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透析袋分子量8000-14000什么意思
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
透析袋的截留分子量8000-14000。透析袋分子量8000-14000它代表的意思是小于8000的分子一定会漏出透析袋,而大于14000的分子一定会保留在透析袋之内,而8000-14000之间的分子可能会漏出也有可能会保留在透析袋内。 透析袋通常是由半透膜制成的袋状容器。在生物大分子的制备过程中,除去盐、少量有机溶剂、生物小分子杂质和浓缩样品时都要用到透析的技术。 一般透析袋标注的分子量都是指截留分子量,至于为什么不是一个值而是一个范围是因为这个是透析袋做测试时,很多测量值形成的一个正态分布的曲线。由于透析袋的孔析是会溶胀的,在不同的溶剂不同尺寸,所以只是参考值。
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简单介绍免疫球蛋白的分类和特点微生物学
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
( 1)、IgG 血清含量最高,半衰期最长; 功能最多:结合抗原、激活补体、调理吞噬并介导ADCC、通过胎盘、结合SPA。 为再次免疫应答的主要抗体:抗感染的主要抗体( 抗菌、抗病毒, 抗毒素抗体),并介导II、III型超敏反应。 (2)、 IgM分子量最大,不能通过血管壁,主要存在于血液和粘膜表面。是血管内抗感染的主要抗体。 在个体发育过程和体液免疫应答中均是最早合成和分泌的抗体。 脐带血IgM增高提示胎儿有宫内感染; 感染过程中血清IgM水平升高,说明有近期感染。 天然的血型抗体和类风湿因子亦属IgM。其激活补体的能力比IgG强。 膜表面IgM是B细胞抗原受体(BCR)的主要成分。只表达mIgM是未成熟B细胞的标志,记忆B细胞表面的mIgM逐渐消失。 (3)、IgA血清型IgA: 以单体形式存在。 分泌型IgA(sIgA): 由J链连接的二聚体和分泌片组成。合成和分泌的部位在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺,主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液中。是参与粘膜局部免疫的主要抗体。婴儿可从母亲初乳中获得分泌型IgA,是一种重要的自然被动免疫。 (4)、 IgD正常人血清IgD浓度很低,平均约0。03mg/ml。半寿期很短(仅3天)。血清IgD的确切功能仍不清楚。 B细胞表面的mIgD可作为B细胞分化发育成熟的标志,未成熟B细胞仅表达mIgM,成熟B细胞可同时表达mIgM和mIg (5)、 IgE 血清浓度极低,约为5×10-5 mg/ml。IgE为亲细胞抗体,与肥大细胞、嗜碱性粒细胞上的高亲和力FcεRI结合,引起I型超敏反应。
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抗体的作用及作用特点
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
特异性结合是抗体的作用的特点,相应的抗原表面均含有抗原表位,也就是抗原决定基,这个表位含有和抗体结合的对应基因位点,当抗原和抗体结合时,就会紧密连接并将抗原吞噬直至崩解或与抗原结合成大分子物质,被免疫系统视为大分子异物排出体内。 机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。 抗体的功能与其结构密切相关。同一抗体的V区和c区的氨基酸组成和顺序的不同,决定了其功能上的差异。不同抗体的V区和C区在结构变化上具有一定的规律,又使得其在功能上存在共性。V区和C区的组成和结构,决定了抗体的生物学功能。 抗体的V区与抗原结合后,借助于c区的作用,在体外可发生各种抗原抗体结合反应,有利于抗原或抗体的检测和功能的判断;在体内可中和毒素、阻断病原体入侵、清除病原微生物;B细胞膜表面的IgM和IgD构成B细胞的抗原识别受体,能辅助B细胞特异性识别抗原分子。 凡能产生抗体的高等动物(包括人类),当注入胸腺依赖性抗原(TD抗原)进行免疫时都有着相同产生抗体的规律,即存在初次免疫应答和再次免疫应答。初次免疫应答是指机体第一次接触某种抗原物质引起特异性抗体产生的过程。 其特点是潜伏期长(一周以上),产生的抗体滴度(效价)低、维持的时间短,产生的抗体以IgM为主;再次免疫应答是指机体以后再次接触同样的抗原后所产生的抗体应答过程。其特点是产生抗体的潜伏期短、抗体滴度高,维持的时问长,产生的抗体以IgG为主。
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变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性有什么区别
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
