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L-阿拉伯糖抑制大鼠高脂饮食所致体内脂肪的增加

L-阿拉伯糖抑制大鼠高脂饮食所致体内脂肪的增加

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

L-阿拉伯糖抑制大鼠高脂饮食所致体内脂肪的增加 杨庆,谭壮生,仝国辉,张懿,郑珊 (北京市疾病预防控制中心卫生毒理所,北京100013)     关键词:L-阿拉伯糖;高脂饮食;体内脂肪增加   L-阿拉伯糖作为一种健康的食品添加剂,已大量用于食品加工业中,现已被美国食品药品监督管理局(FDA)和日本厚生省批准列入健康食品添加剂,美国医疗协会也将L-阿拉伯糖列入抗肥胖剂的营养补充剂或非处方药。研究表明,L-阿拉伯糖能够非竞争性地抑制肠内蔗糖酶的活力,调节摄取蔗糖后的血糖效应,从而抑制过多的蔗糖转化体内脂肪,用于防治肥胖 和高血脂等疾病[1-2]。同时有报道表明L-阿拉伯糖可以降低由高糖高脂所引起肥胖兔子脂肪指数[3]。但L-阿拉伯糖对大鼠单纯喂饲高脂饲料引起的体内脂肪堆积的影响鲜见报道。本研究探讨了L-阿拉伯糖对大鼠因喂饲高脂饲料引起的体内脂肪堆积的抑制作用。   1材料与方法   1.1材料L-阿拉伯糖(纯度98%,HPLC);高脂营养饲料:基础饲料80%,猪油10%,蛋黄粉10%。饲料来源:军事医学科学院实验动物中心;饲料合格证号:SCXK-(军)2007-005。 1.2动物清洁级雄性Wistar种大鼠50只,体重140~172 g,由军事医学科学院实验动物中心提供,动物合格证号:SCXK-(军)2007-004。饲养环境:室温20.0~22.5℃,相对湿度为45.5%~50.0%,单笼饲养。动物实验室合格证号:SYXK(京)2008-0001号。 1.3方法选用健康成年雄性大鼠50只,根据体重水平随机分为5个组,即阴性对照组、肥胖模型组及3个受试物剂量组,按人体每日推荐摄入量6 g/人/日计算,3个剂量组剂量分别为低剂量组(500 mg/kg)、中剂量组(1 000 mg/kg)、高剂量组(3 000 mg/kg),每组10只动物。除阴性对照组给普通饲料外,其他各组均给予高脂饲料喂养。灌胃给予不同剂量的受试物,两 对照组灌胃给予同体积的去离子水,均按1 ml/100 g灌胃给予32 d,灌胃1次/d。实验结束前禁食16 h,称体重后断头处死并解剖称取腹部睾丸及肾周围脂肪。 1.4观察指标每周称体重一次并记录大

铝依赖的拟南芥离子转运具有低pH和铝响应的特异性

铝依赖的拟南芥离子转运具有低pH和铝响应的特异性

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

铝依赖的拟南芥离子转运具有低pH和铝响应的特异性 Aluminum-dependent dynamics of ion transport in Arabidopsis: specificity of low pH and aluminum responses      土壤的酸性是限制植物分布的重要因素,世界上超过40%的耕地是酸性土壤。在酸性土壤中,作物生长受到不同的毒性(H+, Al3+, Mn2+)和营养物质的影响,在这些复杂的因素中,Al3+ 和H+的毒性与植物的生长具有高度的相关性。植物的铝毒性主要是当土壤中的pH低于4.5时的Al3+的作用。因此,为了繁育出更加忍耐酸性土壤的植物,有必要研究H+和Al3+的毒性机制。      澳大利亚的科学家使用非损伤微测技术研究了拟南芥对Al3+和低pH响应的离子转运机制。Al3+毒性早期的症状是抑制了根的生长,随后发现低pH减小了H+内流进入根组织,引起了细胞质的酸化。相反,低pH和Al3+共同胁迫减小了伸长区的H+内流,诱导了成熟区的H+外流,导致了细胞所有区域的碱化。低pH诱导了伸长区根际pH的增加,但是低pH和Al3+共同胁迫导致了所有根部区域的pH下降。低pH胁迫减轻了K+的外流,诱导了质膜的去极化,低pH和Al3+共同胁迫显著减少了质膜去极化。处理60min后,低pH引起了质膜去极化,但是低pH和Al3+共同胁迫引起了质膜的超极化。      这项研究发现了低pH和Al3+毒害对根组织和根际的影响有差异,低pH和Al3+减少了野生型拟南芥根部增加酸性环境中根际pH的能力。这可能为研究植物适应非生物胁迫的不同机制提供了基础。   关键词:非损伤微测技术,低pH值(Low-pH),Al3+,H+,K+ 参考文献:Bose J, et al. Physiologia Plantarum, 2010, 139: 401-412. 全文下载:

