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转基因检测试纸-复合形状
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
两种转基因棉花欧盟批准了陶氏益农公司的3006-210-23 x 281-24-236 x MON88913 三个性状叠加的转基因棉花和拜耳公司的GHB119转基因棉花，3006-210-23 x 281-24-236 x MON88913 棉花可以同时抗草胺膦和草甘膦类除草剂还可以抗鳞翅目昆虫，GHB119转基因棉花可以抗草胺膦类除草剂以及抗鳞翅目昆虫。我国批准了GHB119转基因棉花，尚没有批准三个性状叠加的转基因棉花抗2，4-D除草剂的转基因玉米陶氏益农公司生产的一款抗除草剂转基因玉米DAS-40278-9，特异性的耐受2，4-D除草剂。转基因作物配套使用的除草剂除了草胺膦和草甘膦等之外，又多了一种选择。除了欧盟，美国、澳大利亚、巴西、加拿大、哥伦比亚、新西兰、韩国等也批准了这种转基因玉米。我国在2017年6月批准了该转基因玉米。五种性状叠加的转基因玉米2017年7月4日，欧盟批准先正达公司的复合转基因玉米Bt11 × 59122 × MIR604 × 1507 × GA21上市，该玉米聚合了Bt11, 59122, MIR604, 1507和 GA21共5种玉米的性状，同时具有抗草胺膦、抗草甘膦、抗鞘翅目昆虫、抗鳞翅目昆虫等多种功能。我国只批准了两种性状复合的转基因作物。从中国农业生物技术学会的文章得知这些数据，目前转基因植物趋向复合形状发展，Artron从2002年开始致力于转基因检测技术，需求转基因检测试纸的客户可咨询Artron，Artron竭力为您提供产品及技术服务。
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菌株驯化培养筛选结果
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1.亮发光杆菌株筛选结果经过 7 个月的驯化培养，pH 3.0 和 pH 2.5 的酸性固体培养基上经涂布有菌落生长，pH 2.0 的固体培养基上没有观察到菌落；乳酸浓度为 6%和 8% 固体培养基上有菌落生长，浓度为 10%乳酸的平板上没有生长菌落；琥珀酸浓度为 4%、6%和 8% 的固体培养基上有菌落生长，琥珀酸浓度为 10% 的固体培养基上没有菌落生长。经显微镜观察，初步确定出 6 株耐酸菌株。为了更确定地比较 6 株菌的耐酸性能，将这 6 株菌株分别涂布在 pH 3.0、6% 乳酸和 6%琥珀酸的酸性平板上。编号为 WJ-2 的菌株在这 3 种条件下的菌落数zui多，因此选其作为目的菌株并对其进行下一步研究。2. 菌株鉴定结果耐受低 pH 值、高浓度乳酸和琥珀酸的菌株 WJ-2 在 pH 3.0 的 YEPD 固体培养基上培养 2 d 后形成的菌落呈椭圆形或卵圆形，乳白色，表面隆起，边缘整齐，表面光滑，无光泽，质粒粘稠。经扫描电镜观察，10 000 倍放大倍数电镜结果显示菌体呈现卵圆形或者椭圆形，经测量其长×宽平均为 3.00 μm×1.75 μm；参照酵母菌株 Saccharomyces cerevisiae YSG50 电镜结果平均为长×宽为 4.5 μm× 3.5 μm 。耐受菌株 WJ-2 比 YSG-50 的尺寸小。18S rDNA 鉴定结果分析显示，WJ-2 的 18S rDNA 共 1 450 bp，与 Saccharomyces cerevisiae 的相似度达到 99%以上，使用 MEGA 5 软件，采用 Neighbor-Joining 方法，构建系统发育树，分支左侧的数值为聚类的置信度(%)，该发育树的构建表明耐酸菌株与酿酒酵母 耐酸菌的亮发光杆菌落形态 Figure 2 The morphology of WJ-2 on the acidic plate (Saccharomyces cerevisiae)的亲缘关系zui近，分支置信度 63%，且由于菌株与菌株 Saccharomyces cerevisiae (JQ585703.1)具有zui高的相似性 85%，结合菌落形态观察结果可认为所得菌株为一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。3. 耐酸菌株WJ-2与对照菌株YSG-50生长曲线的比较耐酸菌株 WJ-2 与对照菌株 YSG-50 在 pH 6.0 的培养条件下其生长曲线基本重合，表明两
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抗原elisa试剂盒对细胞免疫的介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
