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一文了解小动物活体成像操作流程
发布时间:2021-05-07     作者:zhn   分享到:
一文了解小动物活体成像操作流程

以研究肿瘤靶向信号肽为例,介绍小动物活体成像实验流程。本实验人工给小鼠接种皮下肿瘤,然后制备cy7-信号肽复合体(探针),通过尾静脉注射小鼠,在不同时间点做活体成像分析,观察cy7-信号肽复合体(探针)在体内的特异性分布。
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1.实验动物准备(动物模型建立)
1) SPF级 BALB/C裸鼠,5~8 周龄,18~20克,自由进食、水。饲养1周后接种细胞,分组或混编分笼饲养。12小时光照/日,明暗交替。相对湿度50%±10%、温度23±2℃。
2) 细胞培养瓶中培养CNE-1细胞(实验室根据具体情况),取对数生长期,胰酶常规消化,离心,富集,利用无菌PBS清洗细胞,离心,富集,重复上述过程3次,最后用无菌PBS液调整细胞浓度为l×107个/ml,收集细胞于离心管内。
3) 细胞接种取0.1ml CNE-1细胞悬浮液接种于每只小鼠的双后肢大腿。根部皮下,双后肢皮下注射相同肿瘤细胞数,每处1×106个细胞。
4) 成瘤观察继续饲养,观察细胞接种后的生长状况,大约5-6天后可见瘤块,待约1-2 周后,肿瘤长至约0.5-0.8cm直径,开始做体内多肽靶向实验。
注意:
1)动物分组、阴性对照、阳性对照根据具体实验设置;
2)实验动物接种肿瘤后,注射荧光探针前,可根据实验目的给药或做其他处理。

小编zhn2021.05.07

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