Isolation of human primary airway smooth muscle

Isolation of human primary airway smooth muscle

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

Isolation of human primary airway smooth muscle          1. Primary cultures of human primary airway smooth muscle (ASM) cells were prepared from explants of airway smooth muscle. 2. The human trachea tissue was transported to the laboratory in primary cell culture medium containing 10% fetal calf serum (FCS), primary cell culture supplements, penicillin G (100 u ml−1), streptomycin (100 μg ml−1), amphotericin B (2.5 μg ml−1) and L-glutamine (4 mm). 3. The human trachea tissue was then washed 5 times in the same medium. 4. The trachea muscle was then dissected free of epithelium and connective tissue under sterile conditions. 5. Small (2 × 2 mm) explants of airway smooth muscle were then excised and about 10 explants placed in small dishes. 6. After explants were allowed to adhere, primary cell culture medium, containing FCS, antibiotics, primary cell culture supplements, amphotericin B and L-glutamine, was added to cover the explants. 7. The explants were incubated in humidified 5% CO2/95% air at 37°C. 8. The medium was changed every 3 days. 9. Smooth muscle cells were usually seen about 7 days later. 10. When cells were about to become confluent in some parts of the dish, the explants were removed. 11. Once confluent, cells were trypsinized with 0.25% trypsin and 0.02% EDTA in phosphate-buffered saline (PBS), centrifuged and resuspended in the above medium, counted and plated out in several 75 cm2 flasks and grown to confluence. 12. Cells were then detached with trypsin-EDTA, resuspended in 90% FCS + 10% dimethyl sulphoxide at a density of 106 cells ml−1, frozen in liqui

ATP生物发光技术的发展与应用

ATP生物发光技术的发展与应用

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

ATP生物发光技术的发展与应用      ATP是化学物质三磷酸腺苷的简称,存在于所有的生物体中(从微生物到高等动物),ATP在细胞体内主要作用是提供能量。鉴于ATP存在于所有生物体中,利用ATP发光检测仪检测ATP,可以间接地证明生物体的存在。随着食品行业对食品卫生质量要求越来越高,而且ATP生物发光法在检测食品微生物时简单、快速且灵敏度高,因此近年来受到广泛关注。   1 ATP生物发光技术的发展过程      ATP生物发光技术产生于20世纪70年代中期。1983年,Moyer[1]等最早提出细胞内源性ATP的含量可以反映细胞的活性和活细胞的数量。同年Gronroos[2]等也证实该技术是一种可靠、灵敏度高的确定细胞活性度的检测方法。20世纪80年代,英国人首先研制出ATP检测仪检测系统,随后发展到欧洲、美国和日本。应用范围涉及食品加工、超市和饮食行业,检测内容包括微生物和食品残渣。1998年,日本国会颁布了《关于食品制造过程管理高度化临时措施法》,其中即包含了应用ATP检测仪检测系统的内容。1999年,日本还成立了ATP涂抹检查研究会,专门研究该方法的使用效率和应用领域,其内容之一就是在食品卫生监测领域中,解决现场微生物的检测问题。20世纪末,一些ATP检测仪检测系统及技术被引进我国,到目前为止,除个别省级卫生监督检测单位装备外,主要是在一些外资或合资企业中自行检测使用。2002年,我国卫生部颁发了食品加工企业HACCP实施指南,鼓励食品加工企业引入ATP检测系统。近年来,虫荧光素酶已通过基因工程生产,价格大幅度降低,随着相关仪器的小型化,ATP生物发光技术必将会在国内相关行业得到迅速普及[3] 。   2  ATP生物发光法菌落计数与传统方法的比较   2.1  ATP生物发光法菌落计数      ATP广泛存在于各种活的生物体中,活的菌体中也含有ATP。细菌死亡后,在细胞内酶的作用下,将很快被分解掉。ATP生物荧光检测是基于生物发光体系的发光机理所设计,萤火虫具有特殊的发光物质——虫荧光素及荧光素酶,荧光素易被氧化