抗原elisa试剂盒对细胞免疫其作用机制包括两个方面：（1）致敏T细胞的直接杀伤作用。当致敏T细胞与带有相应抗原的靶细胞再次接触时，两者发生特异性结合，产生刺激作用，使靶细胞膜通透性发生改变，引起靶细胞内渗透压改变，靶细胞肿胀、溶解以致死亡。致敏T细胞在杀伤靶细胞过程中，本身未受伤害，可重新攻击其他靶细胞。参与这种作用的致敏T细胞，称为杀伤T细胞。（2）通过淋巴因子相互配合、协同杀伤靶细胞。如皮肤反应因子可使血管通透性增高，使吞噬细胞易于从血管内游出；巨噬细胞趋化因子可招引相应的免疫细胞向抗原所在部位集中，以利于对抗原进行吞噬、杀伤、清除等。由于各种淋巴因子的协同作用，扩大了免疫效果，达到清除抗原异物的目的。在抗感染免疫中，细胞免疫主要参与对胞内寄生的病原微生物的免疫应答及对肿瘤细胞的免疫应答，参与迟发型态反应和自身免疫病的形成，参与移植排斥反应及对体液免疫的调节。也可以说，在抗感染免疫中，细胞免疫既是抗感染免疫的主要力量，参与免疫防护；又是导致免疫病理的重要因素。T细胞是细胞免疫的主要细胞。其免疫源一般为:寄生原生动物、真菌、外来的细胞团块(eg:移植器官或被病毒感染的自身细胞)。细胞免疫也有记忆功能。在细胞免疫中蛋白类抗原由抗原提呈细胞(APC)处理成多肽，它与MHC结合并移至APC表面，产生活化TCR信号；而抗原与T淋巴细胞表面的有关受体结合就产生第二膜信号，协同刺激信号。在双信号刺激下，T淋巴细胞才能被激活就是Bretcher-Cohn双信号模式。T淋巴细胞被激活后转化为淋巴母细胞，并迅速增殖、分化，其中一部分在中途停下不再分化，成为记忆细胞；另一些细胞则成为致敏的淋巴细胞，其中Tc有杀伤力，使外源细胞破裂而死亡。TH细胞分泌白介素等细胞因子使Tc、 Mφ以及各种有吞噬能力的白细胞集中于外来细胞周围，抗原elisa试剂盒将外来细胞彻底消灭。在这一反应即将结束时，Ts开始发挥作用，抑制其他淋巴细胞的作用，终止免疫反应。记忆细胞不直
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试剂盒技术发展方向
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒技术的发展主要在于方法学的发展，而方法学的发展依托于试剂生产技术不断进步更新和型标记物的应用。分子生物学正在并zui终肯定会让对整个生命科学有一个全面而彻底的认识，其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的，对以前一些难以检测的生物活性物质的测定，并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。 ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。ELISA试剂盒颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。 ELISA试剂盒我们知道其中ELISA有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物。 完整的牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒包含以下各组分： （1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）； （2）酶标记的抗原或抗体（结合物）； （3）酶的底物； （4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定中）； （5）结合物及标本的稀释液； （6）洗涤液； （7）酶反应终止液。 根皮苷 进口/国产 英文名称 phloridzin 含量： HPLC≥99% 规格: 20mg/支 蜕皮激素 进口/国产 英文名称 Ecdysterone 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 6-姜酚（姜辣素） 进口/国产 英文名称 6-gingerol 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 蒿本内酯 进口/国产 英文名称 Z-Ligustilide 含量： HPLC≥90% 规格: 20mg/支 脱氧野尻霉素(DNJ) 进口/国产 英文名称 1-Deoxynojirimycin 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 剑麻皂苷元 进口/国产 英文名称 sisalagenin 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 柠檬苦素 进口/国产 英文名
