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非接触式分液技术
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
非接触式分液技术 探讨生物传感器表面基材和试剂间的相互作用对移液结果的影响 在生物传感器表面涂上生物活性基质较为常见。但如低至微升或次微升量，则难度会有增加。如需要在一个特定形状的传感器上均匀分配基质而又不能超出边界，会更加复杂。总之，这并不是件容易的工作！ 非接触式小容量分配的最大优点之一就是分液针不与基板相接触，这样分配质量不受基板的影响。随着非接触式分配应用于更多非标准用途（如医学诊断），且既定应用（如基因组学）开始采用非标准材料作为基板，需要更多地考虑基材对分液形态的影响作用。 对于从非接触式移液器（不与基板相接触）中分配出的液滴来说，有很多材料属性都对其具有潜在的影响作用。最显著的例子是：基板的疏水性/亲水性，导电性及弹性。在医疗设备或生物传感器的生产中，经常使用一些特殊的基板。这需要将试剂放置于基板的一个特定位置。很多时候要求液滴之间间隔很小。不过，需要滴液布满一个基板的指定区域而打破球形状态也很普遍。 不管哪种方式，都必须格外注意表面特性对试剂分配的影响作用。传统“touch off”或“near touch off”移液器受基板状况影响很大；非接触式移液器虽不再需要接触基板，但仍存在基板/试剂的相互作用，且要遵循物理定律！ 疏水性/亲水性 水基材料会吸附亲水表面物质，而排斥疏水表面物质。对于非接触式分液来说，则体现在所得到的滴液的圆度上，这可通过测量其接触角（滴液与表面相接触的所成角）来量化。对于疏水性极高的表面，接触角会接近90度。而对于亲水表面，接触角会接近0度，滴液会有效地扩散在目标面上。 按照下图所示（图1），您可看到一颗被分配于一个较为洁净的玻璃面上的液滴。所得到的液滴既不扩展也不呈现显著的90度角。用浓盐酸对表面腐蚀一个晚上，可使表面变得更亲水。所得到的液滴会相当扁平（见图2）并扩散于更大的表面面积。相反，用疏水溶液（本例中为Rain-X™）处理表面，可形成非常好的
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智能真空泵的含义及其优越性！
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
什么是“智能真空泵” 所谓“智能真空泵”，顾名思义就是智能化、自动化的真空泵。一般特指集成了传感器、真空表、单片机等监控系统的微型真空泵|小型真空泵|微型气泵，能对真空泵关键参数如“真空度(负压)”、“流量”等进行实时、自动调整，从而完成一般要构建一个较复杂系统，才能完成的如“真空保压”、“自动定时停机、启动”、定时定量“真空抽滤”等的多种功能。 跟大型真空泵动辄几十、几百公斤的重量和庞大的体积相比，智能真空泵重量、体积都要小得多，甚至可以说是便携式；因而常常也被叫做“智能真空仪”、“台式真空泵”、“自动真空泵”、“便携式真空泵”。 【特点】 (1)可以调节实际工作中需要的真空度，可设定并通过集成的数字液晶面板，“实时”显示出当时的真空度(负压)值； (2)流量可以进行大小调节； (3)配备高灵敏度的进口传感器，优质流量调节阀门及精密控制电路，来完成“自动调节”功能，大大节省了开发人员的时间、精力； (4)内置低干扰、长寿命微型真空泵；配合微型气泵专用消音系统及独立减震系统，确保智能真空泵能长时间、低噪音、可靠的工作； (5)核心部件为一台微型真空泵，所以继承了微型真空泵无油无污染，可以连续24小时运转的优点，属于名副其实的干式真空泵，所以无需维护，不用加润滑油和真空泵油；智能真空泵背面 (6)交流220V供电，即插即用 【详细介绍及实例】 这种智能真空泵是通过独特的三种工作模式：区间、定时、极限，来达到自动调节真空度和流量目的的： 1.区间工作模式 可设定所需真空度的上限和下限两个数值，当泵工作达到真空度上限值时就会自动停机，当真空度跌落至下限值时泵就自动启动。 应用范围：对密闭容器进行真空保压等 实例：假如用型智能真空泵(它的最大负压-80kPa)，来对一个密闭容器进行“真空保压”，使之内部负压始终维持在-60kPa左右，则可设定上限为-55kPa，下限为-65kPa，期间容器内负压到达上限，