工作原理不同: 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳或称为活性电泳是在不加入SDS和巯基乙醇等变性剂的条件下,对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据寡核苷酸的大小来分离,因此可将全长产物与不完整的短分子分开。 功能不同: 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷,它们的分离是依据其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用,因而可以得到较高的分辨率。 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的蛋白质或多肽与SDS结合,经热变性和二硫键的还原,形成所带负电荷相对一致的非折叠衍生物,其泳动速度主要由分子量决定。 特点不同: 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中,蛋白质的迁移率不仅和蛋白质的等电点有关,还和蛋白质的分子量以及分子形状有关,其中蛋白质的等电点是最重要的影响因子,要根据蛋白质的等电点来选择对应的电泳缓冲系统。 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳时通常每一泳道至少加1mg合成的寡核苷酸,电泳后在紫外灯下定位寡核苷酸条带,将长度正确的寡核苷酸从凝胶上切下。
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核酸染料的使用方法
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
GelRed 是一种高灵敏、低毒性和超安全的荧光核酸凝胶染色试剂。它可替代溴化乙锭(EB),并且远高于EB的灵敏度,同时不需要脱色。由于GelRed和EB有相同的光谱特性,因此用它替代EB时不需要更换成像系统。GelRed既可用于预制凝胶也可用于电泳后染色。通常电泳后染色的灵敏度更高,并能排除染料对DNA迁移的干扰 。使用 GelRed进行电泳后染色,操作简单,不需要脱色和特殊溶液。只要将染料稀释在 0.1M NaCl 中,并将凝胶置于染色液中, 30 分钟后就可以观察。染色液在室温下极为稳定,可以多次反复使用。相比而言,预制凝胶由于不需要额外染色过程,因此染料用量更少,更为简单经济。
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低密度脂蛋白介绍
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
低密度脂蛋白-胆固醇的化验结果是2.21的确算“过低”。低密度脂蛋白不是越低越好的。研究发现,低密度脂蛋白太低会影响血红蛋白携带氧的能力使细胞缺氧反而会引起贫血或加重心脏负担。低密度脂蛋白降低主要见于甲状腺功能亢进、严重贫血、吸收不良综合征、营养不良、门脉性肝硬化等。我想您可能是营养不足引起的,适当一些高蛋白、高热能的食物,如乳制品和动物蛋白质如蛋、鱼、肉、禽和豆制品及新鲜蔬菜、水果等。 低密度脂蛋白的正常参考值为2.7-3.36,甘油三酯参考值0.56-1.7, 其增高的临床意义主要是与动脉硬化、冠心病密切相关。因此,胆固醇与低密度脂蛋白被称为“减寿蛋白”或“致动脉硬化脂蛋白”。 极低密度脂蛋白(VLDL)的主要功能是运输肝脏中合成的内源性甘油三酯。无论是血液运输到肝细胞的脂肪酸,或是糖代谢转变而形成的脂肪酸,在肝细胞中均可合成甘油王酯。在肝细胞内,甘油H酯与APOB100、胆固醇等结合,形成VLDL并释放入血。在低脂饮食时,肠粘膜也可分泌一些VLDL人血。VLDL人血后的代谢,大部分变成低密度脂蛋白(LDL)。由于VLDL在血中代谢较慢,半衰期为6~12小时,故空腹血中仍有一定含量的VLDL。VLDL由于携带的胆固醇相对较少,且它们的颗粒相对较大,故不易透过动脉内膜。因此,正常的VLDL一般没有致动脉粥样硬化的作用。但是,由于VLDL中甘油三酯占50%~70%,胆固醇占8%~12%,所以一旦VLDL水平明显增高时,血浆中除甘油三酯升高外,胆固醇水平也随之增高。 低密度脂蛋白(LDL)是由极低密度脂蛋白(VLDL)转变而来的。LDL的主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞,但主要是运输到肝脏合成胆酸。每种脂蛋白都携带有一定量的胆固醇,但体内携带胆固醇最多的脂蛋白是LDL。体内三分之二的LDL是通过受体介导途径吸收入肝和肝外组织,经代谢而清除的。而余下的三分之一是通过一条“清扫者”通路而被清除的,在这一非受体通路中,巨噬细胞与LDL结合,吸收LDL中的胆固醇,这样胆固醇就留在细胞内,变成“
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血浆脂蛋白是如何分类的
