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杂交瘤的克隆化及冻存与复苏

杂交瘤的克隆化及冻存与复苏

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

杂交瘤克隆化一般是指将抗体阳性孔进行克隆化。因为经过HAT筛选后的杂交瘤克隆不能保证一个孔内只有一个克隆。在实际工作中,可能会有数个甚至更多的克隆,可能包括抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、所需要的抗体(特异性抗体)分泌细胞和其它无关抗体的分泌细胞。要想将这些细胞彼此分开就需要克隆化。克隆化的原则是,对于检测抗体阳性的杂交克隆尽早进行克隆化,否则抗体分泌的细胞会被抗体非分泌的细胞所抑制,因为抗体非分泌细胞的生长速度比抗体分泌的细胞生长速度快,二者竞争的结果会使抗体分泌的细胞丢失。即使克隆化过的杂交瘤细胞也需要定期的再克隆,以防止杂交瘤细胞的突变或染色体丢失,从而丧失产生抗体的能力。    杂交瘤细胞的冻存:及时冻存原始孔的杂交瘤细胞每次克隆化得到的亚克隆细胞是十分重要的。因为在没有建立一个稳定分泌抗体的细胞系的时候,细胞的培养过程中随时可能发生细胞的污染、分泌抗体能力的丧失等等。如果没有原始细胞的冻存,则可因上述意外而前功尽弃。  杂交瘤细胞的冻存方法同其他细胞系的冻存方法一样,原则上细胞应在每支安瓿含1×106以上,但对原始孔的杂交瘤细胞可以因培养环境不同而改变,在24孔培养基中培养,当长满孔底时,一孔就可以装一支安瓿冻存。50%胎牛血清、40%不完全培养液及10%DMSO(二甲基亚砜)是常用的细胞冻存液。冻存液预冷,操作时动作要轻且迅速。冻存时从室温可立即降至0℃后放入-70℃超低温冰箱,次日转入液氮中。也可用细胞冻存装置进行冻存。冻存细胞要定期复苏,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性,在液氮中细胞可保存数年或更长时间。    细胞复苏方法:将玻璃安瓿自液氮中小心取出,放37℃水浴中,在1min内使冻存的细胞解冻,将细胞用完全培养液洗涤两次,然后移入头天已制备好的饲养层细胞的培养瓶内,置37℃、5%CO2孵箱中培养,当细胞形成集落时,检测抗体活性。

原代细胞的培养与取材

原代细胞的培养与取材

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化,经大量扩增后所形成的生物学特性稳定的克隆化细胞群,称之为细胞株或克隆细胞。此过程称为细胞的纯化或细胞克隆。这些基本技术是从事细胞培养工作的基础,只有熟悉和掌握了基本技术,才可能更快捷地学习和掌握其他方法。原代细胞的取材:    人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件,是进行细胞培养的*步,若取材不当,将会直接影响细胞的体外培养,现将取材的基本要求和注意事项叙述如下:(1)取材要注意新鲜和保鲜,新鲜组织易于培养成功,取材时应尽量在4~6h内能制作成细胞,尽快入箱培养,若不能即时培养,应将组织浸泡于培养液内,于4℃存放。若组织块较大,应在清除表面血*、坏死组织、脂肪和结缔组织后,切碎于培养液内4℃存放,但时间不能超过24h。对于已切碎的组织或血液、淋巴组织应加入含10%二甲基亚砜的培养基,按细胞冻存方式于液氮中冷冻保存。(2)取材应严格无菌,所取标本材料应在无菌条件下进行,为了确保无菌,对所取材料若疑有污染的可能,应将所取组织在含高浓度抗菌素(400单位/mL)甚至加入适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上,再用PBS洗2~3次,以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的带少许培养液(内含400单位/mL抗菌素)的小瓶等便于携带的物品来取材,所取材料应避免接触有毒有害的化学物质,如碘、汞等。(3)取材和原代细胞制作时,要用锋利的器械,如手术刀或剃须刀片切碎组织,尽可能减少对细胞的机械损伤。(4)要仔细去除所取材料上的血液(血*)、脂肪、坏死组织及结缔组织,切碎组织时应避免组织干燥,可在含少量培养液的器皿中

