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分析13C或15N标记的中心碳代谢及相关途径的极性代谢物
发布时间:2020-12-17     作者:wyf   分享到:

分析13C或15N标记的中心碳代谢及相关途径的极性代谢物

    提出了一种基于靶向串联质谱分析(LC-MS / MS)的方法,用于分析极性代谢物的13C或15N标记情况。该平台利用三重四极杆(QQQ)质谱仪,极性切换的选择性反应监测模式(SRM)和酰胺亲水作用液相色谱(HILIC),捕获碳和氮在选定代谢物中的离子对。本方案是对先前发表的非标记靶向代谢组学方案的扩展,并已广泛用于追踪各种生物样本(例如,体外细胞培养实验和经静脉注射小鼠体内标记)中营养物质的代谢,如13C标记的葡萄糖,13C-谷氨酰胺和15N-谷氨酰胺等。

     对SRM信号进行积分,生成每种标记形式的峰面积阵列。将处理后的数据用于获得目标分子标记的程度和分布(称为代谢流量组学)。每种方法都可以基于已知的未标记Q1 / Q3 SRM离子对而定制,并根据相应的13C或15N标记情况进行调整。从标记实验、代谢物提取到峰积分,单个样品的整个过程大约需要6-7小时。

实验步骤

1 提取代谢物并添加同位素标记。代谢物可以从多种不同的生物来源样本中提取,根据样本类型和实验目的选择相应的提取方法,然后考察确定标记时间。

2 设置MS方法。根据正负离子检测模式调整Q1 / Q3 SRM离子对列表,匹配每种代谢物的13C或15N标记类型。

3 将样品重悬于约20-25 µL LC-MS级水中,然后通过自动进样器进样5 µL,使用步骤2中Analyst软件中定义的靶向采集方法。

4 使用分析和峰积分软件(例如SCIEX的MultiQuant),在质谱图中查找13C/15N标记峰以及未标记的12C峰。

5 作为SRM的替代方法:可以进行高分辨率LC-MS / MS分析,高分辨质谱仪应在MS和MS / MS模式下均具有高质量精度且有极性切换功能,例如QExactive Orbitrap的数据相关采集(DDA)模式。

结果

此平台可用于分析未标记(12C或14N)和标记(13C或15N)的代谢物。应根据生物学问题选择靶向SRM LC-MS/MS方法,提供了超过140个全标记代谢物的分析方法和多达40-50个独特代谢物的同位素分析。图1 是靶向13C代谢组学工作流程,展示了从代谢物提取、LC-MS / MS采集到数据统计分析的整套流程。

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产品供应:

