您当前所在位置:首页 > 新品上市 > 实验室耗材 > 荧光标记
革兰氏染液染色的步骤分析
发布时间:2021-01-19     作者:zzj   分享到:

首先介绍一下染色原理:

细菌先经碱性染料结晶紫染色,而后经碘液进行媒染,之后用酒精脱色,在一定条件下有的细菌媒染后的颜色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G-)。为方便进一步观察,脱色后可再用一种红色染料如碱性番红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被重新染上红色。有芽孢的杆菌和大多数的球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌、螺旋体和大多数致病性的无芽孢杆菌都呈现负反应。


细菌细胞通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。

image.png

其次介绍染色步骤:

1.涂片固定。

在干净的载玻片中央滴加一滴蒸馏水,用接种环进行无菌操作,挑取培养物少许,置载玻片的水滴中,与水混合做成菌悬液并涂布成直径约1cm的薄层。为避免因菌数过多聚集成团,不利于观察细菌个体形态,可在载玻片一侧进行上述操作,而在另一侧再加一滴水,从已涂布的菌液中再取一环于此水滴中进行稀释,涂布成薄层。若材料为液体培养物或固体培养物中洗下制备的菌液,则直接涂布于载玻片上即可,如菌液浓度较大,也可使用水滴再进行一次稀释。

涂片需要在室温条件下使其自然干燥,有时为了使之干得更快些,可将标本面向上,手持载玻片一端的两侧,小心地在酒精灯火焰上方较高的位置微微加热,使水分蒸发,但切勿紧靠火焰或加热时间过长,以防标本烤枯而变形。

标本干燥后即进行固定,固定的目的有三个:(1)杀死微生物,固定细胞结构。(2)保证菌体能更牢固的粘附在载玻片上,防止标本水洗时被水冲洗掉。(3)改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色。

固定常常利用高温,手执载玻片的一端(涂有标本的远端),标本向上,在酒精灯火焰外层尽快的来回通过3-4次,共约2s-3s,并不时以载玻片背面加热,载玻片背面触皮肤,以不觉过烫为宜(不超过60℃),待放置冷后,再进行染色。


2.染色。

在固定过的涂片菌膜上滴加草酸铵结晶紫染液,染色液应完全覆盖整个菌膜,染色1min。

3.水洗。

染色到一定的时间,拿住玻片使之成450角,用细小的水流把多余的染料冲洗掉,被菌体吸附的染料则保留。


4.媒染。

加碘液覆盖涂面染1 min。在媒染处理时,媒染剂与染料形成不溶性的化合物,可增加染料和细菌的亲和力。


5.水洗。

用细小的水流缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。


6.脱色。

加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20s-30 s后再进行水洗,吸去水分。


7.复染。

蕃红染色液染色10 s后, 自来水冲洗。


8.干燥。

染色结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。

image.png

西安齐岳生物科技有限公司有自己的独立有机合成实验室,可以自主生产合成各种染色液,我们可以提供的产产品有巴氏染色液革兰氏染色液、DAB染色液;还包括细胞核染色、线粒体染色、细胞内脂类及蛋白质染色、DiD细胞膜染色、DiI细胞膜染色、DiO细胞膜染色、DiR染料、DiS细胞膜染色、PKH26细胞染色。我公司致力于开发各种新型聚合物材料并用于药物靶向和药物传递的科研领域中。我们还可以接受定制合成服务,质优价廉,对科研机构支持货到付款。

相关产品如下:

幽门螺旋杆菌染色液Helicobacter pylori Stain Kit

伊红染液(水溶性)Eosin Stain Kit

Masson染液Masson Stain Kit

革兰氏染液Gram Stain Kit

抗酒石酸酸性磷酸酶染液Tartrate-resistant acid phosphatase Stain Kit

快速瑞氏-姬姆萨复合染色液

刚果红染液(淀粉样变性染色液)Congo Red Stain

无毒环保脱蜡剂Dewaxing Reagent

快速姬姆萨染液 (适用于附红体染色)Giemsa Stain

碱性磷酸酶染液(钙钴法,适用于石蜡切片)ALP Stain kit

网状纤维染液Reticular Fiber Stain Kit

爱先蓝-糖原染液AB-PAS Stain Kit

肥大细胞甲苯胺蓝染液Toluidine blue Stain Kit

无毒环保透明剂Transparent Reagent

无毒环保封固剂(水溶性)