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
血浆脂蛋白是血脂在血液中转运以及代谢的形式,血浆脂蛋白有五种,分别是乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和中间密度脂蛋白。 在临床上经常测定血脂脂蛋白的浓度,反映人体是否容易发生血栓性疾病,比如经常测定高密度脂蛋白。高密度脂蛋白是一种可以预防冠状动脉粥样硬化的脂蛋白,如果高密度脂蛋白浓度降低,发生冠心病、脑血栓等栓塞性疾病的机会就会增加。 血浆脂蛋白注意事项: 1、乳糜微粒(
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发酵培养基的操作方法和注意事项
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时,则可考虑培养基用分批补料来加以满足。 操作方法和注意事项如下: 1.打开灭菌锅盖,向锅内加水到水位线。立式消毒锅**用已煮开过的水,以便减少水垢在锅内的积存。注意水要加够,防止灭菌过程中干锅。 2.灭菌材料放好后,关闭灭菌器盖,采用对角式均匀拧紧锅盖上的螺旋,使蒸汽锅密闭,勿使漏气。 3.打开排气口(也叫放气阀)。用电炉加热,待水煮沸后,水蒸气和空气一起从排气孔排出,当有大量蒸汽排出时,维持5min,使锅内冷空气完全排净。 4.当锅内冷空气排净时,即可关闭排气阀,压力开始上升。当压力上升至所需压力时,控制电压以维持恒温,并开始计算灭菌时间,待时间达到要求(一般培养基和器皿灭菌控制在121℃,20min)后,停止加热,待压力降至接近“0”时,打开放气阀。注意不能过早过急地排气,否则会由于瓶内压力下降的速度比锅内慢而造成瓶内液体冲出容器之外。
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LA培养基与LB培养基区别
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
成分的不同: LA是LB培养基里加入了氨苄青霉素,所以LA培养基比LB培养基多了一种氨苄青霉素原料。 应用的对象不同: 由于LB多了一种原料,其中氨苄青霉素的浓度根据的质粒是松弛型还是严谨型来加的。 培养基供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。 液体培养基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。 固体培养基:一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。 半固体培养基:在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。 脱水培养基:又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。 选择性培养基:一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能,广泛用于菌种筛选等领域。 鉴别培养基:一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。
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微量分光光度计和传统分光光度计有什么区别
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
传统分光光度计: 1、样品体积要求大,绝大部分要50μL以上 2、需使用比色皿 3、每次换样品时,比色杯需要清洗,工作繁重 4、光程一般为10mm,样品需要稀释,测量浓度范围小 5、灯源一般由氘灯(紫外)和钨灯(可见)组成,寿命短 6、需要预热半个小时以上 7、显示吸光度值,不显示浓度值 8、仪器体积大,质量重 微量分光光度计: 1:所需样品体积小,仅需1~2μL 2:不需要比色皿,用移液枪直接将样品滴加到检测平台上,测量时样品会自动形成液柱 3:只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可 4:具有1mm和0.2mm两个光程(由电磁阀调节),样品无需稀释,测量范围可达到常规分光光度计的50倍 5:氙气闪光灯为灯源,寿命长,性能稳定 6:不需要预热,可随时检测 7:显示吸光度值的同时,程序直接给出浓度值(核酸、蛋白和荧光染料) 8:体积小(21cm×17cm×11cm ),质量轻(1.35kg)
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冻干粉的溶解后保存介绍
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