如何从粪便中快速提取基因组DNA(无抑制物,可直接做PCR)

如何从粪便中快速提取基因组DNA(无抑制物,可直接做PCR)

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

如何从粪便中快速提取基因组DNA(无抑制物,可直接做PCR)  关键词:粪便DNA提取   粪便基因组提取   基因组DNA提取 北京艾德莱提供粪便基因组DNA快速提取采用硅胶膜技术从新鲜或冷冻人类粪便或其他样品类型(混有高浓度的PCR抑制剂)中抽提多至30μg 的基因组、细菌、病毒和寄生物DNA。独特的吸附树脂配合经优化的缓冲液可去除PCR抑制剂。方便的Aidlab 离心柱纯化过程只需40分钟,用于从粪便中纯化最多30μg 基因组、细菌、病毒和寄生虫DNA;快速纯化高品质,即用型DNA;无有机提取或乙醇沉淀;持续的高产量;彻底去除污染物和下游反应抑制物。纯化的DNA长度可达50 kb。该长度的DNA变性完全,并具有最高的扩增效率。高纯度的DNA可直接用于下游扩增反应。原理,方法,操作一致。完美替代Qiagen公司QiaAmp DNA Stool Mini Kit。  详细介绍: v         产品介绍: 常规的DNA纯化方式并不能有效地去除粪便中存在的大量抑制因子而导致下游实验的失败,如PCR不能扩增出所需片段。该试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统,能有效去除动物粪便中各种影响下游实验(如PCR)的抑制因子,并能高效地回收粪便中的基因组DNA。动物粪便样品经特殊缓冲液ASL重悬后,70℃处理5分钟裂解细菌;离心去除不溶解的杂质,蛋白酶K消化进一步去除蛋白和杂质;然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。 v         产品特点: 1.          离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 2.          不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。 3.          快速,简捷,单个样品操作一般可在40分钟内完成。 4.          多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD28

Isolation of human atrial or ventricular cells

Isolation of human atrial or ventricular cells

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

Isolation of human atrial or ventricular cells         1. Human tissue was derived from atrial or ventricular biopsy specimens belonging to patients undergoing heart surgery. 2. Isolated myocardial tissue was cut into 1- to 2-mm3 pieces. 3. Isolated myocardial tissue was washed with Ca2+ -Mg2+–free phosphate-buffered solution (PBS). 4. Isolated myocardial tissue was digested three times for 5 minutes at 37°C with 0.2% trypsin and 0.1% collagenase IV. 5. The obtained cells were discarded, and the remaining tissue fragments washed with primary cell culture medium and primary cell culture supplemented with 10% fetal calf serum, 100 U/mL penicillin G, 100 µg/mL streptomycin, and 2 mmol/L L-glutamine were cultured at 37°C and 5% CO2. 6. Twenty-four hours later, the medium was again replaced with primary cell medium and supplement.