无毒环保封固剂(油溶性)Mounting Reagent

油红O染液Oil Red O Stain Kit

染色体核型分析染色液Karyotype Analysis Stain Kit

精子快速染色液(快速改良巴氏法)Quick Sperm Stain Kit

Diff-Quik染色液(三试剂)Diff-Quik Stain Kit

碱性磷酸酶染液(偶氮偶联法,适用于细胞样本)cALP Stain Kit

酸性磷酸酶染液ACP Stain kit

细胞活性鉴别染液Cell Viability Detected Stain Kit

血管通透性测试(伊文思蓝)染液Vasopermeability (Evan's Blue)Stain Kit

过氧化物酶染液Peroxidase Stain Kit

快速无毒改良巴氏染液Modified Papanicolaou Stain Kit

以上内容来自小编zzj 2021.1.19




【公司简介】:

德尔塔(Delta) 是西安齐岳生物科技有限公司旗下品牌,德尔塔(Delta) 目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等,这些产品在国内给数百家高校实验室和数十家中科研研究所及药厂长期供应,德尔塔(Delta) 成立之初以代理国外进口品牌的为主,产品主要涉及磷脂、PEG衍生物等产品,随着公司的发展和扩大,公司更注重自主品牌的建立和高附加值的高端产品研发并且注册了自己品牌商标,在未来3-5年公司预计将建立一个综合型的大型实验室,该实验室不仅提供全方面的纳米靶向药物科研产品及定制外包服务,还将承接其他研究领域的科研产品和定制外包服务,预计该实验室还将与国内数十家大型药厂进行前期药物研发的科研合作,为药厂提供科研产品及技术服务,在研发阶段协助药厂开发抗肿瘤新药,一旦新药开发成功,在研发阶段积累的高端辅料产品和研发经验将支持我们建立一条药用辅料生产线给该肿瘤新药长期提供高端药用辅料。在高校和研究所科研领域上面公司不但要抢占国内市场还要开拓国际市场,国际业务以在2018年初开始启动,部分产品已远销欧美大陆,计划在未来3年-5年公司的拳头产品要抢占大量的国际市场,使得德尔塔(Delta) 品牌发展成一个国际品牌。

 

【经营种类】:

德尔塔(Delta) 经营的产品种类包括有:合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点计化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、热门肿瘤原料药、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二氧化硅,聚合物微球,近红外荧光染料,聚苯乙烯微球,上转换纳米发光颗粒,MRI核磁造影产品,荧光蛋白及荧光探针等等。


【温馨提示】:

德尔塔(Delta)供应的产品仅用于科研,不能用于人体治疗、药物开发、和其他商业用途,如有购买方或第三方采购我公司的产品用于治疗、药物开发或商业用途,购买方或第三方将承担所有法律责任,我公司也将追究其法律责任。以上产品均可定购。


【运输说明】:


极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。

低温产品:低温产品运输过程中加装冰袋运输。

常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。


【目前合作的部分科研单位】:

重庆医科大学,西南大学,第三军医大学,西南交通大学,重庆大坪医院,四川大学,华西医院,电子科技大学,哈尔滨工业大学,吉林大学,长春应化所,沈阳药科大学,中国海洋大学,北京大学,清华大学,北京理工大学,北京师范大学,北京中医药大学,中国农业大学,北京市肿瘤防治研究所,北京军事医学科学院,中国科学院动物研究所,中国科学院化学研究所,第四军医大学,西安交通大学,湖南大学,中南大学,武汉大学,武汉协和医院,华中科技大学,中山大学,广东药科大学,深圳大学,华南理工大学,中国科研学院先进技术研究院,厦门大学,福州大学,浙江大学,南京大学,南京医科大学,东南大学,中国药科大学,苏州大学,山东大学,山东师范大学,上海交通大学,华东理工大学,复旦大学,郑州大学,河南烟草局,宁夏医科大学,新疆大学,中国人民大学,中国科学院苏州纳米研究所,国家纳米科学中心,武汉病毒研究所,中国科学院过程工程研究所,江苏省原子医学研究所,中国科学院宁波材料技术与工程研究所,中国科学院上海硅酸盐研究所,中国医学科学院生物医学工程研究所等等

 

【目前合作过的药厂】:

石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司,西安力邦制药有限公司,上海药明康德新药开发有限公司,安徽省国平药业有限公司,苏州亚盛药业有限公司,兆科药业(合肥)有限公司,南京绿叶制药有限公司,山东绿叶制药有限公司,大冢(上海)药物研究开发有限公司,国药集团化学试剂有限公司,长春金赛药业有限责任公司,成都苑东药业有限公司,浙江海正药业等。


【地  址】:陕西省西安市雁塔区含光南路与丁白路交叉口美苑楼尚20F

【联  系】:张经理

【电  话】:18133906270

【邮  箱】:1525990437@qq.com

【网  站】:http://www.delta-f.com/
库存查询