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HPLC设备的螺母、套圈系统
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
事实上，在分析仪器世界里，我们通常所说的“配件“是指一个由螺母和套圈组成的系统。 最终选择在您的系统中使用哪个螺母和哪个套圈将由一系列的参数决定: 1.接收口的螺纹 2.接收口的几何形状 3.所使用的管道尺寸和类型 4.端端口的制造材料 5.预期的压力值 ……以及一些其它参数.根据所有这些因素.让我们看看是否可以更清楚地表述配件。 螺母 配件系统的两个主要组成部分之一叫做螺母。螺母是用来提供驱动力使套圈密封。 螺母通常由头部和螺纹部分组成螺母头部具有几种几何形状(例如滚花形、六角形和方形)在紧固过程中起到辅助作。用螺纹部分使螺母与接收端口良好的匹配。让我们进一步对每个部分进行详细讨论。来帮助您辨别使用何种产品.以及还有哪些其他产品可选 螺纹 绝大多数螺母具有“外螺纹”就是说螺纹在螺母的外部。然而有些螺母却具有“内螺纹”也就是螺纹位于螺母的内部一通常叫做“盖形螺母”或“内螺纹螺母”。 由于绝大多数的螺母具有外螺纹让我们集中考虑这种螺母的几何形状。通常用两个主要数据来描述配件上的螺纹。第一个数据告诉我们螺纹的直径。第二个数据描述螺纹之间的距离。即螺距。以下是一个简单的示例: 在低压流体输送中应用最广的一种螺纹是1/4-28。注意这里用连字符分开的两个数据。现在，让我们应用以上说明，看看是否能确定一些有关这类螺纹的基本信息。 螺纹编号的第一个数据是“1/4”。由于我们知道这个数据代表的是螺纹直径我们有了第一个线索。在这种情况下编号的测量单位是英寸因此这就表示螺纹的直径是四分之一英寸。螺纹的直径是从螺纹的一个顶部，穿过整个螺纹向另一相反端的顶部进行测量的。换言之我们在寻求螺纹的最大直径在螺纹标注中的另外一个数据并不那样明显。您觉得它表示什么呢？记住，这个数据表示螺纹之间到底有多近。 想到了，好吧，如果您认为那表示在配件上共有28条螺纹您已经相当不错啦!但不幸的是，那不是正确答案。在这种
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等密度离心法去除红细胞和死细胞
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
等密度离心法去除红细胞和死细胞 器材和试剂： 所有直接接触细胞的用品和试剂必须无菌。 1. 标注体积刻度的试管（圆锥形底）； 2. 巴斯德吸管（短型和长型）； 3. 10ml刻度吸管和洗耳球或移液装置； 4. 台式离心机； 5. 淋巴细胞分离液或类似试剂； 6. 培养基； 实验方法： 1. 重悬细胞使之达到5×106—107个/ml的高浓度。在一个离心管中加入10ml淋巴细胞分离液，用巴斯德吸管或10ml移液管小心将5ml的原代细胞悬液加于淋巴细胞分离液面上。将容器倾斜一个角度，沿容器壁慢慢地将细胞悬液滴下，而不是直接滴到淋巴细胞分离液表面。目的是在两种液体之间得到一个清晰的界面，以便更好地分离； 2. 不制动1000r/min离心试管20min（注：离心时缓慢地减速可使淋巴细胞分离液与培养基之间形成清晰的界面）； 3. 从离心机中小心地取出容器，观察两液面之间的界面，可见一乳状黄色细胞带。红细胞和死细胞形成沉淀沉于容器底部； 4. 用一个巴斯德吸管吸出界面可见的细胞层，转入一个离心管； 5. 向收集的细胞中加入新鲜培养基并混匀。1000r/min离心5min，重复两次，洗去细胞表面的淋巴细胞分离液； 6. 将细胞重悬于已知体积的培养基中，进行细胞计数和活力测定；
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急速裂解法去除红细胞
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