细胞培养技术若干问题与注意事项、解决方案

细胞培养技术若干问题与注意事项、解决方案

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

细胞培养技术常见问题解答 一、 细胞培养基础问答   1.BHK细胞就是指BHK21吗?   答:BHK细胞是指幼年叙利亚地鼠肾细胞(Baby Hamster Syrian Kidney),1961年建株。原始的细胞株是成纤维细胞,贴壁依赖性。1963年获得单细胞克隆细胞。后经无数次传代后细胞可悬浮生长,它广泛用于增殖各种病毒,生产兽用疫苗。 最常用的是BHK21的一个亚克隆细胞,即克隆13或C13 。 2.二倍体细胞有什么特点?   答:二倍体细胞的染色体组型是2n核型;贴壁依赖接触抑制;一般可传代50代;无致瘤性。如W1-38:正常胚肺组织人二倍体细胞系。MRC-5:从正常男性肺组织中获得的人二倍体细胞系 。 3.什么是动物细胞大规模培养?   答:所谓动物细胞大规模培养技术(large-scale culture technology)是指在人工条件下(设定pH、温度、溶氧等),在细胞生物反应器(bioreactor)中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。目前可大规模培养的动物细胞有鸡胚、猪肾、猴肾、地鼠肾等多种原代细胞及人二倍体细胞、CHO(中华仓鼠卵巢)细胞、BHK-21、Vero细胞(非洲绿猴肾传代细胞)等,并已成功生产了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、红细胞生成素、单克隆抗体等产品。 在过去几十年来,细胞培养技术经有了很大发展,从使用转瓶(roller bottle) 、CellCube等贴壁细胞培养,发展为生物反应器(Bioreactor)进行大规模细胞培养。   4.细胞体内外培养的差别是什么?   答:细胞离体后,失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响,生活在缺乏动态平衡相对稳定环境中,日久天长,易发生如下变化:分化现象减弱;形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡;或发生转化获得不死性,变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此,培养中的细胞可视为一种在特定的条件下的细胞群体,它们既保持着与体内细胞相同的基本结构和功能,也有一些不同于体内细胞的性状。实际上从细胞一旦被置于体外培养后,这种差异就开始发生了

植物胞外ATP信号转导通过质膜NADPH氧化酶和Ca2+通道进行传递

植物胞外ATP信号转导通过质膜NADPH氧化酶和Ca2+通道进行传递

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

ATP是一种普遍的胞内能量,也作为胞外信号物质。胞外的ATP调节高等植物的生长和适应性。虽然胞外的ATP能够提高植物胞质中的自由Ca2+,但是这种机制一直不清楚。       英国剑桥大学的科学家使用非损伤微测技术等手段,研究了拟南芥根对胞外ATP的反应,从而揭示了胞外ATP的作用机制。发现胞外的ATP引起了活性氧(ROS)的产生,而质膜NADPH氧化酶AtRBOHC是ROS的主要贡献者。胞外ATP的感受部位在质膜,胞外ATP增加了根部Ca2+的内流,引起了质膜Ca2+的通透性,激活了19-pS通道,增加了AtrbohC NADPH氧化酶的活性。Ca2+的转导位于ATP 激活的AtRBOHC的下游,ATP诱导的转录需要AtRBOHC的参与。       这个研究表明高等植物虽然缺少嘌呤受体同源异形体,却演化出了一个截然不同的机制传递质膜上的ATP信号。为我们提供了胞外ATP如何影响植物的生长和适应性的机制,接下来我们可以研究ATP所引起的各种离子流的改变与植物生长发育的关系,非损伤微测技术是研究活体材料离子流的最佳工具。   关键词:ATP,Ca2+,通道(Channel),MAP激酶,活性氧(ROS) 参考文献:Demidchik V et al. The Plant Journal, 2009, 58: 903–913. 全文下载:

机器视觉工业镜头分类及结构简介

机器视觉工业镜头分类及结构简介

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

镜头是集聚光线,使胶卷能获得清晰影像的结构。早期的镜头都是由单片凸透镜所构成。因为清晰度不佳,又会产生色像差,而渐被改良成复式透镜,即以多片凹凸透镜的组合,来纠正各种像差或色差,并且借着镜头的加膜(coating)处理,增加进光量,减少耀光,使影像的素质大大的提高。 根据应用场合镜头可分为以下几种: • 广角镜头:视角90度以上,观察范围较大,近处图像有变形。 • 标准镜头:视角30度左右,使用范围较广。 • 长焦镜头:视角20度以内,焦距可达几十毫米或上百毫米。 • 变焦镜头:镜头焦距连续可变,焦距可以从广角变到长焦,焦距越长成像越大。 • 针孔镜头:用于隐蔽观察,经常被安装在如天花板或墙壁等地方。 镜头结构:   镜头结构可以理解为镜头的构造,其主要是由镜片构成的。目前任何一款相机的镜头都不可能是由一块镜片组成,标准镜头和功能型附加镜头都是如此。一个镜头往往是由多块镜片构成,根据需要这些镜片又会组成小组,从而把要拍摄的对象尽可能清晰、准确的还原。   镜头的结构主要指的是构成镜头的镜片数目情况。由于不同厂商、不同产品采用的技术是不同的,因此绝不能简单的认为镜片的数目多好还是数目少好。   除了镜片的数目之外,镜头的材质也是镜头结构的一个重要的技术指标。目前镜头的材质一般可以分为两类:玻璃和塑料。这两种材质是和镜头生产商所采用的技术和特点有关的,两种材质并无优劣之分。两种材质的镜头也都有各自的特点:比如玻璃镜头稳重、塑料镜头轻巧。

