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机器视觉检测技术组件及应用
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
一个现代典型检测系统，由下图所示基本单元组成，不同的机器系统的基本原理大同小异。 典型机器视觉测控系统原理框图 机器视觉检测技术组成及应用可归纳为以下几点： 1. 机器视觉测控系统硬件：光源、、； 2. 机器视觉检测软件：组态、可视化； 3. 图像处理、模式识别、理论基础； 4. 尺寸测量、缺陷检测之应用； 5. 图像融合：多CCD、多聚焦、多光照； 6. 目标跟踪：动态图像； 7. 三维重构：初级视觉。
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小量全血DNA提取方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
1 RNAi 慢病毒介导）服务 2 筛选稳定细胞系方法 3DNA提取试剂盒 4RNA提取试剂盒 5PCR相关产品 6DNA Marker 产品 7TA克隆产品 8蛋白研究产品 储存事项: 1. 结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。 2. 为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1毫升灭菌水溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存，－20℃保存。 3. 避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。 操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 提示：第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入! 1. 取200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液，放入1.5ml离心管。 如果全血起始量小于200μl，则用缓冲液BB补足到200μl。如果起始量介于200μl-300μl之间，则后续操作需要按照比例增加试剂用量。如果起始量介于300μl-1ml之间，则需要先进行红细胞裂解操作（见本说明书后附录）。 2. 加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液，充分混匀，再加入200μl结合液CB，立刻涡旋振荡充分混匀，在70℃放置10分钟。溶液应变清亮（但颜色偏黑色）。 可选步骤，一般不需要: 如果RNA残留较多，需要去除RNA，可以在加入200μl 结合液CB 前加20μl RNase A(25mg/ml)溶液，振荡混匀，室温放置5-10分钟。 3. 冷却后加入100μl 异丙醇，立刻涡旋振荡充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀。 上述步骤中立刻涡旋或者吹打充分混匀非常重要，混匀不充分严重降低产量，必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀。 4. 将上一步混合物（包括可能有的沉淀）加入一个吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中）13,000 rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。 5. 加入500μl抑制物去除液IR，12,000 rpm 离心30秒，弃废液。 6. 加入700μl
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数字摄像头与模拟摄像头简介
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
摄像头一般可以分为两种：一种是数字摄像头，可以独立与微机配合使用，较简单，属于家用级。另一种是模拟摄像头，要配合视频捕捉卡一起使用，有负载的处理电路，属于工业级。 数字摄像头 数字摄像头是一种数字视频的输入设备，利用光电技术采集影像，而不像视频采集卡那样首先用模拟的采集工具采集影像，再通过专用的模数转换组件完成影像的输入。数字摄像头的优点是使用简单，一般都通过微机并行通讯口连接或USB连接的，是即插即用的，安装简单。尤其适合便携式电脑和不能打开机箱的品牌台式电脑。整体的价格往往要比买同档次的摄像头和捕捉卡要便宜。 不过数字摄像机的缺点也是比较明显的，由于使用了CMOS作为感光器件，使得在640*480以上捕捉速度不是很快（小于30帧）。现在市场上大多数的摄像头的分辨率都在640x480左右，一般在352x288时能够达到每秒30帧。数字摄像头的价格也相对便宜，一般定位在1000元以下，可以被大众所接受。 模拟摄像头 模拟摄像头多为CCD的，按不同档次分辨率不同。与数字摄像头同级的模拟摄像头为例，一般用于工业用途，有较高的分辨率，较好的实时性，较低的分辨率。模拟摄像头要与电脑配合工作，需要有视频捕捉卡或外置捕捉卡。视频捕捉卡档次拉的很大，从几百元到上万元都有，昂贵的视频捕捉卡往往带有实时视频压缩功能，适用于专业运用。
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Isolation and culture of rat coronary microvascular endothelial cells
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
Isolation and culture of rat coronary microvascular endothelial cells (CMVE) CMVE were isolated from Wistar rat hearts by digestion of primary cell isolation kit. 1. Hearts mounted on a Langendorff apparatus were perfused at 37°C with a solution of the following composition (in mM): NaCl 118, KCl 4.7, NaH2PO4 1.2, MgSO4 1.2, NaHCO3 25, glucose 11, pH 7.4 (gassed with 95% O2/5% CO2)-Buffer 1. 2. Epicardial mesothelial cells were devitalised with 70% (v/v) ethanol. 3. After flushing out blood from the coronary circulation, perfusion was changed to Buffer 1 with added CaCl2 0.25 μM and collagenase 0.04%, which was recirculated for 30 min. 4. Ventricles — excluding any visible large vessels — were then chopped into 15 ml of recirculating solution containing BSA (200 mg), and triturated gently during a 10 min incubation period at 37°C. 5. The suspension was filtered through nylon gauze and centrifuged (150 g, 3 min) to sediment myocytes. 