同济老师与上海沪鼎开展长期合作关系

同济老师与上海沪鼎开展长期合作关系

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

上周五,来自同济大学的刘老师给我们来,说想要咨询一下人抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)试剂盒的说明书和一些相关的操作事项。之后我们钱发了说明书和一些相关的资料给他,然后又详细的给刘老师解释了一遍。刘老师说:感谢您的负责和耐心。钱说:哪里,这是我们应该的,要感谢也是我们感谢您一直的支持。刘老师:恩,也是(俏皮的说),东西不错就一直用。钱:那是,这点我们还是很自信的。刘老师:那你先把人抗凝血酶Ⅲ试剂盒的合同做给我吧,过几天,我可能还要定几盒人胃泌素(Gas)试剂盒。钱:恩,好的,一会做好发给您。到时需要时就跟我讲一下,我们这边立刻发给您。刘老师:我这边还有点事,我就去忙了。钱:恩,好的。   同济大学是历史悠久的老校,能够得到同济大学老师们的亲睐,我司感到非常愉快,在一次次友好的合作中,也加快的帮助我司建立更好的口碑,我司也将不断努力为科研工作提供更好更快的服务,欢迎您的咨询来电。

大鼠葡萄糖激酶(GK)ELISA试剂盒检测范围

大鼠葡萄糖激酶(GK)ELISA试剂盒检测范围

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

大鼠葡萄糖激酶(GK)ELISA试剂盒 英文名称:Rat GK ELISA Kit 实验类型:夹心法 检测范围:50 mU/L – 1600 mU/L zui低检测限:10 mU/L 应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途) 大鼠葡萄糖激酶(GK)ELISA试剂盒实验目的 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠葡萄糖激酶(GK)的含量。 有效期:6个月 保存条件:2-8℃   实验原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠葡萄糖激酶(GK)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠葡萄糖激酶(GK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

ELISA试剂盒进口大鼠分类有两种

ELISA试剂盒进口大鼠分类有两种

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

ELISA试剂盒进口大鼠分类有两种 *:采用双抗体二步夹心 ELISA试剂盒测定标本中各种动物相关指标的水平。 第二:采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。 的性能分析 1. 灵敏度:zui低检测浓度小于10 U/ml。 2.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。 3. 准确性:标准品线性回归 ELISA试剂盒预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。 4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。 5. ELISA试剂盒进口大鼠特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。 Vinblastine    ≥95%         Vinpocetine    ≥98% Vincristine    ≥92%         Catharanthine    ≥95% Epimedin A    ≥98%         Epimedin B    ≥98%         Epimedin C    ≥98%         Siamenoside I    ≥98%         Nobiletin    ≥98%         Ligustrazine    ≥98%         Andrographolide    ≥98%          Andrographolide    98% ELISA试剂盒进口大鼠