急速裂解法去除红细胞 器材和试剂： 所有直接接触细胞的用品和试剂必须无菌。 1. 标注体积刻度的试管（圆锥形底）； 2. 巴斯德吸管（短型和长型）； 3. 台式离心机； 4. 培养级纯净水； 5. 2×Hanks平衡盐溶液； 6. 储存培养基，含10%血清； 实验方法： 1. 1000r/min离心原代细胞悬液5min，弃上清； 2. 向细胞沉淀中加入10ml培养级水，并用移液管轻轻来回吹打数次以重悬细胞（注：不同细胞的抗低张能力不同，控制暴露时间低于15s）； 3. 迅速加入等体积的2×Hanks平衡盐溶液恢复张力，用巴斯德吸管轻轻混匀细胞悬液； 4. 再次1000r/min离心5min，检查红细胞沉淀。如果红细胞仍大量存在，重复该步骤。否则在储存培养基中重悬洗涤过的细胞； 5. 计数及检测细胞活力后，放培养箱培养；
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高性能液体色谱系统介绍
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
什么是HPLC? 我们所有关于配件的讨论.看起来似乎只适用于HPLC系统一使用我们所讨论的配件进行的主要液体传输应用。 HPLC是高性能液体色谱系统(High Performance LiquidChromatography)的首字母缩写。(很多人以为“P”是表示“压力”，因为很多HPLC应用中的压力确实很高。但是“p”其实是表示“性能”。 HPLC在1960年开始使用。这项技术使得分析师可以把由已知和未知成分组成的样品分解为组成部分的级别，然后定量分析样品中的每个组成部分。并且由干这项技术没有破坏性，HPLC成为实验室应用中用途极为广泛的仪器之一。科学家们在使用HPLC系统分析过样品后，还可以继续对样品进行其它测试。 通过将样品放入作为流动相的液体化学蒸汽中实现分离。这液体化学蒸汽将样品带入特制的管道中，这个特制管道(管柱)填充有作为固定相的微型化学活性颗粒。在管柱内部，样品与流动相和固定相均发生相互作用，并开始化学分离为它的组成部分。系统中的其它设备生成并记录那些分离的样品组成部分的分析数据。然后那些数据被记录在一个被称为色谱的图表上。 HPLC系统由何组成? 在我们进一步展开讨论之前必须首先了解标准HPLC系统的组成部分。 一个HPLC系统包括七个基本组成部分，每部分都具有重要的功能： 溶剂容器--溶剂容器用来装流向系统的化学溶液。因为这种溶液流经整个分析过程我们称之为流动相。 泵--泵将流动相从储存池中抽出，并推动其流向系统其他部分。目前最常用的泵是双活塞泵--可以在高压状态下保持稳定的流速。 喷射阀--喷射阀将样品引入流动相。最常用的喷射阀是一种六端口、双位置阀。这种类型的阀可以控制一定数量的样品重复性地引入流动相通道，却基本上不影响系统的其它部分。 典型喷射阀管件 管柱--通常被称为日PLC系统的“心脏”，将管柱看成一种化学“过滤器”。如上文提到的那样，管柱是具有特定长度和内径并且通常充满小颗粒的管道。这些颗粒通常有一层化学物质涂层，这种化学物
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灭菌过程致死率的确定方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
灭菌过程致死率的确定方法——生物指示物/生物负载方法 A.1 总则 本方法结合了生物指示物对给定周期的抗力和生物负载与抗力方面的知识以建立周期参数（作用时间）。使用本方法要求证明产品的生物负载水平在一定期限内保持相对稳定以及生物负载的抗力小于等于生物指示物的抗力。通过逐步增加作用时间和确定周期的灭活率证明生物指示物的抗力。这一比率和生物负载的菌数及相对抗力方面的知识可用于确定灭菌时间，从而可以预测SAL。 本方法的指南见ISO14161。 A.2 程序 A.2.1 确定产品中最难达到无菌的位置。 A.2.2 将生物指示物放置于产品中最难达到灭菌条件的位置，为灭菌过程创建监测，包括已知的微生物数量和已知的对EO的抗力。如果监测的位置不是最难灭菌的位置，应确定其与最难灭菌位置之间的关系。 