6. The supernatant, including added BSA (100 mg), trypsin 0.01%, and CaCl2 50 μM, was incubated at 37°C for 15 min with stirring. 7. The CMEC pellet was obtained by centrifugation (1000 g, 10 min), washed twice in Buffer 1 with CaCl2 250 μM and 500 μM respectively, and resuspended in 40 ml Primary cell medium with 10% FBS, benzylpenicillin 250 U/ml, streptomycin 250 μg/ml, amphotericin B 12.5 μg/ml, and gentamycin 50 μg/ml. 8. Cell suspensions were plated in 25 or 75 cm2 tissue culture flasks and incubated at 37°C. 9. After 1 h, unattached cells and debris were washed off with 0.9% saline. Cultured cells formed confluent monolayers with a ‘co
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RNAi的作用机制及siRNA的合成方法
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
RNAi的作用机制及siRNA的合成方法 RNA干扰(RNA interference，RNAi)是由双链RNA(double strandedRNA， dsRNA)分子在mRNA水平关闭相应序列基因表达或使其沉默的过程。dsRNA可以抑制不同类型细胞的靶向基因表达，用特异性的抗体几乎检测不到靶向基因所表达的蛋白质。因此，RNAi技术又被形象地称为基因敲除(knock out)或基因沉默(gene silencing)。RNAi是一种典型的转录后基因调控方法，又称转录后基因沉默(post transcriptional gene silencing，PTGS)[1]。 1 RNAi技术的发展过程 早在1990年，植物学家Jorgensen等人用矮牵牛花做试验，将紫色素合成基因导入植物体，尝试将更多拷贝的色素基因注入植物体，使花朵的色彩更加艳丽。结果许多花朵没有开出更艳丽的花朵，反而开出白色的花朵。进一步分析发现，这些转入的基因不但自身没有表达为蛋白质，反而关闭了牵牛花中与其同源的色素相关基因的表达。由于这种由外源基因的导入而造成的抑制作用最初被确认是发生在转录后水平，称这种现象为共抑制(cosuppression)[2]。1994年，Cogoni等人将外源性类胡萝卜素基因导入野生型粗糙链孢霉菌，结果转化细胞中内源性的类胡萝卜素基因也受到了抑制，他们称这种基因失活形式为消除作用或基因压制(quelling)[3]。1995年康乃尔大学的Guo[4]博士在实验中想通过反义RNA阻断美丽线虫(C. elegans)的par-1基因表达，同时还用正义RNA做了一个对照，试图观察到对照试验组基因表达增强的现象，但结果却发现了反义和正义RNA都阻断了该基因的表达，Guo等人一直不能解释该现象。直到1998年Fire等[5]才发现这是由于Guo博士在试验中污染了双链RNA而引起的。他们还证明转录得到的单链RNA经纯化后注射线虫所引起的阻断作用十分微弱，而经纯化的双链RNA则能高效特异地阻断相应基因的表达，他们将此现象称为RNA干扰。1999年， Hunter[6]等的实验进一步验证了RNAi的存在。他们将dsRNA去除后，再将正义或反义的ssRNA注入线虫卵中，没有产生基因沉默现
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Isolation and culture of human pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs)
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
Isolation and culture of human pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs) 1. The human pulmonary arteries were opened to expose the endothelial surface, which was removed by gentle scraping with a scalpel. 2. The surrounding adventitia was then carefully dissected from the tunica media. 3. Cells were derived either from explants or after tissue digestion. 4. For the explant technique, the pulmonary arterial media was cut into ∼2-mm cubes and plated onto 25-cm2 tissue culture flasks. 5. Explants were left to adhere overnight and then were maintained in primary cell culture, 10% FBS, and antibiotic-antimycotic solution (100 U/ml of penicillin, 100 μg/ml of streptomycin, and 250 ng/ml of amphotericin B). 6. The cells were passed after ∼2 wk into a single 75-cm2flask and grown to confluence in primary cell culture system. 7. For tissue digests, the medial layer was cut into small pieces with a scalpel and incubated in type II collagenase (1,000 U/ml) in serum-free medium at 37°C for 4 h. 8. The action of collagenase was stopped by the addition of primary cell culture system. 9. The cells were then passed through a filter (pore size 100 μm) and centrifuged at 200g for 5 min, then resuspended in primary cell culture system before being plated in 25-cm2 flasks. 10. Subsequent passages were carried out at confluence, dividing one flask into four. Cells were used for experiments between passages 3 and 10. 11. The phenotype of isolated cells was investigated with antibodies to smooth muscle-specific antigens: monoclonal anti-α-smooth muscle actin and anti-smooth muscle myosi
