项参数指标最大示值误差均小于10ｄ，我们确定ｅ＝10ｄ。有时还需根据具体情况而定，比如当ｄ：０．２ｍｇ时，ｅ＝5ｄ；ｄ：0.5mg时，ｅ＝2ｄ。总之，在对检定标尺分度值的划分上应按照以下形式：1×10ｋ或2×10ｋ或5×10ｋ(ｋ为正整数、负整数或零）。我们把除了ｅ＝ｄ以外的情况都归为≠ｄ，其中以ｅ＝ｌ０ｄ最为常见。以下是根据检定分度值ｅ来对电子天平进行等级划分及其最大允许误差的归纳总结。 ２ 电子天平计量性能检定的主要内容 在日常的周期检定和常规的产品质量检查中，一般需要检定以下几项内容： 天平灵敏度、鉴别力的检定； 天平各载荷点的最大允许误差（称量线性误差）的检定； 天平重
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怎样可以提高您的天平称量准确度
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
怎样可以提高您的天平称量准确度 1.使用前应先阅读产品说明书，充分理解说明书上的要求、注意事项等。 2.使用前充分预热，一般应在30分钟以上，天平的准确度越高，预热的时间也应相应延长。 3.使用前先用标准砝码校正，不同准确度天平选用的相对应等级的砝码。 4.应在加载后固定的时间读数，如都以加载后5秒的示值读取或都以单位显示出来时的示值读取。 5.多次测量，取其平均值（3~5次）。 在检测中需要容器盛装物质称量时，有的物质会粘在容器上，当粘在容器上的物质超过称量精度时，对检测就会产生误差，而电子天平就能方便地测得粘在容器上的物质。只要再把容器放上去称一下，就知道有没有超过称量精度。 6.2电子天平的去皮功能 机械天平称量时，必须先称出容器重量，而电子天平就可以用去皮功能，不论是直接称量还是差减称量都很方便，而且对称量精度有所提高，如在集料筛分试验时，用去皮功能使操作既方便又精确，筛分时要把每一分计筛余进行称量，当把筛上集料取下时容易丢失，特别是细集料更容易丢失，导致累计筛余与总量之比超出标准要求，如果利用电子天平的去皮功能进行称量，就不用考虑集料的丢失，先把筛子与集料一起在电子天平上称量，然后按一下去皮键，把筛子上的集料清理干净，在清理时还可轻拍筛框清理集料，把清理干净的筛子在电子天平上称一下，这是电子天平上会显示一个负数，该值的绝对值即是集料的质量。 6.3用电子天平替代量水器 电子天平的精确度完全可以达到量水器的要求，而量水器的半月面目视液面就有一定误差，在使用久时不及时清洗容易结上污垢，所以要正常进行校正，为此电子天平替代量水器，是一种新的选择，但在称量时还是要注意到容器上的液体还存在多少，否则误差还是会很大的，可进行这样操作，先置容器于电子天平上，按一下去皮键，按规定称量称至要求，这时倒出液体后再往电子天平上称一下，会显示一个数值即为误差值，有时候会出现一个负数，这时就应用吸管补足，反之用
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微型真空泵，微型气泵选型中的三个重要指标
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
现在微型泵选型中，如微型真空泵，微型气泵，微型气体采样泵，微型气体循环泵，微型抽气泵，微型吸气泵，微型打气泵，微型充气泵，微型高压气泵等，常常要涉及到这三个概念。 一、简单的说，这三个概念分别对应气体的稀薄、正常、浓密状态。 常压：指一个大气压，即我们平常生活的这个大气层产生的气体压力。一个标准大气压为101325 Pa(帕，帕斯卡-常用压强单位)。100,000Pa=100KPa，所以“一个标准大气压”我们也常用100KPa或101KPa表示。每个地方由于地理位置、海拔高度、温度等不同，当地的实际大气压跟标准大气压也不相等，但出于简化目的，有时候可以近似认为常压就是一个标准大气压，即100KPa； 负压：就是指比常压的气压低的气体状态，也就是我们常说的“真空”。例如，用管子喝饮料时，管子里就是负压；用来挂东西的吸盘内部，也是负压。 正压：就是指比常压的气压高的气体状态。例如，给自行车或汽车轮胎打气时，打气筒或打气泵的出气端产生的就是正压。 科研、生物工程、自动控制、环保、水处理等众多领域应用中，常常要进行气体采样、气体循环、物体吸附等，这时候就要用到真空泵。它的主要参数有真空度、流量等。 二、“真空度”一般指泵工作时，能达到的极限压力，也即，它能将密闭容器内的气体抽走后，剩下气体的稀薄程度。 1.工业上，极限压力表示可以有两种,一种是“绝对压力”,即以“绝对的真空”(理论上才能达到的绝对真空，什么物质都没有)为零位,标出的数值都是正值，这个数字越小,越接近绝对真空,也就是真空度越高。比如我们有一款“高真空”微型真空泵 ()。它的极限压力为10KPa（0.01MPa），在微型真空泵里，就属于真空度很高的了。 2.另一种是“相对压力”,即以大气压作为零位,低于大气压的用负值表示,所以叫“负压”。这个负值的绝对值越大,则真空度越高。比如我们有一款“高负压微型真空泵”() 的负压为-75KPa(-0.075MPa)，就没有VCH1028高(VCH是-90KPa（-0.09Mpa）)。所以，相应的PH2506B的抽吸力也没有V