影响ELISA双抗夹心法实验结果的七大因素分析

影响ELISA双抗夹心法实验结果的七大因素分析

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

前言:双抗夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)是zui典型的免疫分析法,被广泛用于检验医学工作中疾病诊断、食品安全、环境分析等领域。    抗原抗体结合的特异性,酶催化反应的专一性,生物素和亲和素级联放大效应都极大地提高了双抗夹心法ELISA检测的灵敏度,对检测物的快速诊断提供了重要保证。然而,ELISA从标本制备到结果检测的任何一个步骤都影响了zui终结果的判读。今天上海恒远分享一篇影响双抗夹心法ELISA实验结果的七大因素分析,希望能帮助到您! 1、样本和检抗的加样方式:    双抗夹心法ELISA常规检测方法是样品、抗体试剂单独加入。但有些试剂盒推荐样品和检测抗体一起加来缩减步骤从而加快检测的时间。然而由于游离的样品和检测抗体先结合后形成空间位阻效应,可能会影响样品和包被抗体的结合。所以,一般不建议将ELISA步骤中样品和检测抗体一同孵育。 2、孵育温度:    孵育温度可以选择25℃,这样可以降低检测的背景而又可以保持其在37℃下的检测灵敏度。然而在OD值整体偏低的情况,就不建议这么做了。 3、封闭与否:    牛血清白蛋白在ELISA反应中可以防止酶的分解和非特异性吸附。但是封闭并不是对所有的ELISA体系都必须。有实验表明,牛血清白蛋白封闭并不能提高ELISA体系的检测灵敏度,反而影响了低浓度样品的检测。原因可能是高浓度下的牛血清白蛋白可能会影响低浓度的标准品/样本与抗体结合,导致检测的灵敏度降低。因此,只要抗体的活性高,也可以不用封闭这一常用的步骤。 4、洗液中吐温浓度:    吐温20是阴离子表面活性剂,防止了抗原抗体的非特异性结合同时也防止后面的抗体或样品吸附到微孔板上,因此ELISA包被抗体时一定不能含有吐温20,但是包被以后的步骤中的缓冲液都可以含有吐温20,其浓度在0.05%为*。 5、样本严重溶血:    样本严重溶血红细胞破坏溶解时,释放出大量具有过氧化物酶活性的血红蛋白,在以辣根过氧化物酶为标记的ELISA测定试验中,容易在温育过程中吸附于微孔板

如何调整进口elisa酶联免疫试剂盒实验的对策

如何调整进口elisa酶联免疫试剂盒实验的对策

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

进口elisa酶联免疫试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。  下面将操作中各个环节常出现问题解决办法总结于下: 选择试剂:  选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。 标本收集与保存:  避免使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;2-8℃下,标本可放置24-48小时,长期保存需放置-20℃下。 请避免反复冻融。  人ELISA试剂盒具体请参照:  试剂使用中的准备工作及注意事项:  试剂盒中会有提示,一般需要准备的有:  洗涤液;用前配制;有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月;如果没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制。  显色液(有A液和B液的),用前15分钟配制;  标准品:有的试剂盒中标准品是已经配制好的,4度保存;有的是要现配制的;按照说明书操作;  浓缩生物素结合的二抗和HRP:如果需要配制,试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制);  原则是:试剂盒上没有指出配制物的储藏方式的话,应该现配现用;不要怕麻烦;还有小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连以后总量不够。 加 样:室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的实验操作的试剂,加样对数据的影响比较大,特别要注意加样问题。  不好的操作原因:  不会正确使用加样器;  血清或血浆标本分离不好即进行加样;  进口elisa酶联免疫试剂盒手工操作中,加样板过多造成加样後放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);  加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。 100004    3-hydroxy-N-2-naphthyl-2-naphthamide    304-59-6    845885-90-7 100005    色酚AS-SW    meso-2,3-Dimercaptosuccinic acid    846589-98-8 100006    135-64-8    二巯基丁二酸    847063-13-2 100007    Naphthol AS-KB    304-55-2    847227-37-6 100

即用型平板培养基制备过程之灭菌

即用型平板培养基制备过程之灭菌

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

不同的即用型平板培养基其制备方法也不同,一般包括以下步骤:   (一)准确称量试剂根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。   (二)校正pH值将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N  NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。   (三)过滤将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。   (四)分装将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。     (五)灭菌  培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。  即用型平板培养基高压蒸汽灭菌,一般采用15磅/平方(即1.05kg/cm2)压力,此时的温度是121.3℃。灭菌20~30分钟后,可达到完全灭菌的目的。在进行灭菌的时候,首先要把灭菌锅内的冷空气排出,否则,冷空气存在会降低锅内的实际温度,影响灭菌效果。  100029    锌试剂    gossypol    848574-60-7 100030    135-52-4    棉酚    848777-30-0 100031    3-hydroxy-2,7-naphthalenedisulfonic acid, disodium salt    303-45-7    848821-58-9 100032    2-萘酚-3,6-二磺酸二钠    Methenolone Enanthate    848821-61-4 100033    135-51-3    美替诺龙庚酸酯    848821-76-1 100034    disodium 3-aminonaphthalene-2,7-disulphonate    303-42-4    848841-54-3 100037    2-萘胺-3,6-二磺酸钠盐    2,3-Dihydroxybenzoic acid  