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超纯水对高效液相（HPLC）实验的影响
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
随着时代和科技的发展，高效液相等精密分析仪器已普及至与分析测试有关的行业，对实验水质要求也愈来愈高。现今高效液相(HPLC) 都要求用户使用超纯水定出平坦而没有波峰的基线以保证分析测试的灵敏度，但有部分HPLC用户因资金或习惯等原因仍沿用瓶装饮用纯净水或蒸馏水进行实验,效果往往不很理想。 瓶装纯净水和蒸馏水均只是普通纯水而不是高纯水，水中仍含有少量离子和有机物等杂质，用以配制液相和洗脱液不仅可能污堵昂贵的色谱柱，也影响HPLC定出平坦的基线。 瓶装纯净水的纯化工艺，通常包括吸附、过滤、反渗透等，对颗粒性有机物的去除效果较好，但对微量有机物的去除却不能满足高灵敏度的HPLC实验之需求，并且，由于其包装通常多为PVC瓶，透氧率高，同时存在一定的化学溶出量，从而污染瓶中的纯净水，尤其是保存一段时间后，水质下降更多，因此表现在HPLC色谱图上，虽无特定吸收峰，但基线存在较严重的不稳干扰。 有专家对重蒸水进行HPLC检测时发现，254nm和214nm在22-27分钟时都出现较强的吸收峰，这表明有疏水性较强的有机物污染，其原因应是蒸馏过程的共沸现象导致了某些挥发性有机物去除不彻底。 超纯水系统综合了水质预处理、双级反渗透、原子级超纯化、高精密超滤等多道工序后，产水水质指标可与进口超纯水机相提并论，并且超纯水即取即用，不会因储存引入污染，水质有保证，较之使用瓶装纯净水或蒸馏水，更能满足用户高精度仪器分析的需要。 （备注：纯度越高的水，越容易受到空气和容器等带来的外界污染，超纯水应即取即用。这样，在高精度的仪器分析中才能尽可能的排除外界干扰的影响，从而得到满意的结果。）
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伤口愈合中电流的离子流成分及其调控作用
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
大鼠角膜伤口电流的离子成分及其调控作用 伤口内部的电场和电流是一个强烈的信号，能够引导细胞迁移到愈合的伤口中。电场刺激许多细胞的分布、迁移和分化，例如角膜表皮细胞、神经细胞、成纤维细胞和皮肤表皮细胞，这些细胞具有趋电性或向电性。多年前就检测到了人皮肤伤口上出现的电场和电流，现在的新技术可以更加精确地测定电流的变化，例如非损伤微测技术、生物电成像仪等。 2011年，加州大学戴维斯分校的研究人员用非损伤微测技术测定了大鼠眼角膜伤口上单个离子流随时间变化的动力学，也检测了Cl-通道在受伤前后的表达水平。受伤后Ca2+外流增加，但是K+流初期外流很大随后快速减小。令人意外的是，伤口中的Na+出现内流，以及持续的Cl-内流，近似于之前测到的伤口电流。药理学实验发现药物刺激了离子转运，显著增强了Cl-、Na+和K+流速。伤害眼角膜引起了Cl-通道CLC2的分布和表达的显著变化。 这项研究说明外向的电流出现在角膜伤口上，主要由Cl-内流，以及部分Ca2+和K+外流所引起。Ca2+和Cl-流速主要是激活调控，但是K+流速主要是由渗漏引起。电信号是一个激活反应，可以为调节伤口愈合提供新方法，例如通过眼药水改变离子转运，以帮助非愈合角膜溃疡的挑战性。因此我们可以由此开发适合**眼部疾病的眼药水。 注：离子流在伤口电流中的贡献模型图和实际的贡献率。Ca2+、Cl-、Na+和K+参与了电流的形成。 关键词：电流；离子流；伤口 引用：Vieira AC, et al. PLoS ONE, 2011, 6: e17411. 全文下载
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人Bcl-2相关X蛋白(BAX)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 48T 0.75μg/L -24μg/L 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中Bcl-2相关X蛋白(BAX)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Bcl-2相关X蛋白(BAX)水平。用纯化的人Bcl-2相关X蛋白(BAX)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Bcl-2相关X蛋白(BAX)，再与HRP标记的Bcl-2相关X蛋白(BAX)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Bcl-2相关X蛋白(BAX)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人Bcl-2相关X蛋白(BAX)浓度。 试剂盒组成 1 20倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 3ml×1瓶 2 酶标试剂 3ml×1瓶 8 标准品（48μg/L） 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×4条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 3ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 3ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 12μg/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 6μg/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 3μg/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 1.5μg/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀
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Isolation and culture of Sprague-Dawley rat aortic smooth muscle cells