图像处理原理简介

图像处理原理简介

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

所谓“图像”泛指所有实际存在含有某种消息的信号,如含有人、事、物等的照片,而红外线摄影所获得的信号,则表示某些物体的温度分布。所谓图像处理就是为了某种目的对图像的强度(灰度值)分布视为一连串整数值的集合,经由不断的运算执行某些特定的加工和分析。       图像处理涵盖的范围十分很广泛,但是,所采用的基本原理和方法是一致的。整体说来,图像处理这门科学所研究的主要内容包括了图像数的模数转化(A/D Image Transform)、图像的增强与复原(Image Enhancement and Restoration)、图像编码与压缩(Image Encoding and Compression)、图像切割(Image Segmentation)、图像的表示和描述(Image Representation and Description)、图像特征匹配(Image Feature Matching)等。       图像切割:就是将图像中之标的物析出的处理过程。图像切割是图像分析过程中最重要的步骤之一,一般所采用的方法主要是边缘检测(Edge Detection)及临界值法(Thresholding)。       图像特征匹配:首先来了解一下特征匹配法中的“征”。举例来说,若要描述一个人,首先要说明他的特征。在外表方面,例如身高、体重等;在心理方面,例如和善的、好胜的、沉默的等;在事业方面,例如职业、收入等。       所谓匹配(Matching)或者说是“比对”,即将物体的特征与预存在计算机中之原型(Proto types)或样版(Template)的特征加以比较,若相似度(Similarity)或非相似度(Dissimilarity)小于或大于某预设的门槛值(Threshold),则称两者匹配成功。匹配较倾向属于图形辨认(Pattern Recognition)范围,原因在于其中含有“分类”(Classification)或“辨认"(Repetition)意味。       特征匹配的常用方法有许多种:如最近邻居法(Nearest Neighbor Method)、二元决策树法(The Binary Decision Tree Method)、属于动态规画法(Dynamic Programming)的DP匹配法等。       特征匹配目的在于,使具有相同或类似待征的物体产生关联,以便于辨认或分类。图像处理在交

用于二氧化氯检测的DPD分光光度法应用研究

用于二氧化氯检测的DPD分光光度法应用研究

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

用于二氧化氯检测的DPD分光光度法应用研究 深圳市观澜自来水有限公司 黄晓平 钟笑颜   1  前言 作为强氧化剂和广谱消毒剂的二氧化氯,由于其诸多优点目前在我国广大中小型自来水厂已经得到越来越广泛的应用 2   DPD比色法简介 DPD 分光光度法是我国国家标准《水质词汇与分析方法》GB11898-89 中用于检测游离余氯和总余氯的标准方法,在美国公共卫生协会、美国自来水厂协会和水污染控制联合会联合编著的《水和废水标准检验法》中,从第十五版开始把DPD 法进行了发展,推荐为用于检验二氧化氯的标准方法。 DPD 法的优点 是能把二氧化氯和其它各种形式的氯(包括游离余氯、总余氯和亚氯酸盐等)分开,比较易于进行比色检验。这种方法不如电流滴定法那么准确,但所得结果可以满足多数一般性用途。 3 原理 在PH6.2~6.5 条件下,ClO2首先在第一步与DPD 反应生成红色化合物,但出现量只达到其总有效氯含量(相当于把ClO2还原为亚氯酸盐离子)的五分之一。如果水样在含有碘化物的情况下被酸化,亚氯酸盐和氯酸盐也起反应,当再加入重碳酸盐中和时,由此产生的颜色与ClO2 的总有效氯含量相对应。游离氯的干扰可以通过加入甘氨酸来抑制游离氯,根据是甘氨酸能立即把游离氯转化为氯代氨基醋酸,但对ClO2不发生作用。 4 仪器 4.1 日本AND HM200 型万分之一电子天平 4.2 美国HACH DR/2010 分光光度计 5 试剂(所用试剂均为分析纯级) 5.1 碘酸钾标准储备液,1.006g/L:称取1.003g碘酸钾(KIO3,经120~140℃烘干2h),溶解于高纯水,转入1000ml 容 量瓶稀释至标线,混匀。 5.2 碘酸钾标准使用液,10.06mg/L:取10.0ml储备液(4.1)于1000ml容量瓶中,加入约1g碘化钾(4.5),加水稀释至标线,混匀。在使用的当天配制,装在棕色瓶中。1.00ml此标准使用液含10.06μg KIO3,相当于1.00mg/L 有效氯。 5.3 磷酸盐缓冲液:溶解 24g 无水磷酸氢二钠和 46g 无水磷酸二氢钾于蒸馏水中,再混入溶有 800mgEDTA 二钠盐的蒸馏水 100ml。用蒸馏水稀释成1