转化细胞周期概述

转化细胞周期概述

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

转化细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。可分为四个阶段:①G1期(gap1),指从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间;②S期(synthesis phase),指DNA复制的时期,只有在这一时期H3-TDR才能掺入新合成的DNA中;③G2期(gap2),指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间;④M期又称D期(mitosis or division),细胞分裂开始到结束。细胞周期(cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,分为间期与分裂期两个阶段 间期 间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。 1. G1期 此期长短因细胞而异。体内大部分细胞在完成上一次分裂后,分化并执行各自功能,此G1期的早期阶段特称G0期。在G1期的晚期阶段,细胞开始为下一次分裂合成DNA所需的前体物质、能量和酶类等。 2. S 期 是细胞周期的关键时刻,DNA经过复制而含量增加一倍,使体细胞成为4倍体,每条染色质丝都转变为由着丝点相连接的两条染色质丝。与此同时,还合成组蛋白,进行中心粒复制。S期一般需几个小时。 3. G2期 为分裂期做zui后准备。中心粒已复制完毕,形成两个中心体,还合成RNA和微管蛋白等。G2期比较恒定,需用1~1.5小时。 [有丝分裂] 分裂期 M 期:细胞分裂期。 细胞分裂期:前期,中期,后期,末期。 细胞的有丝分裂(mitosis)需经前、中、后,末期,是一个连续变化过程,由一个母细胞分裂成为两个子细胞。一般需1~2小时。 1. 前期(prophase)染色质丝高度螺旋化,逐渐形成染色体(chromosome)。染色体短而粗,强嗜碱性。两个中心体向相反方向移动,在细胞中形成两极;而后以中心粒随体为起始点开始合成微管,形成纺锤体。随着核仁相随染色质的螺旋化,核仁逐渐消失。核被膜开始瓦解为离散的囊泡状内质网。 2. 中期(metaphase)细胞变为球形,核仁与核被膜已完全消失。染色体均移到细胞的赤道平面,从纺锤体两极发出的微管附着

大鼠P-HSLELISA试剂盒使用说明书

大鼠P-HSLELISA试剂盒使用说明书

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

南京森贝伽现货供应,质量保证,价格优惠,试剂盒森贝伽。 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中P-HSL的含量。 实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠P-HSL水平。用纯化的大鼠P-HSL抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入P-HSL,再与HRP标记的P-HSL抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的P-HSL呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠P-HSL浓度。   试剂盒组成: 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份   封板膜 2片(48) 2片(96)   密封袋 1个 1个   酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品:18μmol/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存   样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集

大鼠P-HSLELISA试剂盒操作步骤

大鼠P-HSLELISA试剂盒操作步骤

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

南京森贝伽现货供应,质量保证,价格优惠,试剂盒森贝伽。 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中P-HSL的含量。 实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠P-HSL水平。用纯化的大鼠P-HSL抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入P-HSL,再与HRP标记的P-HSL抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的P-HSL呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠P-HSL浓度。   试剂盒组成: 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份   封板膜 2片(48) 2片(96)   密封袋 1个 1个   酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品:18μmol/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存   样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集

辣根过氧化物酶标记链霉亲和素

辣根过氧化物酶标记链霉亲和素

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

英文名称Streptavidin/HRP中文名称辣根过氧化物酶标记链霉亲和素克隆类型Polyclonal交叉反应 Biotin产品应用WB=1:5000-50W ELISA=1:5000-50W IHC-P=1:500-5W IHC-F=1:500-5W  not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.浓    度1mg/ml产品介绍background:Streptavidin is a tetrameric protein composed of identic subunits. Each subunit binds one biotin molecule with a KD of ~1x10-15M. The preparation contains an N- and C-terminal shortened variant (core streptavidin) with improved properties concerning homogeneity, solubility, resistance towards proteolytic degradation and accessibility of the biotin binding pocket as compared to native streptavidin. The high affinity recognition of biotin and biotinylated molecules has made streptavidin one of the most important components in diagnostics and laboratory kits.This enzyme conjugate solution can be used to stain biotinylated antibodies. Important Note:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