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
Isolation and culture of Sprague-Dawley rat aortic smooth muscle cells The intact mature arterial media is composed of at least four phenotypically unique cell subpopulations that reside in distinct medial layers. The sub-endothelial media is predominately populated by non muscle-like cells; the middle media, by smooth muscle cells; and the outer media, by two phenotypically distinct cell subpopulations, one smooth muscle and the other non muscle-like. In order to isolate the four cell subtypes identified in vivo, the arterial media are separated into the three layers: (1) A very thin sub-endothelial layer (termed here L1); (2) An intermediate-sized middle layer (termed L2); (3) A thick outer layer (termed L3); After separation of the media into three layers, cells were grown from each layer by explant techniques. Primary cultures of rat aortic smooth muscle cells were obtained by enzymatic dissociation (Primary Cell Isolation Kit) of thoracic aortae from 250-300 g male Sprague-Dawley rats. 1. Sprague-Dawley rat aortic smooth muscle cells were isolated from thoracic aortas. 2. The adventitia and connective tissue were removed; the remaining arterial intima and media were cut into 1-cm2 segments and placed in culture dishes with Primary Cell Isolation Solution. 3. Cells were grown in Primary Cell Culture Medium including with Primary Cell Culture Supplement, 10% heat-inactivated calf serum, 2 mM L-glutamine, 100 U/ml penicillin, and 100 μg/ml streptomycin… 4. These cultures were harvested twice a week with primary cell culture solution and passaged at a 1:4 ratio in T-
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DNA分子标记技术研究进展
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
DNA分子标记技术研究进展 遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用，随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起，遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。前三种标记都是以基因表达的结果为基础的，是对基因的间接反映；而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映，它具有能对各个发育时期的个体、各个组织、器官甚至细胞作出“中性”以及操作简便等特点。正是这些特点，奠定了它极其广泛的应用基础。DNA分子标记本质上是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异特DNA片段[1]。DNA分子标记大多以电泳谱带的形式表现生物个体之间DNA差异，通常也称为DNA的指纹图谱。在过去10多年中，分子标记技术得到了突飞猛进的发展，至今已有几十种分子标记技术相继出现，并在基因库构建、基因克隆、基因组作图、基因定位、作物遗传育种、植物亲缘关系鉴别等各个研究领域得到了广泛的应用。 1．第一代分子标记 1.1 RFLP标记技术 1980年Botesin提出的限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphisms ，RFLP)可以作为遗传标记，开创了直接应用DNA多态性的新阶段，是最早应用的分子标记技术[2]。RFLP是检测DNA在限制性内切酶酶切后形成的特定DNA片段的大小，反映DNA分子上不同酶切位点的分布情况，因此DNA序列上的微小变化，甚至1个核苷酸的变化，也能引起限制性内切酶切点的丢失或产生，导致酶切片段长度的变化。RFLP标记的等位基因具有共显性的特点，结果稳定可靠，重复性好，特别适应于构建遗传连锁图。但是，在进行RFLP分析时，需要该位点的DNA片段做探针，用放射性同位素及核酸杂交技术，既不安全又不易自动化。另外，RFLP对DNA多态性检出的灵敏度不高，RFLP连锁图上还有很多大的空间区[3]。 1.2 RAPD标记技术 为了克服RFLP技术上的缺点，Williams等[4]于1990年建立了随机扩增多态DNA(Randomamplified polymorphic DNA
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细胞培养常见问题分析
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