工业相机扫描方式简介

工业相机扫描方式简介

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

工业相机按照扫描方式可以分为隔行扫描相机、逐行扫描相机。   大多数显示器和相机都是以隔行方式扫描,但实际上人眼看来仍然像一个平滑的图像,相机一般先获取图像的奇数行,对于CCIR标准,它在1/50秒后再获取偶数行,而对于EIA标准,在1/60秒后再获取偶数行。   绝大多数相机都是间隔式转移的,即隔行扫描(interlace),当用来拍摄运动物体时,就会出现梳状效应。为消除这种效应,可以只采集一半的图像(只使用奇数行或偶数行),如果要求完全的分辨率,必须利用逐行扫描(Progressive Scan)相机。   在机器视觉应用中,物体通常移动很快。当利用隔行扫描相机时,在两场之间可能物体都有移动,结果就会是一副模糊的图像,就像是两次曝光或者是在垂直边缘有梳状效应。为了解决这种影响,可以将隔行扫描相机设成只扫描一个场,这样垂直分辨率将会减半,而帧采集速率将会提高一倍,相机的这种操作被称为场模式,或者非隔行输出,对许多机器视觉应用都很有用。   场模式还能够提供敏感度加倍的好处,由垂直像素BINNING得到(像素BINNING是指CCD传感器的一个特殊读出模式,传感器将2个或多个像素绑定到一起锁定,从多个像素积累的电荷求和),场模式虽然可以提高帧速度、敏感性以及信噪比,但会降低分辨率,在要求对快速运动的物体完全垂直分辨率的应用中,应该使用逐行扫描相机。

A novel in vitro 3-dimensional angiogenesis model

A novel in vitro 3-dimensional angiogenesis model

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

A novel in vitro 3-dimensional angiogenesis model    1. Human microvascular endothelial cells (HMVECs) with primary cell kits were cultured on collagen type I-coated dishes to 80% confluency, then overlaid with acellular collagen prepared in primary cell medium and supplemented with heparin, vitamin C, endothelial cell growth serum, and 10% FBS. 2. After polymerization, the collagen was overlaid with a second collagen layer containing 5 x 105 cells/mL primary human dermal fibroblasts. 3. Endothelial cell growth medium was changed every 48 h. 4. Labeling of the endothelial cells with DiI and subsequent in situ observation of the reconstruct by inverted fluorescence microscopy showed that detachment of the endothelial cells from the substrate and migration into the acellular collagen layer began within 4 h. 5. After 24 h, the endothelial cells had migrated through the acellular collagen into the fibroblast-containing collagen layer and were found there throughout with increasing density over time. 6. Double staining for the proliferation marker Ki67 and endothelial-specific marker von Willebrand factor (vWF) demonstrated that endothelial cells proliferated in the matrix even after 5 days. 7. The endothelial cells came into close contact with fibroblasts and began forming vacuoles within 2 days and aligned into cords that structured into branching networks within 3–5 days. 8. Capillary networks formed by day 4 to 5 and increased through day 11.   Reference: OMAIDA C. VELAZQUEZ, RUTHANNE SNYDER, ZHAO-JUN LIU, RONALD M. FAIRMAN and MEENHARD HERLYN. Fibroblast-dependent diffe