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醋杆菌耐酸能力和醋酸生产能力影响机制
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
ATCC菌种初步分析了 Acetobacter pasteurianus CICIM B7003-02 在醋酸发酵过程中的能量代谢状况, 通过强化细胞能量代谢水平以提升菌株高酸发酵的产酸强度。 【方法】探明 A. pasteurianus CICIM B7003-02 在高酸度醋发酵的不同阶段中三羧酸循环底物含量、乙醇呼吸链酶活及能量代谢酶基因的转录水平等代谢特点, 分析用于醋酸发酵的产能代谢途径及其作用。 【结果】发现 A. pasteurianus CICIM B7003-02 在醋酸发酵初期, 主要通过苹果酸/ 琥珀酸回补偶联有氧呼吸途径产能。进入醋酸快速积累阶段, 乙醇呼吸链为主要供能代谢途径。发酵后期苹果酸/琥珀酸回补途径配合乙醇呼吸链供能。基于上述研究, 采取添加琥珀酸和苹果酸强化细胞产能, 促进高酸度醋发酵强度。 【结论】能量供给影响醋杆菌耐酸能力和醋酸生产能力。确定乙醇呼吸链为醋酸发酵的主要供能系统。强化细胞产能手段可达到提高醋酸发酵强度的目的。 高酸度食醋是指总酸含量大于 9% (M/V)的发酵醋。当前, 因菌种、技术、设备等方面限制我国大部分厂家仅能生产总酸含量在 3.5%−6.0% 的发酵醋。与普通醋相比, 高酸度醋具有杀菌力强、保鲜效果好、节约运输费用和降低成本等诸多优点, 市场优势日趋明显。醋酸菌是食醋生产的主要用菌。大量研究证实醋酸菌把乙醇不完全氧化为醋酸是由膜结合乙醇脱氢酶(Adh)、乙醛脱氢酶(Aldh)和泛醌氧化酶共同作用下完成, 乙醇氧化失去的电子在这 3 种酶构成的乙醇呼吸链中传递, zui终与细胞质中的 H+反应生成 H2O。ATCC菌种这种乙醇代谢方式又被称为“乙醇呼吸”。 醋酸菌可能通过这种特殊呼吸方式快速产生能量, 满足发酵过程中的能量需求。食醋发酵中醋酸菌所面临的zui大限制因素是醋酸。高浓度的醋酸很容易通过细胞膜渗透进入细胞质, 对菌体生长及代谢产生不利影响。目前, 醋酸菌耐酸机制还没彻底探明。已报道研究发现了 Acetobacter 和 Gluconoacetobacter 中的一些耐酸分子机制: (1) 乙醇氧化相关的机制, 包括膜结合乙醇脱氢酶(Ad
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大肠杆菌培养基的制备、贮存方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
大肠杆菌培养基的配制培养基可按处方配制，也可使用按处方生产的符合规定的脱水培养基。在制备培养基时，应选择质量符合要求的脱水培养基或单独配方组分进行配制。脱水培养基应附有处方和使用说明，配制时应按使用说明上的要求操作以确保培养基的质量符合要求，不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基。脱水培养基或单独配方组分应在适当的条件下储存，如低温、干燥和避光，所有的容器应密封，尤其是盛放脱水培养基的容器。商品化的成品培养基除了应附有处方和使用说明外，还应注明有效期、贮存条件、适用性检查试验的质控菌和用途。为保证培养基质量的稳定可靠，各脱水培养基或各配方组分应准确称量，并要求有一定的度。配制培养基zui常用的溶剂是纯化水，特殊情况下，可能需要用去离子水和蒸馏水。应记录各称量物的重量和水的使用量。配制培养基所用容器和配套器具应洁净，可用纯化水冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质的残留。对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分装容器一般应预先进行灭菌，以保证培养基的无菌性。脱水型培养基应完全溶解于水中，再行分装与灭菌。配制时若需要加热助溶，应注意不要过度加热，以避免培养基颜色变深。如需要添加其它组分时，加入后应充分混匀。应按照生产商提供或使用者验证的参数进行培养基的灭菌。商品化的成品培养基必须附有所用灭菌方法的资料。培养基灭菌一般采用湿热灭菌技术，特殊培养基可采用薄膜过滤除菌。大肠杆菌培养基若采用不适当的加热和灭菌条件，有可能引起颜色变化、透明度降低、琼脂凝固力或pH的改变。因此，培养基应采用验证的灭菌程序灭菌，培养基灭菌方法和条件，应通过无菌性试验和促生长试验进行验证。此外，对高压灭菌器的蒸汽循环系统也要加以验证，以保证在一定装载方式下的正常热分布。温度缓慢上升的高压灭菌器可能导致培养基的过热，过度灭菌可能会破坏绝大多数的细菌和真菌培养基促生长的质量。灭菌器中培养基的容积和装载方式也将影响加热的速度。因
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肿瘤细胞生物学特性的介绍