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动物心室插管记录心室压方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
心室压力的变化是分析心功能与血流动力学最重要的指标之一。采用MPA心功能分析系统可以连续详细地观察记录左心室压力的变化，并实时提取重要参数进行分析。 将心室导管连接压力传感器，后者接MPA心功能分析系统。可以直接插管入左心室或通过颈总动脉逆行插管到左心室的方法。 直接插管法：开胸暴露心脏后，剪开心包，将导管经左心室心尖创口插入左心室腔内，注意插入深浅适度并保证管口不与心室壁接触。 颈总动脉插管法：将导管插入颈总动脉，结扎线稍做固定，撤去动脉夹，此时观察的波形为动脉血压波形，然后向心方向缓缓推入插管，边推边观察MPA心功能分析系统显示的波形变化，显示间断和规律的锯齿状波形时，表示导管尖端已达主动脉瓣处。此时稍加用力可产生轻微的突破感, 再小心推进导管, 动脉血压波形突然转变为振幅和波宽高大的左室内压波形，舒张压为零附近时，提示插管已达左心室内。 要点与注意事项： 1.压力传感器放置位置要与左心室水平。2. 应尽量缩短管道长度，采用耐压透明塑料管。3. 导管插入深浅与位置十分重要，要保证导管口不与心室壁接触。4. 将左心室插管与压力传感器连接管阻断，打开侧管使压力传感器与大气相通，可标记零点。
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全自动微生物鉴定和药敏分析仪器的探讨
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
1 概述 由多种病原微生物所致的传染病遍布临床各个科室，其中细菌性感染最为常见，因此抗菌药物也就成为临床应用最广泛的药物之一。在抗菌药物治愈和挽救了许多患者生命的同时，也出现了由于抗菌药物应用不合理的问题，给病人健康乃至生命造成了重大影响。所以准确、及时的发现和鉴定病原体并快速做出病原学诊断和药物敏感性试验是当务之急。从上世纪80年代后期微生物学家和工程技术人员密切合作，在对微生物进行深人研究的基础上，采用物理和化学的分析方法，根据细菌不同的生物特性和代谢产物的差异，逐步发展了微量快速培养基和微量生化反应系统，在仪器内部安装了恒温孵育箱，通过微机和恒温电路自动维持和调节温度，自动检测是否有细菌生成及细菌的类型，使微生物鉴定和抗菌素敏感性试验及最低抑菌浓度值(MIC)的测定在一台仪器中自动完成。至今，全国应用自动化细菌鉴定仪器的临床细菌室约占近半的比例，为快速、正确的细菌学报告及指导临床合理用药提供了可靠的依据。 2 全自动微生物鉴定和药敏分析仪器的介绍 该类仪器是用于鉴定各种病原菌，主要是革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、肠球菌属及真菌等，检验菌种可达500多种。可以同时做抗菌药物敏感性试验，以帮助临床医生做出正确的病原学诊断并制定**方法。 2.1 仪器的基本工作原理 全自动微生物鉴定和药敏分析类仪器结合自动化、微机化和先进的微生物检验方法，可同时做细菌鉴定和药敏试验，能够对临床大多数细菌进行快速鉴定和药敏实验。 细菌鉴定原理:采用传统的比色法和快速荧光法。根据不同类别细菌的理化性质不同，设计不同的测试卡，每一张卡包括多项生化反应。仪器采用光电比色法测定细菌因分解底物导致PH值改变或由于细菌生长利用底物而引起的透光度变化;其荧光法是在测试卡的小孔中加人酶底物，使其与细菌产生的酶结合生成荧光物质。仪器在较短的时间内能够分析细菌对不同生化底物所产生的发荧光的物质，通过读数器测定
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自动化技术在微生物检验中的应用
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体，采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板，可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已在世界范围内临床实验室中广泛应用。 一、微生物数码鉴定法 早在七十年代中期，一些国外公司就研究出借助生物信息编码鉴定细菌的新方法。这些技术的应用，为医学微生物检验工作提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序，大大提高了细菌鉴定的准确性。目前，微生物编码鉴定技术已经得到普遍应用，并早已商品化和形成独特的不同细菌鉴定系统。如API、Micro-ID、RapID、Enterotube和Minitek等系统。这种鉴定系统是自动化鉴定系统的基础。 ( 一)数码鉴定法基本原理 数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码，建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字（编码），查阅检索本或数据库，得到细菌名称。其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。随着电脑技术的进步，这一过程已变得非常容易。 1．简要介绍计算步骤： (1)出现频率（概率）的计算：将记录成阳性或阴性结果转换成出现频率：①对阳性特征，则除以100即得。 ②对阴性特征，除以100的商被1减去即可。③说明：对“0”和“100”，因这2个数太超量，为了使结果不出现过小或过大，而用相似值0.01或0.99值代替。 (2)在每一个分类单位中，将所有测定项目的出现频率相乘，得出总出现频率。 (3)在每个分类菌群中的所有菌的总出现频率相加，除以一个分类单位的总出现频率，乘100，即得鉴定%（%id） (4)在每个菌群中，再按%id值大小顺序重新排列。将未知菌单次总发生频率除以最典型反应模式单次总发生频率，得到模式频率T值，代表个体与总体的近似值。T值越接