Primary cardiac fibroblast and cardiomyocyte isolation

Primary cardiac fibroblast and cardiomyocyte isolation

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

Primary cardiac fibroblast and cardiomyocyte isolation 1. Ventricles were removed under sterile conditions. 2. Ventricles were placed in cold sterile primary cell culture medium, minced into approximately 2 mm cubes and treated with solution of primary cell isolation. 3. Tissue fragments retained on 105 μm nylon mesh were placed in primary cell culture medium containing 1% bovine serum albumin (BSA) and 100 μM CaCl2, teased apart with sterile forceps and dispersed by trituration using a wide-bore pipette. 4. Tissue fragments were removed and the cell suspension was adjusted to 500 μM CaCl2 and centrifuged over a 5 ml cushion of primary cell culture medium containing 6% BSA. 5. The resulting cardiomyocyte-enriched pellet was resuspended in primary cell culture medium containing primary cell culture supplement and 10% fetal bovine serum and seeded on 100 mm collagen-coated tissue culture plates for 3 h at 37 °C in a CO2 incubator to remove non-myocyte cells. 6. Non-adhered cardiomyocytes were collected and stored at −80 °C. 7. For cardiac fibroblast isolations, ventricles were removed as noted above, minced and incubated in Hank's buffer containing trypsin (0.1 mg/ml) and collagenase (50 units/ml) for 10 consecutive 10 min treatment periods at 37 °C. 8. Cells from each digestion period were pooled, resuspended in primary cell culture medium containing primary cell culture supplement and 10% FBS and seeded in standard culture dishes for 8 h. 9. Non-adherent debris was discarded and the attached fibroblasts were maintained in primary cell culture medium incuding 10% FBS, scrap

相对湿度平衡的概念

相对湿度平衡的概念

作者:德尔塔 日期:2022-05-04

什么是相对湿度?      在相同温度下,空气中水汽含量与饱和水汽含量之间的比例。       详细解释:压力为P,温度为T的湿空气的相对湿度是指给定的湿空气中,水汽的摩尔分数怀同一温度T和压力P下纯水表面的饱和水汽的摩尔分数之比,用百分数表示。     相对湿度是两个压强值之比: %RH = 100 x p/ps      在这里p 是周围环境中水蒸汽的实际部分压强值;ps是周围环境中水的饱合压强值,     相对湿度传感器通常是在标准室温情况下校准的(高于0度),相应的,通常认为这种传感器可以指示在所有温度条件下的相对湿度(包括在低于0度的情况),冰会产生的蒸汽压强低于液态水。因此,当液态水以冰的形式出现时,冷凝会相对湿度低于100%的情况下产生。     相对湿度平衡        吸湿性物质会竭力保持它本身湿度与周围环境湿度之间的平衡。物质中的水会在其表面产生水汽压(PM),而周围大气中的水也会产生水汽压 (P)。如果PM 与P 相同话,物质就与其环境实现了相对湿度平衡。PM 与 P的任何不同都会产生湿度交换,从而导致物质湿气含量的变化,直至达到相对湿度平衡。因此,物质的相对湿度平衡被定义为不会导致湿气交换的周围大气中的相对湿度。(大气的湿度必大于物质湿度) 水汽压和相对湿度         大气中水汽的含量虽然不多,却是大气中极其活跃的成分,在天气和气候中扮演着重要的角色。大气中的水汽含量有很多种测量方法,日常生活中人们最关心的是水汽压、绝对湿度和相对湿度。     水汽压(e)是大气压力中水汽的分压力,和气压一样用百帕来度量。以前气压和水汽压常以水银柱的毫米数来测度,1百帕=0.75008毫米水银柱。在一定温度下空气中水汽达到饱和时的分压力,称为饱和水汽压(E)。饱和水汽压随着气温的升高而迅速增加。    绝对湿度(a)指单位体积湿空气中含有的水汽质量,也就是空气中的水汽密度,单位为克/厘米3或千克/米3。绝对湿度不容易直接测量,实际使用比较少。如果水汽压的单位为百帕,绝对湿度的