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
肿瘤细胞与体内正常细胞相比，不论在体内或在体外，在形态、生长增值、遗传性状等方面都有显著的不同。生长在体内的肿瘤细胞和在体外培养的肿瘤细胞，其差异较小，但也并非完全相同。培养中的肿瘤细胞具以下突出特点： （一）形态和性状 培养中癌细胞无光学显微镜下特异形态，大多数肿瘤细胞镜下观察比二倍体细胞清晰，核膜、核仁轮廓明显，核糖体颗粒丰富。电镜观察癌细胞表面的微绒毛多而细密，微丝走行不如正常细胞规则，可能与肿瘤细胞具有不定向运动和锚着不依赖性有关。 （二）生长增殖 肿瘤细胞在体内具有不受控增殖性，在体外培养中仍如此。正常二倍体细胞在体外培养中不加血清不能增殖，是因血清中含有很细胞增殖生长的因子，而癌细 胞在低血清中（2％～5％）仍能生长。已证明肿瘤细胞有自泌或内泌性产生促增殖因子能力。正常细胞发生转化后，出现能在低血清培养基中生长的现象，已成为 检测细胞恶变的一个指标。癌细胞或培养中发生恶性转化后的单个细胞培养时，形成集落（克隆）的能力比正常细胞强。另外癌细胞增殖数量增多扩展时，接触抑制 消除，细胞能相互重叠向三维空间发展，形成堆积物。 （三）永生性 永生性也称不死性。在体外培养中表现为细胞可无限传代而不凋亡（Apoptosis）。体外培养中的肿瘤细胞系或细胞株都表现有这种性状，体内肿瘤 细胞是否如此尚无直接证明。因恶性肿瘤终将杀死宿主并同归于尽，从而难以证明这一性状的存在。体外肿癌细胞的永生性是否能反证它在体内时同样如此？也尚难 肯定。从近年建立细胞系或株的过程说明，如果永生性是体内肿瘤细胞所固有的，肿瘤细胞应易于培养。事实上，多数肿瘤细胞初代培养时并不那么容易。生长增殖 并不旺盛；经过纯化成单一化瘤细胞后，也大多增殖若干代后，便出现类似二倍体细胞培养中的停滞期。过此阶段后才获得永生性，顺利传代生长下去。从而说明体 外肿瘤细胞的永生性有可能是体外培养后获得的。从一些具有永生性而无恶性性的细胞系，如
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肿瘤细胞培养方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
肿瘤细胞培养成功关键在于：取材、成纤维细胞的排除、选用适宜的培养液和培养底物等几个方面。在具体培养方法方面，肿瘤细胞培养与正常组织细胞培养并无原则差别，初代培养应用组织块和消化培养法均可。 1、取材： 人肿瘤细胞来自外科手术或活检瘤组织。取材部位非常重要，体积较大的肿瘤组织中有退变或坏死区，取材时尽量避免用退变组织，要挑选活力较好的部位。癌性转移淋巴结或胸腹水是好的培养材料。取材后宜尽快进行培养，如因故不能立即培养，可贮存于4℃中，但不宜栽过24小时。 2、培养基： 肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格，一般常用的 RPMIl640、 DMEM、Mc-Coy等培养基等皆可用于肿瘤细胞培养。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低，正常细胞培养不加血清不能生长，肿瘤细胞在低血清培养基 中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大，是因肿瘤细胞有自泌（Autocrine）性产生促生长物质之故。但这并不说明肿瘤细胞完全不需要这些成分。 按不同细胞需要不同的生长因子；肿瘤细胞与正常细胞之间、肿瘤细胞与肿瘤细胞之间对生长因子的需求都存在着差异。但大多数肿瘤细胞培养中仍需要生长因子。 有的还需特异性生长因子〔如乳腺癌细胞等）。总之培养肿瘤细胞仍需加血清和相关生长因子培养更易成功。 升麻素 进口/国产 英文名称 cimifugin 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 类叶升麻苷(麦角甾苷) 进口/国产 英文名称 acteoside 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 异类叶升麻苷(异麦角甾苷) 进口/国产 英文名称 Isoacteoside 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 松果菊苷 进口/国产 英文名称 Echinacoside 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 5-O-甲基维斯阿米醇苷 进口/国产 英文名称 4’-O-glucopyranosyl-5-O- 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 进口/国产 英文名称 methylvisamminol 含量：