使用经证明对灭菌过程的抗力比产品对灭菌过程的抗力大的PCD可满足本要求。需注意包装和从PCD中移除灭菌剂的影响。 A.2.3 使用与常规产品相同的包装方式对上述PCD进行包装，并放置于被灭菌物品中。 A.2.4 选择比常规条件具有较小致死性的条件将被灭菌物品暴露于EO中（见第8条），使基准微生物不会被全部灭活。 A.2.5 在EO作用时间递增而其他参数保持不变之后，使用以下方法之一确定过程的致死性： a） 直接列举（见A.3.1）或 b） 部分阴性法（见A.3.2或A.3.3）或 c） a）和b）的组合方法。 注：部分阴性法采用在部分气体作用时间后PCD复活检测中有无细菌生长的方法。根据这一结果，可计算出基准微生物的灭活率。 A.2.6 根据产品生物负载方面的知识（见ISO11737-1），生物负载对灭菌过程的抗力和基准微生物的灭活率决定了达到规定SAL所需的处理范围。 A.3 确定过程致死性 A.3.1 直接列举 A.3.1.1 采用直接列举存活微生物创建存活曲线的方法确定灭菌周期的致死性。 A.3.1.2 ISO14161和ISO11138-1：2006 C.3给出了本方法的细节。 ISO11138-1：2006 C.3要求至少有五次作用覆盖以下方面： a） 一次作用，样品没有暴露于灭
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灭菌过程致死率保守性确定方法——过度杀灭法
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
灭菌过程致死率保守性确定方法——过度杀灭法 B.1 总则 B.1.1 本过程定义方法的基础是基准微生物的灭活，本方法已得到广泛使用。采用本方法鉴定的灭菌过程通常具有保守性，所用的处理水平可能超过了达到无菌要求所需的处理水平。 本方法的指南见ISO14161。 B.1.2 保守性过程定义需采用以下方法a）或b）之一： a） 半周期法：应进行总共三次连续的试验，结果为灭活全部的生物指示物（菌落数不少于106），以确认最小作用时间。规定的作用时间应至少为此最小时间的两倍。同时应运行有存活微生物的短时间周期，以证明存活技术的适宜性。 b） 周期计算法：使用A.3描述的方法之一，确定生物指示物孢子对数降低值至少为12SLR的常规处理参数。根据所用的方法确定周期的次数。 B.1.3 确认中用于生物指示物复活的条件，包括培养时间，应予以确定并形成文件。培养时间应考虑经暴露于EO的芽孢延迟生长的可能性。 B.2 程序 B.2.1 判定最差产品或PCD，其灭菌困难程度至少与用于灭菌过程的最困难物品相等。 B.2.2 确定产品中最难达到灭菌条件的位置。 B.2.3通过以下方法之一创建灭菌过程监测，包括已知的微生物数量和已知的对EO的抗力： a） 将生物指示物放置于产品中最难达到灭菌条件的位置，或放置于PCD中，或 b） 将适当的基准微生物接种于产品中最难达到灭菌条件的位置。 见ISO14937：2000表A.1。 如果监测位置不是最难灭菌的位置，应确定其与最难灭菌位置的关系。 B.2.4使用与常规产品等效的包装方式对上述PCD进行包装，并放置于被灭菌物品中。 B.2.5使用比规定灭菌过程的致死性较小的条件将被灭菌物品暴露于EO中。 B.2.6 如果已知微生物数量的灭活已根据A.3进行确认，推断已知的微生物存活预期可能性，并考虑所需的SAL，确定灭菌过程处理的范围。
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细胞计数和活力测定实验方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