3C同位素标记的松柏醇葡萄糖甙碳-13同位素标记的溴化膦化合物
(11C、13C、14C、D、3H、18O)同位素标记葡萄糖碳同位素标记双酚S和双酚AF
13C同位素标记木素木素-木聚糖复合体13C-NMRHSQC同位素标记磷酸三苯酯化合物
14C标记葡萄六糖同位素标记链状化合物
(13)C标记尿苷二磷酸葡萄糖同位素标记环状化合物
同位素标记寡糖和多糖同位素标记碳氢化合物
13C稳定性同位素标记1,6缩水β-D-吡喃葡萄糖同位素标记烃的衍生物
同位素标记仿生糖/糖组L-亮氨酸-U-13C6
N-糖链双同位素标记13C标记L-亮氨酸示踪剂
同位素标记1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸稳定同位素标记多肽氨基酸
同位素标记2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸稳定同位素马来酸酐标记
葡萄糖-D-13C6稳定同位素13C标记的sp2碳纳米材料
稳定同位素标记吉西他滨-13C/15n2稳定性同位素13C标记富勒烯C60
双标记尿嘧啶核苷-(13C,15N2)同位素13C标记的4-羟基脯氨酸
13)C-海藻糖同位素13C标记二氯乙酸
13C稳定性同位素标记纤维素稳定同位素(13)C标记乙醇
15N稳定性同位素标记L-谷氨酸同位素标记莨菪亭-2-13C
(125)I标记胰高糖素同位素13C,15N双标记-氨基脲盐酸盐
稳定同位素巯基化合物标记C-13同位素标记17β-雌二醇([3,4-13C]-17β-E2)
(13)C标记氨基酸化合物13C-全标记乙酸钠
同位素标记哌虫啶13C-标记17芳香雌二醇([3,4-13C]-17β-E2)
同位素标记环氧虫啶同位素13C标记水杨酸
同位素标记顺硝烯新烟碱类化合物同位素^13C标记小麦植株
吖啶酮类稳定同位素巯基化合物标记同位素13C/D标记对甲氧基苯甲酸
稳定同位素标记N‑(4‑(吖啶酮‑10‑基)‑苯基)‑ND-13C6-甘露糖
同位素标记马来酰亚胺基团13C同位素标记硫酸盐木素
稳定同位素标记莨菪亭213C13C同位素标记果胶-木素复合物
稳定同位素13C标记C6013C同位素标记木质素与木聚糖复合物
稳定同位素标记脱氧核苷代码(13)C标记甘氨胆酸
稳定同位素标记脱DNA N6-甲基腺嘌呤同位素(13)C标记富勒醇纳米颗粒
稳定同位素15N标记化合物13C和15N稳定同位素双标记
同位素标记有机金属钌化合物同位素标记合成吉西他滨-13C
同位素标记蛋白酪氨酸磷酸酶1B苯甲酸-13C同位素标记
丙酯草醚和苦皮藤素同位素标记物双标记13C,15N3-呋喃妥因
稳定同位素标记碱性橙ⅡN,N-二异丙基-[(1-13C)乙基]胺化合物
稳定同位素标记苯α-13C标记β-O-4型木素模型化合物
稳定同位素标记硝基苯愈创木基丙三醇-β-愈创木基醚-[α-13C]
氘代有机化合物13C,14C同位素标记17-E2,17-E2,E1
氘标记化合物13C,14C同位素标记雌酮(E1)
同位素标记氨基甲酸酯(3a-3c)13C,14C同位素标记17β-雌二醇(17-E2)
蓝藻碳稳定同位素标记13C,14C同位素标记17-雌二醇(17β-E2)
稳定同位素标记氮素13C,14C同位素标记天然固醇类雌激素
稳定同位素MALDI-TOF-MS稳定性同位素碳13全标记L型亮氨酸
植物碳同位素标记同位素标记原儿茶酸-(13COOH)
稳定同位素标记卤代苯-Dsub5/sub13C标记脂肪酸的同位素
稳定同位素标记13C6结晶紫3C稳定性同位素标记1,6-缩水-β-D-吡喃葡萄糖
稳定同位素标记13C6隐色结晶紫13C内醚糖/13C葡萄糖
稳定同位素标记15N-N,N-二甲基苯胺13C标记磷脂脂肪酸
稳定同位素氘标记D6-结晶紫DNA-稳定同位素探针标记
稳定同位素标记溴布特罗-D9同位素标记物D3-左氧氟沙星
稳定同位素标记卤代苯-D5稳定同位素标记双酚F-D8
稳定同位素标记D4-罗丹明B氘代沃拉帕沙
稳定同位素标记氨基甲酸乙酯-D5稳定同位素标记磷脂
稳定同位素标记碱性嫩黄O-D12稳定同位素标记氯丙那林-D6
同位素标记氨基甲酸乙酯-D5同位素标记常咯啉
稳定同位素标记敌百虫稳定同位素标记D5-氯氰菊酯
稳定同位素标记甲氧基一D/甲氧基姻6稳定同位素D标记甜蜜素
稳定同位素标记卤代苯同位素氘标记2-甲基-4-异噻唑-3-酮
同位素标记D6-苯同位素标记邻苯二甲酸
稳定同位素标记碱性嫩黄O-D(12)氘标记苯乙醇胺类β受体激动剂
稳定同位素标记硼氘化钠氘代乙琥胺d5
稳定同位素标记妥布特罗-D9氘标记川芎嗪
稳定同位素标记D6-二甲基黄氘代维生素D类似物
稳定同位素标记孔雀石绿-D12同位素氘代标记吡罗昔康-d3
稳定同位素标记2-异丙基硫杂蒽酮-D3苯基羟乙酸酯氘标记化合物
稳定同位素标记双氰胺同位素标记的西布特罗-D9/马布特罗-D9
同位素标记2异丙基硫杂蒽酮氘标记夫沙那韦钙盐
稳定同位素氘标记亚磷酸二甲酯或亚磷酸三甲酯同位素标记全氘代邻二甲苯
稳定同位素氘标记有机磷杀虫剂同位素标记15N-N,N-二甲基苯胺
稳定同位素标记三苯甲烷类化合物同位素标记3,5-二硝基水杨酸肼-15N2
稳定同位素标记克伦普罗化合物15N同位素标记尿素
同位素标记2,6二氯苯胺15N同位素标记L-精氨酸
同位素标记3,5二氯4氨基苯乙酮;同位素标记灭蝇胺-氨基-15N2
同位素标记3,5二氯4氨基苯乙酮15N稳定同位素标记集胞藻
稳定同位素标记3,5二氯4氨基α溴代苯乙酮蛋白质酰胺侧链15N同位素标记
稳定同位素标记1(4氨基3,5二氯)2异丙基氨基乙酮同位素标记15N-L-谷氨酰胺
同位素标记1(4氨基3,5二氯)2异丙基氨基乙酮15N标记-L-赖氨酸盐酸盐
稳定同位素氘标记DDT同位素标记15N-L-天冬氨酸
同位素标记双酚A或双酚F衍生物同位素标记15N-L-蛋氨酸
13C3-三聚氰酸同位素15N标记水合肼
15N3-三聚氰胺同位素15N标记2-甲基-5-硝基咪唑
稳定同位素标记脂肪酸同位素15N标记L-天冬酰胺
同位素标记蛋白质同位素15N标记L-半胱氨酸
同位素标记血红素/叶绿素同位素标记(15)N-N,N-二甲基苯胺
同位素标记酶/激素同位素15N标记螺旋藻
同位素标记木醇/甲醇同位素15N标记八肽拟生长因子
同位素标记酒精(乙醇)同位素15NN标记L-缬氨酸
同位素标记甘醇(乙二醇)1-18O稳定性同位素标记葡萄糖
同位素标记甘油(丙三醇)18O稳定同位素标记磷酸化蛋白质
同位素标记石炭酸(苯酚)15N标记邻位芳香羟肟配位体
同位素标记蚁酸(甲酸)同位素15N标记三肽
同位素标记水杨醛(邻羟基苯甲醛)15N稳定同位素标记副溶血弧菌
同位素标记肉桂醛(β-苯基丙烯醛)同位素15N标记氧化亚氮
同位素标记巴豆醛(2-丁烯醛)16O/18O标记糖肽
同位素标记氯仿(三氯甲烷)糖苷内切酶催化同位素标记n-糖链

上述产品仅用于科研,不可用于人体实验!

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