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体外培养肿瘤细胞生物学检测
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
一旦培养的肿瘤细胞生长成形态上单一的细胞群体或细胞系（或株）后，不论用于实验研究还是建立细胞系，都需要做一系列的细胞生物学测定，主要的目的在于求得证明： 所培养的细胞系的确来源于原体内具有恶性的细胞，而非正常细胞或其它细胞。均具有瘤种特异性。阐明一般生物学性状。测定项目数量无明确规定，根据需要而定，以下为常做的项目和要点。 【形态观察】主要观察细胞的一般形态，如大体形态、核浆比例、染色质和核仁大小、多少等以及细胞骨架微丝微管的排列状态等。 【细胞生长增殖】检测细胞生长曲线、细胞分裂指数、倍增时间、细胞周期时间。 【细胞核型分析】检测核型特点，染色体数量、标记染色体的有无、带型等。 【凝集试验】检测凝集力。 【软琼脂培养】检测集落形成能力。 【异体动物接种】向异体动物体内（皮下）接种细胞悬液，观察成瘤能力。 【其它】除上述项目外，根据肿瘤细胞需要还可做同位素标记、组织化学成分分析，荧光显微镜观察等。 白杨素 进口/国产 英文名称 Chrysin 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 白杨素-6-C-葡萄糖基-8-C-阿拉伯糖甙 进口/国产 英文名称 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 喜树碱 进口/国产 英文名称 Camptothecine 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 续随二萜醇 进口/国产 英文名称 Euhorbiasteroid 含量： HPLC≥98% 规格: 20mg/支 肿瘤细胞
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ELISA试剂盒标本处理需注意的事项
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
进口elisa试剂盒标本处理注意事项： （1）.均质： ①组织样本：肉、肝食品类切细，用绞肉机反复绞碎，混合均匀。 ②水产样本：去除样品的非食用部分，食用部分切细，用均质器均浆；原料表面较脏时,需适当用蒸馏水清洗。 ③蛋类：鲜蛋去壳，蛋黄和蛋白充分混匀。 ④水果、蔬菜类：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水分，取食用部分。 （2）.振荡提取： 将提取溶剂加入到装有样品的具塞容器中，振荡，使提取溶剂与容器内的样品充分接触以深入到样本组织内部，提取待测组分。 ①振荡方式：振荡器上进行上下、往返式振荡、手摇式上下振荡。 ②在组织样本中加入有机溶剂之间提取时，应边加边振荡，防止组织凝结成团，不利于提取。 （3）.乳化现象： 在用有机溶剂提取过程中，如果出现乳化现象，解决的方法有： ①用细头轻轻的搅拌，破坏乳化后，再重复离心。 ②再加入适量的提取剂，重新振荡。注意离心后要保证样本的稀释倍数不变。 （4）.浓缩： 由于净化过程中引入的溶剂，可能会降低待测组分的浓度或者不适宜直接分析，需要去除全部有机溶剂。即试剂盒前处理步骤中把样本在60℃氮气下吹干，再用复溶液溶解干燥残留物。 浓缩方式：氮气吹干除杂、压缩空气吹干除杂。 elisa试剂盒标本请注意： ①在吹干样本之前，用甲醇清洗针头，防止杂质干扰。 ②在吹样本时，针头应在液面上空，避免与样本接触，防止产生交叉污染。 ③样本吹干后应立即取下，避免吹的时间过长，影响zui终检测结果。 ④不同的药物，吹干后样本的保质期不同，提倡待样本回到室温后立即复溶。 （5）.净化： 进口elisa试剂盒经过提取的待测组分中通常含有一些会干扰试剂盒中抗原抗体反应的杂质或者是含有与待测物结构相似的杂质。将待测组分与杂质分离的过程，我们称为试剂盒中样本的净化。在我们现有的试剂盒前处理方法中涉及到的zui常见的净化是：液液分配法。
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脾脏组织单细胞悬液的制备方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