溶解后放冰箱可以保存可以放3-5天。冻干粉的使用方法: 冻干粉是冷冻干燥天然植物, 冷冻干燥处理可以有效的去除植物原料中的水分并不破坏其养分特性。另外, 它还可以使产品中的自然活性成分稳定地保存下来。 冻干粉是两瓶的,一瓶是液体、一瓶是粉末状,它里面含能修复受损的皮肤,使细胞重获能量,让肌肤保持青春。 先用注射器吸高效营养液注入冻干粉瓶中,摇晃溶解(约5分钟)之后吸回高效营养液瓶中。 洁面后,取适量混合好的精华涂于面部,按摩1~3分钟,直至吸收。 制品经过冻干后水份含量非常低,使制品的稳定性提高,受污染的机会减小,这不仅方便了运输还延长了制品保存期限。 冻干粉是在无菌环境下将药液冷冻成固态,抽真空将水分升华干燥而成的无菌粉注射剂。 冻干粉是采用冷冻干燥机的真空冷冻干燥法预先将药液里面的水分冻结,然后在真空无菌的环境下将药液里面被冻结的水分升华,从而得到冷冻干燥而成。 在低温环境下抽中药液里面的水份,保留其原有的药物作用。 对于干燥热敏性制品和需要保持生物活性的物质, 冻干是一种有效的方法。
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免疫组化为什么要用一抗又要用二抗
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西.一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。 这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。 二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以现在的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物
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抗原检测中样品稀释液的作用
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
样品稀释液中一般添加有无关蛋白,就是不参与免疫应答的蛋白,比如牛血清蛋白,这些蛋白一般可以起到填充包被板空隙,因为抗原/抗体 包被到包被板上都是 非特异性结合上去的,如果直接用样品进行试验,不进行稀释或者用不含有无关蛋白的稀释液稀释,那么样品中的抗原或者抗体就会非特异性的结合到包被板上,这样 ,当你用酶标记的二抗去标记先前抗原时候就会出现假阳性结果。还有一种情况就是,在双抗原夹心检测的试验中,一般 用于检测的游离抗原都是 重组的单克隆抗原,很多时候重组抗原并不能很好的与包被抗体结合,这时候用到的样品稀释液中一般会含有一种解离成分,使重组抗原的表位更加的暴漏,从而出现正常的结果而不会出现假阴性结果。
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PAGE胶的基本详情介绍
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
PAGE是聚丙烯酰胺凝胶电泳的简称。(polyacrylamide gel electrophoresis;PAGE) 采用聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳。凝胶是通过丙烯酰胺单体与交联剂亚甲基双丙烯酰胺在催化剂和加速剂作用下聚合而成的,它具有重复性好、分辨力强、凝胶孔径大小可调节、化学性能稳定、操作简便等优点已广泛应用于蛋白质、核酸等物质的分离分析。普通PAGE根据电荷多少及分子大小,即电荷效应和分子筛效应使样品得到分离。若在凝胶中加入阴离子运河污剂——十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)掩盖其电荷效应,主要以分子筛效应进行分离,用于检则蛋白质分子量,称为SDS-PAGE。若在凝胶中加入两性电解质产生pH梯度,用以测定蛋白质等电点称为聚焦电泳;若使凝胶产生一定的浓度梯度,适用于蛋白质分子量测定,称为梯度凝胶电泳。电泳方式常用单向电泳,亦可使用两种原理不同的电泳如-DS-PAGE和聚焦电泳结合起来进行双向电泳。电泳装置多采用垂直板型,操作简便。
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做PCR的血液标本如何制作
作者:德尔塔 日期:2022-02-18
1.静脉取血2ml,加入含肝素溶液(10~50u/m1血样本)的试管中,混匀,使血液抗 凝。用pH7.2 Hanks液将抗凝血稀释1倍。 2.吸取2ml淋巴细胞分层液置于刻度离心管中,然后将离心管倾斜45O角,用毛细滴管将稀释的全血沿管壁缓慢加至分离液上面,应注意保持两者界面清晰。 3.在18℃~20℃下,用水平离心机以2000r/min离心20min。离心后细胞分布如图。 4.用毛细吸管轻轻插到混浊带,沿管壁轻轻吸出此层细胞,移入另一支离心管中。即要吸取所有单个核细胞,又要避免吸取过多的分层液或血浆,以免混入其他细胞成分。 5.用Hanks液洗涤细胞3次。第一次2000r/min ,10 min;第2~3 次1500r/min ,10 min,可去掉大部分混杂的血小板。 6.将沉淀细胞悬于培养基中备用。