链霉亲和素产品简介

链霉亲和素产品简介

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

链霉亲和素产品简介! 货号:XF9170 规格:1mg/10mg/100mg 保存:-20℃干燥保存,有效期至少保存2年。 纯度:≥99%(SDS-PAGE) 活性:15.7Units/mg,1unit定义为结合1ug生物素所需的链霉亲和素的量(单位mg)。 产品来源:重组蛋白,大肠杆菌表达。   产品简介: 链霉亲和素(Streptavidin)是一种源自于阿维丁链霉菌(streptomyces avidinii)的生物素结合蛋白质,由四个相同的亚基组成,每个亚基可结合一个生物素分子。链霉亲和素与生物素的结合力*,其解离常数约为10-14 M,这一特质是得链霉亲和素-生物素系统广泛应用于荧光显微镜术、免疫电镜,、流式细胞分析、Western杂交、ELISA 检测等传统生物学技术,以及生物芯片和纳米生物学等现代前沿研究领域。与来源于鸡蛋清的亲和素相比,链霉亲和素不含糖及修饰,等电点接近胜利pH值,因而非特异性吸附显著低于前者,可提供更高的检测信噪比。 本公司生产的链霉亲和素是经基因工程改造的重组核心链霉亲和素,不含天然链霉亲和素N-末端C-末端多肽片段,有效避免了这些末端多肽对生物素结合的空间位阻。此外,本产品在每个亚基C-末端引入了组氨酸标签(6xHis),用户可方便的设计基于Ni-NTA的实验方案。 链霉亲和素四聚体表观分子量为57.8kD,单亚基表观分子量为14.4kD   使用方法: 本产品为冻干粉,含微量磷酸钠盐,链霉亲和素在高浓度时、冻干过程中或反复冻溶条件下易 形成不溶的聚集体。推荐以纯水溶解冻干粉至 5-10 mg/ml 浓度,如见溶液略呈浑浊,可经 16000 g 离心 5 分钟去除不溶物。不溶物含量很少,不影响产品有效成分的含量及使用。配置好的溶液可分 装为适宜体积,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融,其活性至少可保持半年。如欲在 4℃下保存溶 液,可添加适量防腐剂(如 0.05%叠氮钠)以避免微生物生长,并于 2 周内用完。   注意事项: 链霉亲和素是一种高度稳定的蛋白质,可抵抗蛋白酶消化、 pH 和温度、以及较高浓度的变 性剂和去污剂。常用的

硫乙醇酸盐培养基的用法

硫乙醇酸盐培养基的用法

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

硫乙醇酸盐培养基是检验相关产品灭菌后是否灭菌完全的细菌培养基,由于它是分层的培养基故又可成为需厌氧菌培养基,该培养基需要菌可生长在上层,厌氧菌可以生长在底部,兼性则全管生长。硫乙醇酸盐培养基用法介绍如下:1 、称取本品 29.25g,加热搅拌溶解于 1000ml 纯化水中,2 、分装适宜容器 ,其装量与容器高度的比例应符合,3 、培养结束后培养基氧化层 ( 粉红色  ) 不超过培养基深度的 1/2 。4 、121℃高压灭菌 15  分钟迅速冷却。在供试品接种前,培养基氧化层高度不得超过培养基深度的1/5 。5 、否则,须经100℃水浴加热至粉红色消失( 不得超过  20  分钟 ),迅速冷却 ,只限加热一次,并应防止被污染。

小鼠 HGF ELISA检测试剂盒检测范围

小鼠 HGF ELISA检测试剂盒检测范围

作者:德尔塔 日期:2022-04-02

小鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒英文名称:Mouse HGF ELISA Kit实验类型:夹心法检测范围:25 pg/mL – 800 pg/mLzui低检测限:1.0 pg/mL应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途)试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠肝细胞生长因子(HGF)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠肝细胞生长因子(HGF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。