A．全过程及所需试剂要求无菌环境。 B．若采用酶消化法制备单细胞悬液，请用户根据各实验室要求另购不同类型胶原酶。 1. 剪碎法：将组织块放入平皿后，加入少量F液及20%胎牛血清；用眼科剪将组织剪至匀浆状，加入5mlF液及20%胎牛血清；用吸管吸取组织匀浆，用100目不锈钢滤网(另购)过滤到试管内；离心沉淀1500转/分×3 min，再用细胞洗涤液清洗3次，每次以500rpm短时低速离心除去细胞碎片，以200目不锈钢滤网（另购）过滤去细胞团块。作细胞计数并调整细胞浓度为（2～5）×107个/ml。常温下放置, 待测细胞的活力。分离前用20%胎牛血清或全血及组织稀释液悬起细胞浓度为2×108-1×109个/ml的单细胞悬液备用。 2. 匀浆器法：用眼科剪将组织剪成小块；放入70ml组织研磨器内，加入2mlF液及20%胎牛血清；缓慢转动研棒，研磨至匀浆；用5mlF液及20%胎牛血清冲洗研器；收集细胞悬液，经200目不锈钢滤网（另购）过滤；离心沉淀800rpm×2min ，再用细胞洗涤液洗3次，离心沉淀。作细胞计数并调整细胞浓度为（2～5）×107个/ml。常温下放置, 待测细胞的活力。分离前用20%胎牛血清或全血及组织稀释液悬起细胞浓度为2×108-1×109个/ml的单细胞悬液备用。 3. 酶消化法： A．用F液将胶原酶稀释，终浓度为400 U/ml，至于冰浴备用。 B．取一适当大小培养皿进行操作：用镊子夹碎动物脾脏，加入稀释后的胶原酶，37℃消化20分钟。 C．以100或200目不锈钢滤网（另购）过滤，离心沉淀800prm×2min ，再用细胞洗涤液洗3次，离心沉淀。作细胞计数并调整细胞浓度为（2～5×107个/ml。常温下放置, 待测细胞的活力。分离前用20%胎牛血清或全血及组织稀释液悬起细胞浓度为2×108-1×109个/ml的单细胞悬液备用。 细胞计数方法: 细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板（血球计数板）进行。既可用于分离（散）细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象
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细菌转化实验
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
1．以pGLO质粒转化大肠杆菌为例，学习转化的基本原理及方法。 2．验证DNA是遗传物质，加深对中心法则的理解。 二．实验原理 转化（transformation）是指一段同源或异源的DNA转入受体细胞并得到表达的水平基因的转移过程，是现代分子生物学研究和基因工程不可缺少的重要技术。目前常用的转化方法有CaCl2法(化学转化法)和电转化法。本实验是用pGLO细菌转化试剂盒中提供的pGLO质粒来转化大肠杆菌，所用方法为CaCl2转化法。 pGLO质粒： 接种环、移液器等 四．实验步骤 1. 准备平板： 每组：1块LB平板，2块LB/amp平板，1块LB/amp/ara平板 2. 准备感受态细胞：用250µl无菌水或转化液悬浮试剂盒中提供的大肠杆菌菌粉，此即感受态细胞。 3. 活化受体细胞：挑取1环E.coli K12 HB101菌液，于LB培养基上37℃活化16-24h。 4. 转化： 1）在两只无菌离心管上分别标 记+DNA, -DNA。 2）在上述两管中分别加入 250µl转化液。 3) 迅速置于冰上。 4）各挑取活化好的受体菌的一 个单菌落，悬浮于两管转化液中。 5）在标有+DNA的管中加入一 环质粒DNA，而标有-DNA的管中不加。 6）将上述两管于冰上放置10min。 7）在准备好的培养基底部如左图。
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培养基神经胶质细胞培养方法
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
神经细胞（神经元〕不易培养基，只有在适宜情况下，如接种在胶原底层上，或加入神经生长因子和胶质细胞因子时，可出现一定程度的分化，长出突起等现象，但很难使之增值。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。培养方法如下：1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后，仔细剥除脑膜、血管和纤维成分，置Hanks液中漂洗一、二次。2、置于30—50倍体积的Hanks液中，此时脑组织比较柔软，反复吹打即制成细胞悬液。3、把悬液注入离心管室温中直立5—10分钟后，细胞或细胞团快自然下沉，脂肪等杂物易漂浮，可吸除上层、反复二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎块并获较多细胞成分。4、在沉降物中加入适量培养液，通过纱网成纱布过滤，计数并调整细胞密度。5、接入培养基瓶或皿中，置5%CO2温箱中培养。 该细胞适应环境过程较长，培养基接种后贴壁较慢。贴壁后短期内也可能不见细胞分裂现象，然而一旦生长后即能迅速进入旺盛的增殖状态。细胞传代可以0.25%胰酶消化处理。