细胞常见问题分析 1、冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后，须立即放放37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可以超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另外冻管由液氨桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。 2、可否使用与原先培养条件不同之培养基？ 不能。每一细胞株均有其特定使用自己适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同的之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。 3、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？ 不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产品极大的影响。来自不同特种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。 4、悬浮性细胞应如何继代处理？ 一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。 5、欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？ 欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg（约1，000rpm），5-10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡。 6、如果细胞发生微生污染时，应如何处理？ 加入相应抗生素。直接灭菌后丢弃。 7、各种细胞培养用的dish，flash是否均相同？ 不同厂牌的dish或flash，其所coating的polymer不同，制造程序亦不同，虽对大部分细胞没有太大之影响，惟少数则可能因使用厂牌不同之dish或flask而有显著之生长差异。
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猴风疹酶（Rubella）联免疫分试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 1 IU/ml -40 IU/ml 使用目的： 本试剂盒用于测定猴血清、血浆及相关液体样本中风疹（Rubella）的含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猴风疹（Rubella）水平。用纯化的猴风疹（Rubella）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入风疹（Rubella），再与HRP标记的风疹抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的风疹（Rubella）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猴风疹（Rubella）浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（80IU/ml） 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 40 IU/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 20 IU/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 10 IU/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 5 IU/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 2.5 IU/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2. 加样
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大鼠甘油三酯（TG）酶联免疫分析试剂盒使用说明书
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 15pg/ml -480pg/ml 使用目的： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中甘油三酯（TG）含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠甘油三酯（TG）水平。用纯化的大鼠甘油三酯（TG）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甘油三酯（TG），再与HRP标记的甘油三酯（TG）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甘油三酯（TG）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠甘油三酯（TG）浓度。 试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶 2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（960pg/ml） 0.5ml×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 3．组织处理：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 480pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 240pg/ml
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引进系列气相色谱仪的结构特点及常见故障类型
作者：德尔塔 日期：2022-05-04
一、主机气路结构特点及常见故障分布： 故障1：载气流速低，柱前压力低故障点可按稳流阀前后划分： 阀前:（1）气路堵塞（大过滤器方向装反，或阻力太大）； （2）仪器载气入口压力太低（两级通压器故障）； 阀后：（1）气路漏气（注样器或气路中的接头、压环、隔垫）； （2）稳流阀分流出口处堵塞； （3）稳流阀打不开； 故障2：载气流速低，柱前后异常高 故障点不存在于阀前气路和阀上，仅存在于阀后气路，既稳流阀至检测器之间气路堵塞，而稳流阀至压力表之间的气路畅通。 故障3：载气流速高，柱前压力高 故障分布在两级调压器和载气稳流阀上，既稳流阀失灵。 引进系列气相色谱仪的H2、Air、毛细管补充气系统的故障现象最常见的是气速不够，导致FID，FPD熄火或点火困难。由于气是在离子化底座上测量，所以故障点分布在整个气路中。 （1）针型阀打不开（开启位置不对）； （2）阀芯带有的冶金粉末过滤块堵塞； （3）阀针断； （4）阀座气孔堵塞（气阻太大）； （5）离子化底座气路堵塞（气阻太大）； （6）气路漏气（底座、阀体、密封环、气路接头处漏气）。 二、检测器系统结构特点及常见故障分布： TCD故障分布： 故障1：噪声太大 （1）热丝振动； （2）载气流速不稳定； （3）热丝污染或氧化； （4）池腔污染； （5）热丝及引线对池体绝缘度下降。 故障2：漂移太大 （1）参比柱和分析柱载气流量不平衡； （2）使用Ar作栽气时未加入甲烷（90%Ar，10%甲烷）； （3）热丝阻值不对称。 （4）载气气路或热导池漏气。 故障3：桥电流中断 （1）TCD热丝有一路断； （2）样品浓度过高（信号超过4分钟）； （3）无载气通过热导池； （4）热丝温度设置过底； 故障4：以氮气为栽气，测量H2或He组份时，H2峰（He峰）为，W形峰。 （1
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