细胞计数和活力测定 器材和试剂： 1. 倒置相差显微镜，具有10×物镜； 2. 标注体积刻度的试管（圆锥形底）； 3. 改良的Neubauer血细胞计数器； 4. 计数器盖玻片； 5. 袖珍管或等体积的塑料容器，如试管或离心管； 6. 巴斯德吸管（短型和长型）； 7. 可调体积的微量加样器（100—250μl）； 8. 无菌枪尖； 9. 无菌刻度吸管（1—10ml）、洗耳球或自动移液装置； 10. 10g/L台盼蓝； 11. Hanks平衡盐溶液或储存培养基； 实验方法： 1. 准备计数器。轻轻地湿润中央网络区域的各个边，用两个拇指的压力使盖玻片水平地从边缘滑动。当在中央标记区临近的任何一边能看见牛顿环（彩虹色）时，盖玻片位置正确； 2. 1000r/min离心细胞悬液5min，弃上清。将细胞重悬于已知体积的培养基中； 3. 用巴斯德吸管来回吹打细胞悬液几次，混匀，确定细胞均匀分散； 4. 用微量加样器吸取250μl混匀的细胞悬液，转入袖珍管。用一个干净的加样器尖吸取等体积台盼蓝溶液加入细胞悬液中。用拇指和食指快速轻弹袖珍管几次使之混匀。立即用一个巴斯德吸管尖吸取一滴细胞悬液，轻轻地将其滴在临近计数区的盖玻片边缘上。毛细作用使细胞悬液移到盖玻片下面，填满中央和边缘沟之间的区域。在盖玻片的另一边重复该操作； 5. 将计数器放于显微镜载物台上，移动载物台直到将三条平行线界定的25个小方格的网格位于中央为止。计25个小方格内的总细胞数（染色和未染色的）（它们每一个又再分为16个更小的方格便于计数）。为了避免将同一个细胞重复计数，只数三线隔开的压上线、左手线和中央区的细胞。如果细胞数大可用一个计数器； 6. 数完总细胞数时，在相同区域重复计数，只数蓝染（死）的细胞。计算死细胞的平均数，从总细胞数中扣除死细胞数得到活细胞数； 7. 应用以下公式计算细胞群的存活率： 存活率=活细胞数/（活细胞数+死细胞数）×100% 8. 细胞悬液的细胞浓度按照一下方法计算： 1个大格（25个小格）的平均细胞数×104=细胞数/ml 9. 细胞悬液总细胞数=细
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密度阻滞法纯化人外周血单核细胞
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
密度阻滞法纯化人外周血单核细胞 试剂和器材： 1. 抗凝血剂：100mmol/L 乙二胺四乙酸或38g/L柠檬酸钠； 2. Hepes缓冲生理盐水（HBS）：8.5g/L NaCl、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4； 3. 淋巴细胞分离液（例如LymphoprepTM或NycoPrepTM1.077）或OptiPrepTM，用Hepes缓冲生理盐水稀释（分别加入5倍体积和17倍体积）； 4. 台式低速离心机； 5. 巴斯德吸管（短型和长型）； 6. 5—10ml规格注射器和金属套管针； 实验方法： 1. 用乙二胺四乙酸（2mmol/L终浓度）或柠檬酸钠（38g/L终浓度）作为抗凝剂来收集静脉血； 2. 用等体积的Hepes缓冲生理盐水稀释血液，反复多次轻轻颠倒； 3. 用塑料巴斯德吸管，取6ml稀释过的血液加入到离心管中3ml的选定介质之上； 4. 20℃，以700g离心15min（LymphoprepTM）或700g离心20min（NycoPrepTM1.077或碘克沙醇溶液）； 5. 用缓慢减速程序或不制动的方法使转子减速； 6. 用巴斯德吸管在界面上收集细胞； 7. 用2倍体积的Hepes缓冲生理盐水稀释并且以200g—500g离心15min收集细胞；
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免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
（一） 原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。 胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。 （二） 胶体金的制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1、枸橼酸三钠还原法 （1）10nm胶体金粒的制备：取0.01％HAuCl4水溶液100ml，加入1％枸橼酸三钠水溶液3ml，加热煮沸30min，冷却至4℃，溶液呈红色。 （2）15nm胶体金颗粒的制备：取0.01％HAuCl4水溶液100ml，加入1％枸橼酸三钠水溶液2ml，加热煮沸15min～30min，直至颜色变红。冷却后加入0.1Mol/L K2CO30.5ml，混匀即可。 （3）15nm、18nm～20nm、30nm或50nm胶体金颗粒的制备：取0.01％HAuCl4水溶液100ml，加热煮沸。根据需要迅速加入1％枸橼酸三钠水溶液4ml、2.5ml、1ml或0.75ml，继续煮沸约5min，出现橙红色。这样制成的胶体金颗粒则分别为15nm、18～20nm、30nm和50nm。 2、鞣酸—枸橼酸钠还原法 A液：1％HAuCl4水溶液1ml加入79ml双馏水中混匀。 B液：1％枸橼酸三钠4ml，1％鞣酸0.7ml，0.1Mol/L K2CO3液0.2ml，混合，加入双馏水至20ml。 将A液、B液分别加热至60℃，在电磁搅拌下迅速将B液加入A液中，溶液变蓝，继续加热搅拌至溶液变成亮红色。此法制得的金颗粒的直径为5nm。如需要制备其它直径的金颗粒，则按表15-1所列的数字调整鞣酸及K2CO3的用
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配无刷电机的微型气泵的寿命就长吗？
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
经常有客户想购买配无刷电机的微型气泵，因为他们想提高泵的使用寿命。但问题不是这么简单。微型气泵的寿命不仅仅是由电机决定的，还有其它很多因素制约泵的寿命，比如隔膜的疲劳寿命、单向阀的疲劳寿命等等。就算是无刷电机本身也还有很多问题。微型气泵的负载完全不同于DVD上的电机负载，是均匀稳定的，隔膜式微型气泵的负载是大小、方向都在不断变化的负载，类似于建筑工地上打夯的机器，这种负载对电机的要求很高。我们研究进口微型气泵的电机发现，国外同行用在微型气泵上的无刷电机完全不同于普通风扇或DVD上的无刷电机，电机使用的滚动轴承、磁钢等都不是普通档次的配件。 因此仅仅是把有刷电机换成无刷电机并不一定能提高电机寿命。还要看这种无刷电机是否适应交变载荷？泵头的寿命是否足够长？木桶能装多少水是由最短的那块木片决定的。对此我们要有正确的认识，不要被别人轻易忽悠了。（ZX20110114）
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用碘克沙醇梯度溶液从哺乳动物肝脏中分离细胞核
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
用碘克沙醇梯度溶液从哺乳动物肝脏中分离细胞核 试剂和器材： 1. OptiPrepTM（600g碘克沙醇，ρ=1.32g/ml）； 2. OptiPrepTM稀释剂（OptiPrepTM diluent，OD）：150mmol/L KCl、30mmol/L MgCl2、120mmol/L三甲基甘氨酸-KOH，pH7.8； 3. 匀浆介质（HM）：0.25mol/L蔗糖、25mmol/L KCl、5mmol/L MgCl2、20mmol/L三甲基甘氨酸-KOH，pH7.8；按要求向OptiPrepTM稀释剂和匀浆介质中加入蛋白酶抑制剂 4. 高转矩桥式电动机（半导体开关控制）； 5. Potter-Elvehjem匀浆器，20—40ml，孔隙约0.07mm； 6. 高速离心机，带可容纳15—50ml离心管的吊桶式转子； 7. 注射器，带金属套管针（内径约0.8mm）； 8. 尼龙滤网； 实验方法： 所有操作在0—4℃下进行。 1. 制备500g/L碘克沙醇工作液：每5倍体积OptiPrepTM用1倍体积的OptiPrepTM稀释剂来稀释； 2. 梯度溶液：用匀浆介质（分别为6倍体积+4倍体积和7倍体积+3倍体积）来稀释500g/L碘克沙醇工作液以制备300g/L和350g/L的两种碘克沙醇梯度溶液。保持于冰上。 3. 切除肝脏并用剪刀剪切成微小碎块； 4. 将大约一半肝脏转移到Potter-Elvehjem匀浆器的20ml匀浆介质中，并用研杵研磨约8次，在约500r/min转速下旋转以破碎组织； 5. 对另一半肝脏切碎物重复以上操作； 6. 用尼龙滤网过滤； 7. 通过与等体积的500g/L碘克沙醇工作液混合将匀浆液调整到250g/L碘克沙醇； 8. 将10—15ml匀浆液转移到50ml管中，从300g/L和350g/L的碘克沙醇梯度溶液中各取10ml加到匀浆液之下； 9. 在100000g下离心20min； 10. 细胞核在300g/L和350g/L碘克沙醇界面上成带，用注射器和金属套管针吸取细胞核； 11. 用2倍体积的匀浆介质稀释悬液，在2000g下离心10min沉淀细胞核；