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实验室常用几款胎牛血清的比较
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
一、特级类胎牛血清（于干细胞的胎牛血清） 1、Hyclone 北美特级胎牛血清（SH30070.03）目前，性能的血清，实验室反馈不错的，那就是HycloneSH30070.03的特级胎牛血清， Hyclone的“头牌”。 这款血清--Hyclone特级胎牛血清(Defined FBS)，是世界上*经过40纳米过滤的*胎牛血清，的促细胞生长作用及产品稳定性。内毒素含量小于10EU/ml，血红蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以广泛用于各种细胞培养，包含任何干细胞系的培养。 2、Gibco北美特级胎牛血清（16000-044） invitrogen公司在美国原装生产的特级胎牛血清，是100nm过滤3次，内毒素和血红蛋白含量都可以与Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培养大部分的干细胞系。 二、优等类胎牛血清 1、Hyclone加拿大优等胎牛血清（SH30396） 的是Hyclone加拿大优等胎牛血清(Characterizend FBS)，血清采自加拿大，由Hyclone公司总部的员工采集加工，采集方法，加工过程，检定标准与美国原产优等胎牛血清完全一致，市场*美国原产的。经过3次100nm过滤，内毒素含量小于25EU/ml，血红蛋白含量小于25mg/dl。此血清，在2005年以前，是很多实验室选择血清的，价格适中，质量过硬，应用细胞非常广泛。 2、Hyclone澳大利亚优等胎牛血清（SH30084）基本与加拿大的优等血清是一样的，级别也非常相似，各种级别都有。 3、Gibco澳大利亚胎牛血清（10099-141）与Hyclone澳大利亚胎牛血清差不多，市场价也是3200元/500ml左右。这一级别的血清，也能用于干细胞培养，可是，不象特级胎牛血清那么。 三、普通进口胎牛血清 Hyclone南美胎牛血清（SV30087） 目前市场上用的zui多的Hyclone血清是南美胎牛血清(FBS) SV30087 ，此血清采自南美，在国内(兰州)过滤并测试检验，经三次100纳米过滤，根据中国商标法的规定标贴中文标签，内毒素含量小于等于10EU/ml,血红蛋白含量小于等于20mg/d。此血清广泛用于各种肿瘤细胞的培养，还没有资料记载能够用于干细胞，也听说有少数
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ELISA试剂盒试验时需知道的常识
作者：德尔塔 日期：2022-04-02
ELISA试剂盒采用了的内部供应链信息处理渠道，确保客户订单的、处理，重视客户体会及满意度，并在技术革新和质量上更胜*，我司比的就是质量，拼的就是服务，货源充足，品牌多，价格好，欢迎选购！ 分解ELISA试剂盒的七个组成部分 A、酶标记的抗原或抗体(结合物)。 B、结合物及标本的稀释液。 C、已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)。 D、酶的底物。 E、洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水。 F、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中)，参考标准品和控制血清(定量测定中)。 G、酶反应终止液，常用的HRP反应终止液为硫酸，其浓度按加量及比色液的zui终体积而异，在板式ELISA中一般采用2mol/L。 ELISA试剂盒试验时需知道的常识： 1、采购后，请必须检查标签上的留意事项。 2、做好防止倒置，摔坏的办法和办理体制。 3、有必要戴好防护用具，小心谨慎进行操作。 4、在运用前再次承认标签上的留意事项，做好必要的安全对策。 5、对没有标明其风险特性的ELISA试剂盒也要慎重地进行操作。 6、通常采购试剂盒时要想到一次性用完，若预算有剩余的话，要愈加留意其保管和办理。 7、关于运用后的废弃物，应依照有关法律法规合理处理。 8、万一操作者并非专业技术人员，有必要在专业人士的指导监督下进行操作。 ELISA试剂盒把满足客户的需求作为自己的工作宗旨，逐渐建立一支业务精炼、服务周到的客服队伍，运用各种方式来满足客户的需求，争取做到出售的不再是简单的，而是服务，我司提示，使用时应注意相关安全性问题，操作时有必要戴手套，穿作业衣，严厉健全和履行消毒阻隔准则，我司相关试剂盒。
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