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生物信息学在基因芯片数据功能分析中的应用
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
随着人类基因组计划(Human Genome Project)即全部核苷酸测序的即将完成，人类基因组研究的重心逐渐进入后基因组时代(Postgenome Era)，向基因的功能及基因的多样性倾斜。通过对个体在不同生长发育阶段或不同生理状态下大量基因表达的平行分析，研究相应基因在生物体内的功能，阐明不同层次多基因协同作用的机理，进而在人类重大疾病如癌症、心血管疾病的发病机理、诊断**、药物开发等方面的研究发挥巨大的作用。它将大大推动人类结构基因组及功能基因组的各项基因组研究计划。生物信息学在基因组学中发挥着重大的作用, 而另一项崭新的技术——基因芯片已经成为大规模探索和提取生物分子信息的强有力手段，将在后基因组研究中发挥突出的作用。基因芯片与生物信息学是相辅相成的，基因芯片技术本身是为了解决如何快速获得庞大遗传信息而发展起来的，可以为生物信息学研究提供必需的数据库，同时基因芯片的数据分析也极大地依赖于生物信息学，因此两者的结合给分子生物学研究提供了一条快捷通道。 本文介绍了几种常用的基因功能分析方法和工具： 一、GO分类法 最先出现的芯片数据基因功能分析法是GO分类法。Gene Ontology（GO，即基因本体论）数据库是一个较大的公开的生物分类学网络资源的一部分，它包含38675 个Entrez Gene注释基因中的17348个，并把它们的功能分为三类：分子功能，生物学过程和细胞组分。在每一个分类中，都提供一个描述功能信息的分级结构。这样，GO中每一个分类术语都以一种被称为定向非循环图表（DAGs）的结构组织起来。研究者可以通过GO分类号和各种GO数据库相关分析工具将分类与具体基因联系起来，从而对这个基因的功能进行描述。在芯片的数据分析中，研究者可以找出哪些变化基因属于一个共同的GO功能分支，并用统计学方法检定结果是否具有统计学意义，从而得出变化基因主要参与了哪些生物功能。 EASE（Expressing Analysis Systematic Explorer）是比较早的用于芯片功能分析的网络平台。由美国
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离心机分离过程的特点及其应用
作者：德尔塔 日期：2022-05-01
1． 被处理物料的物性参数 我们在选择离心机前， 首先要知道被处理物料的化学成份、粘度 PH值，物料属悬浮液还是乳浊液以及他们的固、液相浓度，物料的固体粒子的粗或细， 以及操作温度等。在工业生产中， 各种形式的悬浮液都会遇到， 而且在一般情况下，悬浮液内颗粒直径差异较大。悬浮液的粘度随固体物质的增加而提高。 2． 离心机分离过程的特点及其应用 离心机分离的过程一般有离心过滤、离心沉降和高心分离三种。离心过滤过程常用来分离固体量较多，粒子较大的固液混合物，分离过程一般可分三个阶段： 第一阶段，固体颗粒借离心力的作用沉积到转鼓内壁上形成滤渣层，滤液也借离心力的作用穿过转鼓的网孔而滤出。第二阶段， 滤渣层在离心力的作用下被压紧，并将其中所含滤液压挤出去。 第三阶段，滤渣层空隙中所含液体在离心力作用下，继续被排出，使滤渣进一步干燥。 离心沉降过程可用来分离含微小固林颗粒的悬浮液， 分离过程一般可分为两个阶段： 第一阶段， 固体颗粒借离心力的作用沉积到转鼓内壁上。第二阶段，沉降在转鼓壁的颗粒层， 在离心力作用下被压紧。当悬浮液中含固量较多时， 沉降的颗粒大量积集，渣层很快地增厚， 因此要求连续排渣。当悬浮液中含固量报少，可以看作单个颗粒在离心力作用下的自由沉降，渣层成长慢，可采用间歇排渣方法后者又称离心澄清过程。 离心分离过程是用米分离由重度不同的液体所形成的乳浊液，在离心力作用下液体按重度差别分层， 然后分别引出。 离心澄清和离心分离， 由于过程中分离的固相量报少或者两者都是液体， 所以这种高心机较容易进行加料、排料的连续操作，但需要较高的分离因数才能很好分离， 这种离心机又称分离机。 3． 离心机的分离因素、分类及型号 我们设W表示转鼓的角速度（rad／s），R表示转鼓的半径（m），w表示转鼓的圆周速度（m／s）， 则离心加速度与重力加速度之比称为离心分离因数。 分离因数表示离心力场的特性， 是代表离心机性能的重要因
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