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混合剂技术纯化人外周血单核细胞
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
混合剂技术纯化人外周血单核细胞 试剂和器材： 1. 抗凝血剂：100mmol/L 乙二胺四乙酸或38g/L柠檬酸钠； 2. Hepes缓冲生理盐水（HBS）：8.5g/L NaCl、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4； 3. OptiPrepTM； 4. 台式低速离心机； 5. 巴斯德吸管（短型和长型）； 实验方法： 1. 用乙二胺四乙酸（2mmol/L终浓度）或柠檬酸钠（38g/L终浓度）作为抗凝剂来收集静脉血； 2. 在合适的带帽离心管（可容纳5—10ml样品的15ml管）中，全血与OptiPrepTM（分别为10倍体积和1.25倍体积）轻柔但彻底地混合（反复颠倒几下）； 3. 在顶端加入约0.5ml Hepes缓冲生理盐水，并且在20℃，1500g下离心30min； 4. 用缓慢减速程序或不制动的方法使转子减速； 5. 从凹液面向下吸取外周血单核细胞直至距细胞沉淀约1cm处； 6. 用2倍体积的Hepes缓冲生理盐水稀释收集到的外周血单核细胞，再在250g—500g离心5—10min以沉淀细胞；
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市场常用离心机大分类
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
现在的市场上有很多种离心机，琳琅满目，各有各的作用和优缺点，也各有各的用途以满足现在这个高科技发展社会的需要，但是不管他们再多的品种，再多的分类，他们终究是属于离心机，他们的原理也是基本一样的，即分离原理，其实把洗衣机上的脱水机分类为离心机也是不为过的，它同样利用了离心机原理，只是技术要求和指标比其他的低而已。现在就生活中常用离心机进行归类分析。 三足离心机 优点：最普通离心机，运用广泛，间歇工作，造价低廉成本低，型号品种非常多。 缺点：出料麻烦，耗费人工。 平板离心机 优点：卫生度高，密封性好，符合GMP规范。 缺点：卸料麻烦不能自动化。 吊袋离心机 优点：卸料方便，安全性高，可分离较细颗粒，晶粒无破损。 缺点：造价高，成本高不能实现普遍化。 刮刀离心机 优点：卸料省时，造价中等，是目前较流行的产品系列。 缺点：晶料有破损，不宜处理较细颗粒。 沉降离心机 优点：适合处理具有粘性，极细，比重差较大的物料。 缺点：处理后物料含水率较高，有时须二次处理。 卧螺离心机 优点：全自动离心机，高速状态完成进料，分离，洗涤，脱水等工序。 缺点：只适合分离100目以下颗粒，使用的范围受限。 卧螺沉降离心机 优点：全自动离心机，主要用于污泥脱水行业，处理量极大。 缺点：造价高。 当然上述的都是工业离心机，实验室离心机那和他们就不能这样比了，因为实验所用的离心机专业性强，精度高，对温度、转速、容量等等多方面都有特殊的要求。所以在此不做比较，当然还有很多的离心机原理的仪器也是如此，不管是哪一种都运到了同样的问题那就是要么不能满足所有客户的需要，要么就是造价太高了，让很大一部分用户无法承担，如果随科技的发展把造价降低，综合所以离心机的优点，可以满足所有的用户，而且造价很低，所有用户都可以消费，也许这样的科技才是解决离心机的根本问题所在，也许这样的技术离开我们也不遥远了。 文章来源：
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